Summary

土壌密度分別による異なる土壌炭素プールの分離

Published: December 16, 2022
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Summary

土壌密度分別は、土壌有機物を安定化メカニズム、化学的性質、および回転時間が異なる異なるプールに分離します。特定の密度を有するポリタングステン酸ナトリウム溶液は、遊離粒子状有機物と鉱物関連有機物の分離を可能にし、管理および気候変動に対する土壌応答を記述するのに適した有機物画分をもたらす。

Abstract

土壌有機物(SOM)は、遊離の部分的に分解された植物成分から、土壌凝集体に保持されているより微生物的に変化した化合物、反応性土壌ミネラルと強い関連を持つ高度に処理された微生物副産物まで、さまざまな化合物の複雑な混合物です。土壌科学者は、土壌を簡単に測定でき、土壌炭素(C)モデリングに役立つ画分に土壌を分離する方法を見つけるのに苦労してきました。密度に基づいて土壌を分画することがますます使用されており、SOMと異なる鉱物との関連性の程度に基づいて実行が容易でCプールが得られます。したがって、土壌密度分別は、SOMの特性評価とSOM安定化メカニズムの特定に役立ちます。ただし、報告されている土壌密度分別プロトコルは大きく異なり、さまざまな研究や生態系の結果を比較することは困難です。ここでは、粒子状有機物と鉱物関連有機物を分離する堅牢な密度分別手順について説明し、土壌を2つ、3つ、またはそれ以上の密度画分に分離することの利点と欠点について説明します。そのような画分は、それらの化学的およびミネラル組成、代謝回転時間、ならびに微生物処理の程度、ならびにミネラル安定化の程度においてしばしば異なる。

Introduction

土壌は陸生炭素(C)の最大の貯蔵庫であり、上部1mに1,500Pg以上のCを含み、世界のより深いレベルではそのほぼ2倍の量であるため、土壌には植物バイオマスと大気を合わせたよりも多くのCが含まれていることを意味します1。土壌有機物(SOM)は、水と土壌栄養素を保持し、植物の生産性と陸域生態系の機能に不可欠です。土壌の健康と農業生産性にとって適切なSOMストックの重要性が世界的に認識されているにもかかわらず、持続不可能な森林と農業の管理、景観の変化、気候温暖化により、土壌Cストックが大幅に枯渇しています2,3。土壌の健康を回復し、自然気候ソリューションの主要なプレーヤーとして土壌Cの保持を使用することへの関心の高まりは、多様な環境における土壌Cの隔離と安定化を制御する要因を理解するための努力につながりました4,5

土壌有機物(SOM)は、遊離の部分的に分解された植物成分から、土壌凝集体に保持されるより微生物的に変化した化合物(ここでは、別々のユニットまたはアイテムの組み合わせによって形成される材料として定義)から、反応性土壌ミネラルと強い関連を持つ高度に処理された微生物副産物までの範囲に及ぶさまざまな化合物の複雑な混合物です6.SOM内の個々の化合物の完全なスイートを特定することが現実的でない場合、研究者はしばしば、物理的現実として存在し、回転率、一般的な化学組成、および土壌のミネラル成分による安定化の程度によって異なるCの少数の機能プールを特定することに焦点を当てます17.プールを批判的に解釈しモデル化するためには、分離されたプールの数が少なく、理論的なものではなく直接測定可能であり、組成と反応性に明確な違いを示すことが不可欠です8

土壌Cの意味のあるプールを分離するために、化学的および物理的の両方の多くの異なる技術が採用されており、これらはvon Lützow et al.9およびPoeplau et al.10によってよく要約されています。化学的抽出技術は、結晶性の低いFeおよびAl11のいずれかに関連するCなどの特定のプールを単離することを目的としています。有機溶媒は、脂質12などの特定の化合物を抽出するために使用されており、SOMの加水分解または酸化のいずれかがC13,14の不安定なプールの尺度として使用されてきた。ただし、これらの抽出方法のいずれも、Cのすべてのプールを測定可能またはモデル化可能な画分に分類しません。土壌の物理的分別は、すべての土壌Cをサイズに基づいてプールに分類し、植物の破片の分解が断片化とますます小さな粒子をもたらすと仮定します。サイズだけでは、鉱物関連のSOM15から遊離植物の残骸を分離することはできませんが、これら2つのプールを定量化することは、形成と代謝回転における共通の空間的、物理的、および生物地球化学的違いによる土壌C安定化を理解するために重要です16

密度に基づく土壌Cの分画はますます使用されており、実行が容易であり、異なる鉱物との関連度に基づいてCの異なるプールを識別する17,18,19;したがって、土壌密度分画は、異なる土壌C安定化メカニズムの解明に役立ちます。分別される土壌の主な要件は、有機物と鉱物粒子を完全に分散させる能力です。分散すると、ミネラルを比較的含まない分解有機物は~1.85 g / cm 3より軽い溶液に浮遊しますが、ミネラルは通常2〜4.5 g / cm 3の範囲になりますが、酸化鉄の密度は最大5.3 g / cm3です。軽いまたは遊離粒子画分は、ターンオーバー時間が短くなる傾向があり(木炭による重大な汚染がない限り)、栽培やその他の障害に非常に敏感であることが示されています。重い(>1.85 g / cm3)またはミネラル関連画分は、有機分子が反応性鉱物表面と結合するときに得られる微生物媒介分解に対する耐性のために、ターンオーバー時間が長くなることがよくあります。しかしながら、重質画分は飽和する(すなわち、ミネラル錯化能力の上限に達する)可能性があるが、軽質画分は理論的にはほぼ無期限に蓄積することができる。したがって、鉱物関連有機物と粒子状有機物のプール内の有機物の物理的分布を理解することは、効率的な炭素隔離のためにどの生態系を管理できるか、そしてさまざまなシステムが気候変動と人為的撹乱の変化パターンにどのように反応するかを解明するのに役立ちます20

過去10年間で、さまざまな密度のポリタングステン酸ナトリウム溶液を使用した密度分画の使用が大幅に増加しましたが、技術とプロトコルは大きく異なり、さまざまな研究やさまざまな生態系の結果を比較するのは困難です。1.85 g / cm 3の密度は、ミネラル関連有機物(MAOM)17の包含を最小限に抑えて最大量の自由光画分を回収することが示されていますが、多くの研究では1.65〜2.0 g / cm3の範囲の密度を使用しています。ほとんどの研究では、土壌を2つのプール(軽フラクションとヘビーフラクション、以下LFとHF)に分画していますが、他の研究では、複数の密度を使用して、関連するミネラル、ミネラルと有機コーティングの相対比率、または凝集の程度(たとえば、 Sollins et al.17, Sollins et al.18, Hatton et al.21, Lajtha et al.22, Yeasmin et al.23, Wagai et al.24, Volk et al.25)。さらに、サイズと密度の両方の分離を組み合わせたより複雑な分画手順が提案されており、その結果、プールの数が多くなりますが(例:Yonekura et al.26、Virto et al.27、Moni et al.15、Poeplau et al.10)、方法論とプールサイズの両方においてエラーの余地も大きくなります。さらに、著者らはまた、鉱物表面から凝集体およびMAOMを分散させるために、様々な強度および時間で超音波処理を使用した28,29,30

ここでは、最初に土壌炭素の2つのユニークなプール(LFとHF、またはPOMとMAOM)を特定する堅牢な密度分別手順について説明し、HFプールをさらに鉱物学、有機コーティングの程度、または凝集に基づいて異なる追加の画分に分離するための技術と議論の両方を提供します。ここで同定された画分は、それらの化学組成、回転時間、微生物処理の程度、およびミネラル安定化の程度において異なることが示されている18,19

次の手順では、特定の密度の溶液に既知量の土壌を混合することにより、バルク土壌を粒子状有機物(POM)と鉱物関連有機物(MAOM)に分離します。手順の有効性は、初期土壌サンプル質量およびC含有量に対する土壌質量および炭素の複合回収によって測定される。ポリタングステン酸ナトリウム(SPT)を脱イオン水に溶解することにより、高密度溶液が得られます。土壌は最初に高密度SPT溶液と混合され、攪拌されて土壌凝集体を完全に混合および分散させる。次に、遠心分離を使用して、溶液中に浮遊(軽フラクション)または沈む(重いフラクション)のいずれかの土壌材料を分離します。混合、分離、回収、および洗浄のステップが複数回繰り返され、材料からのSPTの除去とともに、軽質画分と重質画分の分離が保証されます。最後に、土壌画分を乾燥させ、秤量し、C含有量について分析します。分画された材料は、後続の手順および分析に使用できます。

Protocol

1.ポリタングステン酸ナトリウム(SPT)の原液を作る 注意: SPTは刺激物であり、飲み込んだり吸入したりすると有害です。それは水生生物に有毒です。環境への放出を避けてください。 密度1.85 g/cm3のSPT溶液1 Lを作るには、結晶化SPT1,051 gを約600 mLの脱イオン蒸留(DDI)水に溶解します。SPTが完全に溶解するまで溶液を約15分間攪拌し、次にDDIで溶液?…

Representative Results

土壌密度分画は、土壌の粒子状および鉱物関連有機物含有量の違いを調査するのに理想的です。SOCをこれら2つの異なるプールに分離することで、バルク土壌C含有量の傾向を観察すると不明瞭な土壌C含有量の変化と安定化ダイナミクスを解明する手段が提供されます。重い材料(密度>1.85 g / cm3)をさらに分離すると、土壌Cの安定化の変化と傾向に関する追加の洞察が得られますが、手?…

Discussion

土壌密度分画プロトコル全体を通して、土壌画分の分離と分析のエラーを減らすために綿密に監視しなければならないいくつかの特定の手順があります。土壌密度分画手順の重要なステップは、SPT溶液の密度を繰り返し検証することです。土壌サンプル中の水分はSPT溶液を希釈することが多く、SPTの密度が低下します。したがって、研究者は、遠心分離後に軽溶液と重溶液の完全な分離が達?…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

この作業のために、国立科学財団助成金DEB-1257032からKLに、DEB-1440409からHJアンドリュース長期生態学的研究プログラムに支援が提供されました。

Materials

Aspirator/vacuum tubing 1/4 x 1/2" Kimble 10847-216
Conical polypropylene centrifuge tube, 250mL Thermo Scientific 376814
Conical rubber gasket for filtering flasks DWK Life Sciences 292020001
Double flat ended stainless steel spatula/scraper Fisher Scientific 14-373-25A
Glass fiber filter, grade GF/F, 110 mm Whatman WHA1825110
Glass mason jar, 16 oz Ball Corporation 500 ml beaker or glass weigh dish are also suitable 
Polypropylene conical bottle adapter, 250mL Beckman Coulter 369385
Porcelain buchner funnel, 90mm FisherBrand FB966F
Reciprocating shaker, 2-speed Eberbach E6000.00
Sidearm flask, 1000mL VWR 89000-386
Sodium Polytungstate, crystalline Sometu SPT-0 or SPT-1, see Discussion for SPT choice Shipping via FedEx from Germany
Swinging bucket centrifuge  Beckman Coulter 3362020

References

  1. Jackson, R. B., et al. The ecology of soil carbon: Pools, vulnerabilities, and biotic and abiotic controls. Annual Review of Ecology, Evolution, and Systematics. 48, 419-445 (2017).
  2. Crowther, T. W., et al. Quantifying global soil carbon losses in response to warming. Nature. 540 (7631), 104-108 (2016).
  3. Deng, L., Zhu, G., Tang, Z., Shangguan, Z. Global patterns of the effects of land-use changes on soil carbon stocks. Global Ecology and Conservation. 5, 127-138 (2016).
  4. Griscom, B. W., et al. Natural climate solutions. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (44), 11645-11650 (2017).
  5. Fargione, J. E., et al. Natural climate solutions for the United States. Science Advances. 4 (11), (2018).
  6. Kögel-Knabner, I., Rumpel, C. Advances in molecular approaches for understanding soil organic matter composition, origin, and turnover: A historical overview. Advances in Agronomy. 149, 1-48 (2018).
  7. Schmidt, M. W. I., et al. Persistence of soil organic matter as an ecosystem property. Nature. 478 (7367), 49-56 (2011).
  8. Billings, S. A., et al. Soil organic carbon is not just for soil scientists: Measurement recommendations for diverse practitioners. Ecological Applications. 31 (3), 02290 (2021).
  9. von Lützow, M., et al. SOM fractionation methods: Relevance to functional pools and to stabilization mechanisms. Soil Biology and Biochemistry. 39 (9), 2183-2207 (2007).
  10. Poeplau, C., et al. Isolating organic carbon fractions with varying turnover rates in temperate agricultural soils – A comprehensive method comparison. Soil Biology and Biochemistry. 125, 10-26 (2018).
  11. Heckman, K., Lawrence, C. R., Harden, J. W. A sequential selective dissolution method to quantify storage and stability of organic carbon associated with Al and Fe hydroxide phases. Geoderma. 312, 24-35 (2018).
  12. Frostegård, &. #. 1. 9. 7. ;., Tunlid, A., Bååth, E. Microbial biomass measured as total lipid phosphate in soils of different organic content. Journal of Microbiological Methods. 14 (3), 151-163 (1991).
  13. Plante, A. F., Conant, R. T., Paul, E. A., Paustian, K., Six, J. Acid hydrolysis of easily dispersed and microaggregate-derived silt- and clay-sized fractions to isolate resistant soil organic matter. European Journal of Soil Science. 57 (4), 456-467 (2006).
  14. Eusterhues, K., Rumpel, C., Kögel-Knabner, I. Stabilization of soil organic matter isolated via oxidative degradation. Organic Geochemistry. 36 (11), 1567-1575 (2005).
  15. Moni, C., Derrien, D., Hatton, P. -. J., Zeller, B., Kleber, M. Density fractions versus size separates: does physical fractionation isolate functional soil compartments. Biogeosciences. 9 (12), 5181-5197 (2012).
  16. Lavallee, J. M., Soong, J. L., Cotrufo, M. F. Conceptualizing soil organic matter into particulate and mineral-associated forms to address global change in the 21st century. Global Change Biology. 26 (1), 261-273 (2020).
  17. Sollins, P., et al. Organic C and N stabilization in a forest soil: Evidence from sequential density fractionation. Soil Biology and Biochemistry. 38 (11), 3313-3324 (2006).
  18. Sollins, P., et al. Sequential density fractionation across soils of contrasting mineralogy: evidence for both microbial- and mineral-controlled soil organic matter stabilization. Biogeochemistry. 96 (1-3), 209-231 (2009).
  19. Crow, S. E., Swanston, C. W., Lajtha, K., Brooks, J. R., Keirstead, H. Density fractionation of forest soils: methodological questions and interpretation of incubation results and turnover time in an ecosystem context. Biogeochemistry. 85 (1), 69-90 (2007).
  20. Cotrufo, M. F., Ranalli, M. G., Haddix, M. L., Six, J., Lugato, E. Soil carbon storage informed by particulate and mineral-associated organic matter. Nature Geoscience. 12 (12), 989-994 (2019).
  21. Hatton, P. -. J., et al. Transfer of litter-derived N to soil mineral-organic associations: Evidence from decadal 15N tracer experiments. Organic Geochemistry. 42 (12), 1489-1501 (2012).
  22. Lajtha, K., et al. Changes to particulate versus mineral-associated soil carbon after 50 years of litter manipulation in forest and prairie experimental ecosystems. Biogeochemistry. 119 (1-3), 341-360 (2014).
  23. Yeasmin, S., Singh, B., Johnston, C. T., Sparks, D. L. Organic carbon characteristics in density fractions of soils with contrasting mineralogies. Geochimica et Cosmochimica Acta. 218, 215-236 (2017).
  24. Wagai, R., Kajiura, M., Asano, M., Hiradate, S. Nature of soil organo-mineral assemblage examined by sequential density fractionation with and without sonication: Is allophanic soil different. Geoderma. 241-242, 295-305 (2015).
  25. Volk, M., Bassin, S., Lehmann, M. F., Johnson, M. G., Andersen, C. P. 13C isotopic signature and C concentration of soil density fractions illustrate reduced C allocation to subalpine grassland soil under high atmospheric N deposition. Soil Biology and Biochemistry. 125, 178-184 (2018).
  26. Yonekura, Y., et al. Soil organic matter dynamics in density and particle-size fractions following destruction of tropical rainforest and the subsequent establishment of Imperata grassland in Indonesian Borneo using stable carbon isotopes. Plant and Soil. 372 (1-2), 683-699 (2013).
  27. Virto, I., Moni, C., Swanston, C., Chenu, C. Turnover of intra- and extra-aggregate organic matter at the silt-size scale. Geoderma. 156 (1-2), 1-10 (2010).
  28. Poeplau, C., et al. Reproducibility of a soil organic carbon fractionation method to derive RothC carbon pools. European Journal of Soil Science. 64 (6), 735-746 (2013).
  29. Cerli, C., Celi, L., Kalbitz, K., Guggenberger, G., Kaiser, K. Separation of light and heavy organic matter fractions in soil – Testing for proper density cut-off and dispersion level. Geoderma. 170, 403-416 (2012).
  30. Kaiser, K., Guggenberger, G. Distribution of hydrous aluminium and iron over density fractions depends on organic matter load and ultrasonic dispersion. Geoderma. 140 (1-2), 140-146 (2007).
  31. Helbling, E., Pierson, D., Lajtha, K. Sources of soil carbon loss during soil density fractionation: Laboratory loss or seasonally variable soluble pools. Geoderma. 382, 114776 (2021).
  32. Nelson, D. W., Sommers, L. E., Sparks, D. L., Page, A. L., Helmke, P. A., Loeppert, R. H. Total carbon, organic carbon, and organic matter. Methods of Soil Analysis: Part 3 Chemical Methods. , 539-579 (2015).
  33. Pierson, D., et al. Mineral stabilization of soil carbon is suppressed by live roots, outweighing influences from litter quality or quantity. Biogeochemistry. 154 (3), 433-449 (2021).
  34. Kramer, M. G., Lajtha, K., Thomas, G., Sollins, P. Contamination effects on soil density fractions from high N or C content sodium polytungstate. Biogeochemistry. 92 (1-2), 177-181 (2009).
  35. Throop, H. L., Lajtha, K., Kramer, M. Density fractionation and 13C reveal changes in soil carbon following woody encroachment in a desert ecosystem. Biogeochemistry. 112 (1-3), 409-422 (2013).
  36. Amelung, W., Zech, W. Minimisation of organic matter disruption during particle-size fractionation of grassland epipedons. Geoderma. 92 (1-2), 73-85 (1999).
  37. Kaiser, M., Asefaw Berhe, A. How does sonication affect the mineral and organic constituents of soil aggregates?-A review. Journal of Plant Nutrition and Soil Science. 177 (4), 479-495 (2014).

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Cite This Article
Pierson, D., Lajtha, K., Peter-Contesse, H., Mayedo, A. Utilizing Soil Density Fractionation to Separate Distinct Soil Carbon Pools. J. Vis. Exp. (190), e64759, doi:10.3791/64759 (2022).

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