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Konfokale Mikroskopie zur Messung von drei Modi der Fusionsporendynamik in Nebennierenchromaffinzellen
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Nörobilim
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JoVE Journal Nörobilim
Confocal Microscopy to Measure Three Modes of Fusion Pore Dynamics in Adrenal Chromaffin Cells

Konfokale Mikroskopie zur Messung von drei Modi der Fusionsporendynamik in Nebennierenchromaffinzellen

DOI:

12:30 min

March 16, 2022

, , ,

Bölümler

  • 00:04Introduction
  • 01:07Bovine Chromaffin Cell Culture
  • 02:52Transfection with Electroporation
  • 04:18Preparation for Patch-Clamp Recording and Confocal Imaging
  • 05:41Patch-Clamp Recording and Confocal Imaging
  • 09:01Confocal Imaging Data Analysis
  • 10:21Results: Whole-Cell Voltage-Clamp Recordings and Visualization of Fusion Events Under Confocal Microscope
  • 11:52Conclusion

Özet

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Dieses Protokoll beschreibt ein konfokales Bildgebungsverfahren zum Nachweis von drei Fusionsmodi in rindischen Nebennierenchromaffinzellen. Diese Fusionsmodi umfassen 1) Close-Fusion (auch Kiss-and-Run genannt), bei der sich die Fusionspore öffnet und schließt, 2) Stay-Fusion, bei der die Fusionspore geöffnet und die geöffnete Pore erhalten bleibt, und 3) Shrink-Fusion, einschließlich der Schrumpfung der fusionierten Vesikel.

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