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Investigación de la síntesis de RNA utilizando 5-Bromouridine etiquetado e inmunoprecipitación
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Investigation of RNA Synthesis Using 5-Bromouridine Labelling and Immunoprecipitation
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Investigación de la síntesis de RNA utilizando 5-Bromouridine etiquetado e inmunoprecipitación

DOI:
10.3791/57056-v

•

09:59 min

•

May 03, 2018

•

, , , ,
1DANDRITE – Danish Research Institute of Translational Neuroscience, Dept. of Biomedicine,Aarhus University, 2Dept. of Molecular Biology and Genetics,Aarhus University

Bölümler

  • 00:04Başlık
  • 00:37RNA Sample Preparation
  • 02:37Immunoprecipitation Bead Preparation
  • 04:51Binding BrU-labelled RNA to Beads
  • 05:46RNA Elution Purification
  • 08:29Results: Increase in Steady State RNA Caused by Increase in RNA Synthesis
  • 09:35Conclusion

Özet

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Este método puede utilizarse para medir la síntesis de ARN. 5-Bromouridine se añade a las células e incorporado en el RNA sintetizado. Síntesis de ARN se miden por la extracción de RNA inmediatamente después del etiquetado, seguido de la inmunoprecipitación de 5 Bromouridine-orientada con RNA y análisis por transcripción reversa y reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa.

Etiketler

RNA Synthesis5-bromouridine LabelingImmunoprecipitationHEK293T CellsRNA ExtractionMagnetic BeadsBromouridine-IP Buffer

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