从成年小鼠脊髓中分离纯星形胶质细胞和小胶质细胞，用于 体外 测定和转录组学研究

星形胶质细胞和小胶质细胞是多功能神经胶质细胞，在中枢神经系统 （CNS） 中起着至关重要的作用，包括调节神经元功能、促进中枢神经系统发育、维持血脑屏障以及参与其他关键过程^{等职责 1,2,3,4}.除了在维持体内平衡方面的作用外，这些神经胶质细胞在损伤和修复机制中也起着关键作用。小胶质细胞以其吞噬、炎症和损伤后的迁移能力而闻名 ^5,6,7。疾病中的星形胶质细胞反应同样多种多样，包括炎症、神经胶质瘢痕的形成和血脑屏障的损害 ^8,9。尽管我们对小胶质细胞和星形胶质细胞在中枢神经系统中的有害和修复作用的理解有所增长，但它们的结构和功能固有的异质性需要强大的工具来研究它们在各种情况下。

进一步了解小胶质细胞和星形胶质细胞在健康和疾病中的作用需要 体内 和 体外 研究的综合方法。 体内 技术利用神经胶质细胞和中枢神经系统内神经元之间错综复杂的串扰，而 体外 方法在评估特定刺激下的单细胞功能或反应时被证明是有价值的。每种方法都有独特的优势; 体外 研究对于了解这些细胞类型的特定作用至关重要，而无需来自邻近细胞的直接或间接输入。此外，利用永生细胞系的 体外 检测具有某些好处，包括无限增殖的能力、成本效益和易于维护。然而，重要的是要注意，与细胞系相比，原代细胞更接近地模仿正常的生理反应。这种生理相关性在功能测定和转录组学分析中至关重要。

获得原代细胞，特别是从成年小鼠脊髓中获取原代细胞的挑战之一在于样本的数量和活力。成人脊髓比大脑小，含有大量的髓鞘，这带来了独特的困难。虽然有几种已发表的方案详细说明了从新生动物或成年小鼠大脑中分离纯、活的神经胶质细胞^10,11,12,13，但这些方法可能不适合研究脊髓特异性的疾病和损伤。在该方案中，我们提供了一个全面的程序，可以有效地从成年小鼠脊髓中分离纯、活的小胶质细胞和星形胶质细胞，促进细胞培养和转录组学分析的下游应用。该方案已成功用于从10周至5个月的成年小鼠中分离这些细胞，证明了其在各种情况下的实用性，包括涉及条件敲除小鼠的研究，药物反应，发育研究和年龄相关模型。