Summary

Modelo Experimental de Periimplantite Induzida por Ligadura em Camundongos

Published: May 17, 2024
doi:

Summary

Este é um relato de um modelo experimental de periimplantite induzida por ligadura em camundongos. Descrevemos todos os passos cirúrgicos, desde o manejo pré e pós-operatório dos animais, extrações, colocação de implantes e periimplantite induzida por ligadura.

Abstract

Os implantes dentários têm uma alta taxa de sucesso e sobrevivência. No entanto, complicações como a periimplantite (IP) são altamente desafiadoras de tratar. O IP é caracterizado por inflamação nos tecidos ao redor dos implantes dentários com perda progressiva do osso de suporte. Para otimizar a longevidade dos implantes dentários em termos de saúde e funcionalidade, é crucial compreender a fisiopatologia da peri-implantite. Nesse sentido, o uso de modelos de camundongos em pesquisas tem comprovado benefícios claros na recriação de circunstâncias clínicas. Este estudo teve como objetivo descrever um modelo experimental de periimplantite induzida por ligadura em camundongos e determinar se há efetividade na indução desta doença, dadas as alterações ósseas e teciduais observadas. A indução experimental da periimplantite compreende as seguintes etapas: extração dentária, colocação do implante e PI induzido por ligadura. Uma amostra de dezoito camundongos machos C57BL/6J com 3 semanas de idade foi dividida em dois grupos, ligadura (N=9) e controle não ligadura (N=9). Foi realizada avaliação de fatores clínicos, radiográficos e histológicos. O grupo ligadura apresentou perda óssea significativamente maior, aumento do edema de partes moles e migração epitelial apical do que o grupo sem ligadura. Concluiu-se que este modelo pré-clínico pode induzir periimplantite com sucesso em camundongos.

Introduction

Os implantes dentários são cada vez mais prevalentes como uma escolha desejável para substituir dentes perdidos1. Projeta-se que a prevalência de implantes dentários na população adulta dos EUA aumente até 23% até 20262. Com base em um relatório de análise de mercado da Grand View Research (2022), o tamanho do mercado global de implantes dentários foi projetado para atingir aproximadamente US $ 4,6 bilhões em 2022. Além disso, prevê-se que apresente uma taxa de crescimento anual constante de cerca de 10% até ao ano de 20303. Infelizmente, o uso de implantes dentários pode levar a complicações, como a periimplantite. A periimplantite tem sido definida como uma condição induzida por biofilme caracterizada por inflamação na mucosa peri-implantar e subsequente perda progressiva do osso desustentação4.

Uma revisão sistemática constatou que a prevalência média de periimplantite foi de 19,53% (intervalo de confiança [IC] 95%, 12,87 a 26,19%) no nível do paciente e 12,53% (IC 95% 11,67 a 13,39%) no nível do implante5. A periimplantite representa uma saúde pública crescente, devido ao aumento da falha do implante e, consequentemente, dos custos substanciais dotratamento6.

A compreensão da patogênese da periimplantite é crucial para o desenvolvimento de uma abordagem sistemática que previna seu aparecimento e progressão e maximize a longevidade dos implantes dentários em termos de estética efunção7,8. Nesse sentido, o uso de modelos murinos em pesquisas odontológicas tem se mostrado vantajoso, uma vez que camundongos compartilham mais de 95% de seus genes com humanos 9,10, o número de bancos de dados genéticos on-line disponíveis e a capacidade de reproduzir cenários clínicos11. Todas as vantagens descritas permitem a dissecção de mecanismos genéticos em diferentesdoenças12, acomodações e manejo acessíveis e anticorpos amplamente disponíveis na forma de painéis humanos, além da disponibilidade de modificações genéticas (por exemplo, knockout e superexpressão) para avaliação do tecido inflamatório e mapeamento dadoença13. Apesar de vantajosa, há poucas publicações abordando a periimplantite em camundongos. Isso se deve a desafios metodológicos, entre outros, incluindo a dificuldade na obtenção de mini-implantes ou sua instalação.

Para o desenvolvimento de periimplantite em camundongos, muitos protocolos têm sido descritos, como a periimplantite induzida por ligadura, a periimplantite induzida porbactérias14, a periimplantite induzida por lipopolissacarídeo (LPS)15 ou a combinação LPS + periimplantite induzida por ligadura16. Aqui, enfocaremos o modelo de ligadura por ser o método mais aceito para induzir periodontite17,18,19 e, mais recentemente, periimplantite20,21. A ligadura colocada ao redor dos implantes em posição submucosa estimula o acúmulo de placa e, consequentemente, a inflamação tecidual. Assim, o desenvolvimento dessa abordagem baseia-se na indicação de uma técnica custo-benefício viável para investigações pré-clínicas de doenças peri-implantares. Este estudo tem como objetivo descrever um modelo experimental de peri-implantite induzida por ligadura em camundongos e determinar se há eficácia na indução desta doença diante das alterações ósseas e teciduais observadas.

O objetivo geral deste artigo é relatar o protocolo aplicado para induzir peri-implantite em camundongos por ligadura e observar sua eficácia através da avaliação tecidual e perda óssea ao redor dos implantes.

Protocol

Procedimentos envolvendo cobaias animais foram aprovados pelo Chancellor’s Animal Research Committee da Universidade da Califórnia, Los Angeles (protocolo ARC número 2002-125), e pelo Animal Research: Reporting In Vivo Experiments (ARRIVE)22. Para este método, dezoito camundongos machos C57BL/6J com 3 semanas de idade foram utilizados e submetidos a extrações dentárias, colocação de implantes e indução de periimplantite. Todos os procedimentos odontológicos foram realizados sob aumento …

Representative Results

Para este método, dezoito camundongos machos C57BL/6J com 3 semanas de idade foram utilizados e submetidos a extrações dentárias, colocação de implantes e indução de periimplantite. Foram nove animais por grupo, o que foi estatisticamente significante, considerando a perda óssea linear atingindo 80% de potência, 15% de desvio padrão (σ) e intervalo de confiança de 95% (α=0,05). Os camundongos foram alimentados com dieta soft ad libitum durante o experimento. Nove camundongos receberam ligadura (gru…

Discussion

Este protocolo apresenta um relatório descritivo sobre procedimentos cirúrgicos para indução de periimplantite utilizando um modelo de ligadura em camundongos. O trabalho com camundongos apresenta vantagens, como o custo-benefício, a disponibilidade de um extenso arranjo genético dadas as diversas origens23, entre outros aspectos24,25. Ao longo dos anos, vários estudos utilizaram com sucesso camundongos nas áreas médica e odontol?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Este trabalho foi apoiado pelo NIH/NIDCR DE031431. Gostaríamos de agradecer ao Translational Pathology Core Laboratory da UCLA pelo auxílio no preparo dos cortes histológicos descalcificados.

Materials

#5 dental explorer Hu-Friedy, Chicago, IL 392-0911  Dental luxation
15c blade and surgical scalpel Henry Schein Inc., Melville, NY 1126186 Tissue incision
6-0 silk ligatures Fisher Scientific, Hampton, NH NC9201232 Ligature
Amoxicillin 50μg/mL Zoetis, San Diego, CA TS/DRUGS/57/2003 Oral suspension
Bacon Soft Diet Bio Serve®, Frenchtown, NJ 14-726-701
C57BL/6J male mice The Jackson Laboratories, Bar Harbor, ME, USA 000664 Age: 3-week-old
CTAn software V.1.16 Bruker, Billerica, MA Volumetric analysis
Dolphin software Navantis, Toronto, CA Linear bone analysis
Implant carrier & Tip D. P. Machining Inc., La Verne, CA Unique product  Implant holder
Implant support D. P. Machining Inc., La Verne, CA Unique product  Implant capture
Isoflurane  Vet One, Boise, ID NDC13985-528-60 Inhalational anesthetic
Micro-CT scan 1172 SkyScan, Kontich, Belgium μCT scans
Nrecon Software Bruker Corporation, Billerica, MA Images reconstruction
Ø 0.3mm – L 2.5mm Micro Drills  Sphinx, Hoffman Estates, IL ART. 50699  Osteotomy
Ø 0.5mm – L 1.0mm Titanium implants D. P. Machining Inc., La Verne, CA Unique product
Ophthalmic lubricant Apexa, Ontario, CA NDC13985-600-03 Artificial tears
Pin Vise General Tools, Secaucus, NJ 90 Osteotomy
Rimadyl 50mg/ml Zoetis, San Diego, CA 4019449 Anti-inflammatory
Sterile cotton tipped Dynarex, Glendale, AZ 4304-1 Hemostasis
Tip forceps Fine Science Tools, Foster City, CA 11071-10 Dental Extraction
Tying forceps Fine Science Tools, Foster City, CA 18025-10 Ligature placement

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de Araújo Silva, D. N., Casarin, M., Monajemzadeh, S., Menezes da Silveira, T., Lubben, J., Bezerra, B., Pirih, F. Q. Experimental Model of Ligature-Induced Peri-Implantitis in Mice. J. Vis. Exp. (207), e66316, doi:10.3791/66316 (2024).

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