Summary

Utilizzo del frazionamento della densità del suolo per separare i pool di carbonio del suolo distinti

Published: December 16, 2022
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Summary

Il frazionamento della densità del suolo separa la materia organica del suolo in pool distinti con diversi meccanismi di stabilizzazione, sostanze chimiche e tempi di rotazione. Le soluzioni di politungstato di sodio con densità specifiche consentono la separazione del particolato libero e della materia organica associata ai minerali, dando luogo a frazioni di materia organica adatte a descrivere la risposta del suolo alla gestione e ai cambiamenti climatici.

Abstract

La materia organica del suolo (SOM) è una miscela complicata di diversi composti che spaziano da componenti vegetali liberi e parzialmente degradati a composti più microbicamente alterati contenuti negli aggregati del suolo a sottoprodotti microbici altamente trasformati con forti associazioni con minerali del suolo reattivi. Gli scienziati del suolo hanno lottato per trovare modi per separare il suolo in frazioni facilmente misurabili e utili per la modellazione del carbonio (C) del suolo. Il frazionamento del suolo in base alla densità è sempre più utilizzato, è facile da eseguire e produce pool C in base al grado di associazione tra il SOM e diversi minerali; pertanto, il frazionamento della densità del suolo può aiutare a caratterizzare il SOM e identificare i meccanismi di stabilizzazione SOM. Tuttavia, i protocolli di frazionamento della densità del suolo riportati variano in modo significativo, rendendo difficile confrontare i risultati di diversi studi ed ecosistemi. Qui, descriviamo una robusta procedura di frazionamento della densità che separa il particolato e la materia organica associata ai minerali e spieghiamo i vantaggi e gli svantaggi della separazione del suolo in due, tre o più frazioni di densità. Tali frazioni spesso differiscono nella loro composizione chimica e minerale, nel tempo di rotazione e nel grado di elaborazione microbica, nonché nel grado di stabilizzazione minerale.

Introduction

Il suolo è il più grande deposito di carbonio terrestre (C), contenente verso l’alto di 1.500 Pg di C nella parte superiore di 1 m e quasi il doppio di tale quantità a livelli più profondi a livello globale, il che significa che il suolo contiene più C della biomassa vegetale e l’atmosfera combinata1. La materia organica del suolo (SOM) trattiene l’acqua e i nutrienti del suolo ed è essenziale per la produttività delle piante e la funzione dell’ecosistema terrestre. Nonostante il riconoscimento globale dell’importanza di adeguati stock di SOM per la salute del suolo e la produttività agricola, gli stock di carbonio del suolo sono stati sostanzialmente impoveriti a causa della gestione non sostenibile delle foreste e dell’agricoltura, dei cambiamenti del paesaggio e del riscaldamento climatico 2,3. Il crescente interesse per il ripristino della salute del suolo e per l’utilizzo della ritenzione di C del suolo come attore chiave nelle soluzioni climatiche naturali ha portato a sforzi per comprendere i fattori che controllano il sequestro e la stabilizzazione del C del suolo in diversi ambienti 4,5.

La materia organica del suolo (SOM) è una miscela complicata di diversi composti che spaziano da componenti vegetali liberi e parzialmente degradati a composti più microbicamente alterati contenuti negli aggregati del suolo (definiti qui come un materiale formato dalla combinazione di unità o elementi separati) a sottoprodotti microbici altamente trasformati con forti associazioni con minerali del suolo reattivi6 . Nei casi in cui non è pratico identificare l’intera serie di singoli composti nel SOM, i ricercatori spesso si concentrano sull’identificazione di un numero minore di pool funzionali di C che esistono come realtà fisiche e che variano in base ai tassi di turnover, alla composizione chimica generale e al grado di stabilizzazione con i componenti minerali del suolo1, 7. Affinché i pool possano essere interpretati e modellati criticamente, è essenziale che i pool separati siano di numero ridotto, siano direttamente misurabili piuttosto che solo teorici e presentino chiare differenze nella composizione e nella reattività8.

Molte tecniche diverse, sia chimiche che fisiche, sono state impiegate per isolare pool significativi di suolo C, e queste sono ben riassunte da von Lützow et al.9 e Poeplau et al.10. Le tecniche di estrazione chimica mirano a isolare pool specifici, come C associato a Fe e Al11 scarsamente cristallino o cristallino. I solventi organici sono stati usati per estrarre composti specifici come i lipidi12, e l’idrolisi o l’ossidazione della SOM sono state utilizzate come misura di un pool labile di C13,14. Tuttavia, nessuno di questi metodi di estrazione classifica tutti i pool di C in frazioni misurabili o modellabili. Il frazionamento fisico del suolo classifica tutto il suolo C in piscine in base alle dimensioni e presuppone che la decomposizione dei detriti vegetali si traduca in frammentazione e particelle sempre più piccole. Sebbene le dimensioni da sole non possano separare i detriti vegetali liberi dai SOM15 associati ai minerali, quantificare questi due pool è fondamentale per la comprensione della stabilizzazione C del suolo a causa delle comuni differenze spaziali, fisiche e biogeochimiche nella formazione e nel turnover16.

Il frazionamento del suolo C basato sulla densità è sempre più utilizzato, ed è facile da eseguire e identifica diversi pool di C in base al grado di associazione con diversi minerali17,18,19; pertanto, il frazionamento della densità del suolo può aiutare a chiarire i diversi meccanismi di stabilizzazione C del suolo. Il requisito primario per il frazionamento del suolo è la capacità di disperdere completamente le particelle organiche e minerali. Una volta dispersa, la materia organica degradata che è relativamente priva di minerali galleggia in soluzioni più leggere di ~ 1,85 g / cm 3, mentre i minerali rientrano tipicamente nell’intervallo 2-4,5 g / cm 3, sebbene gli ossidi di ferro possano avere densità fino a 5,3 g / cm3. La frazione di particolato leggero o libero tende ad avere un tempo di ricambio più breve (a meno che non vi sia una contaminazione significativa da carbone) e ha dimostrato di essere altamente sensibile alla coltivazione e ad altri disturbi. La frazione pesante (>1,85 g/cm3) o associata ai minerali ha spesso un tempo di turnover più lungo a causa della resistenza alla decomposizione microbicamente mediata ottenuta quando le molecole organiche si legano con superfici minerali reattive. Tuttavia, la frazione pesante può saturarsi (cioè raggiungere un limite superiore per la capacità di complessazione minerale), mentre la frazione leggera può teoricamente accumularsi quasi indefinitamente. Pertanto, comprendere la distribuzione fisica della materia organica in pool di materia organica associata ai minerali rispetto al particolato aiuta a chiarire quali ecosistemi possono essere gestiti per un sequestro efficiente del carbonio e come i diversi sistemi risponderanno ai cambiamenti climatici e ai modelli mutevoli di disturbo antropogenico20.

Mentre l’uso del frazionamento della densità utilizzando soluzioni di politungstato di sodio a diverse densità è aumentato notevolmente nell’ultimo decennio, le tecniche e i protocolli variano in modo significativo, rendendo difficile confrontare i risultati di diversi studi e diversi ecosistemi. Sebbene una densità di 1,85 g/cm 3 abbia dimostrato di recuperare la maggior quantità di frazione luminosa libera con un’inclusione minima di materia organica associata ai minerali (MAOM)17, molti studi hanno utilizzato densità comprese tra 1,65 e 2,0 g/cm3. Mentre la maggior parte degli studi ha frazionato i terreni in due sole piscine (una frazione leggera e una frazione pesante, di seguito LF e HF), altri studi hanno utilizzato densità multiple per raffinare ulteriormente la frazione pesante in piscine che differiscono per i minerali a cui sono associati, il rapporto relativo tra minerali e rivestimento organico o il grado di aggregazione (ad esempio, Sollins et al.17, Sollins et al.18, Hatton et al.21, Lajtha et al.22, Yeasmin et al.23, Wagai et al.24, Volk et al.25). Inoltre, sono state suggerite procedure di frazionamento più complesse che combinano sia la separazione delle dimensioni che della densità, risultando in un numero maggiore di pool (ad esempio, Yonekura et al.26, Virto et al.27, Moni et al.15, Poeplau et al.10) ma anche in un maggiore margine di errore, sia nella metodologia che in relazione alle dimensioni del pool. Inoltre, gli autori hanno anche utilizzato la sonicazione a varie intensità e tempi nel tentativo di disperdere aggregati e MAOM dalle superfici minerali28,29,30.

Qui, descriviamo una robusta procedura di frazionamento della densità che identifica, in primo luogo, due pool unici di carbonio del suolo (LF e HF, o POM e MAOM), e offriamo sia le tecniche che gli argomenti per separare ulteriormente il pool HF in frazioni aggiuntive che differiscono in base alla loro mineralogia, grado di rivestimento organico o aggregazione. Le frazioni qui identificate hanno dimostrato di differire in termini di composizione chimica, tempo di turnover, grado di elaborazione microbica e grado di stabilizzazione minerale18,19.

La seguente procedura separa il terreno sfuso in materia organica particolata (POM) e materia organica associata ai minerali (MAOM) mescolando una quantità nota di terreno in una soluzione con una densità specifica. L’efficacia della procedura è misurata dal recupero combinato della massa del suolo e del carbonio rispetto alla massa iniziale del campione di suolo e al contenuto di C. Una soluzione densa si ottiene sciogliendo il politungstato di sodio (SPT) in acqua deionizzata. Il terreno viene inizialmente miscelato con la densa soluzione di SPT e agitato per mescolare e disperdere accuratamente gli aggregati del suolo. La centrifugazione viene quindi utilizzata per separare i materiali del terreno che galleggiano (frazione leggera) o affondano (frazione pesante) nella soluzione. Le fasi di miscelazione, isolamento, recupero e lavaggio vengono ripetute più volte per garantire la separazione delle frazioni leggere e pesanti, insieme alla rimozione di SPT dal materiale. Infine, le frazioni del terreno vengono essiccate, pesate e analizzate per il contenuto di C. Il materiale frazionato può essere utilizzato per procedure e analisi successive.

Protocol

1. Fabbricazione di soluzioni madre di politungstato di sodio (SPT) ATTENZIONE: SPT è irritante ed è dannoso se ingerito o inalato. È tossico per gli organismi acquatici; evitare il suo rilascio nell’ambiente. Per ottenere 1 L di soluzione di SPT con una densità di 1,85 g/cm3, sciogliere 1.051 g di SPT cristallizzato in circa 600 ml di acqua distillata deionizzata (DDI). Agitare la soluzione fino a completa dissoluzione dell’SPT, circa per 15 minuti, q…

Representative Results

Il frazionamento della densità del suolo è ideale per studiare come i suoli differiscono nel loro contenuto di particolato e materia organica associata ai minerali. La separazione del SOC in questi due pool distinti fornisce una via per chiarire i cambiamenti nel contenuto di C del suolo e le dinamiche di stabilizzazione che altrimenti potrebbero non essere chiari quando si osservano le tendenze del contenuto di C del suolo sfuso. L’ulteriore separazione del materiale pesante (densità >1,85 g/cm3) fornisce …

Discussion

In tutto il protocollo di frazionamento della densità del suolo, ci sono alcune procedure specifiche che devono essere monitorate attentamente per contribuire a ridurre gli errori nella separazione e nell’analisi delle frazioni del suolo. Un passo fondamentale nella procedura di frazionamento della densità del suolo è verificare ripetutamente la densità della soluzione SPT. L’umidità nel campione di terreno spesso diluisce la soluzione SPT, riducendo così la densità dell’SPT. Pertanto, il ricercatore deve sempre a…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Per questo lavoro, il supporto è stato fornito dalla National Science Foundation Grants DEB-1257032 a K.L. e DEB-1440409 al programma di ricerca ecologica a lungo termine di H. J. Andrews.

Materials

Aspirator/vacuum tubing 1/4 x 1/2" Kimble 10847-216
Conical polypropylene centrifuge tube, 250mL Thermo Scientific 376814
Conical rubber gasket for filtering flasks DWK Life Sciences 292020001
Double flat ended stainless steel spatula/scraper Fisher Scientific 14-373-25A
Glass fiber filter, grade GF/F, 110 mm Whatman WHA1825110
Glass mason jar, 16 oz Ball Corporation 500 ml beaker or glass weigh dish are also suitable 
Polypropylene conical bottle adapter, 250mL Beckman Coulter 369385
Porcelain buchner funnel, 90mm FisherBrand FB966F
Reciprocating shaker, 2-speed Eberbach E6000.00
Sidearm flask, 1000mL VWR 89000-386
Sodium Polytungstate, crystalline Sometu SPT-0 or SPT-1, see Discussion for SPT choice Shipping via FedEx from Germany
Swinging bucket centrifuge  Beckman Coulter 3362020

References

  1. Jackson, R. B., et al. The ecology of soil carbon: Pools, vulnerabilities, and biotic and abiotic controls. Annual Review of Ecology, Evolution, and Systematics. 48, 419-445 (2017).
  2. Crowther, T. W., et al. Quantifying global soil carbon losses in response to warming. Nature. 540 (7631), 104-108 (2016).
  3. Deng, L., Zhu, G., Tang, Z., Shangguan, Z. Global patterns of the effects of land-use changes on soil carbon stocks. Global Ecology and Conservation. 5, 127-138 (2016).
  4. Griscom, B. W., et al. Natural climate solutions. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (44), 11645-11650 (2017).
  5. Fargione, J. E., et al. Natural climate solutions for the United States. Science Advances. 4 (11), (2018).
  6. Kögel-Knabner, I., Rumpel, C. Advances in molecular approaches for understanding soil organic matter composition, origin, and turnover: A historical overview. Advances in Agronomy. 149, 1-48 (2018).
  7. Schmidt, M. W. I., et al. Persistence of soil organic matter as an ecosystem property. Nature. 478 (7367), 49-56 (2011).
  8. Billings, S. A., et al. Soil organic carbon is not just for soil scientists: Measurement recommendations for diverse practitioners. Ecological Applications. 31 (3), 02290 (2021).
  9. von Lützow, M., et al. SOM fractionation methods: Relevance to functional pools and to stabilization mechanisms. Soil Biology and Biochemistry. 39 (9), 2183-2207 (2007).
  10. Poeplau, C., et al. Isolating organic carbon fractions with varying turnover rates in temperate agricultural soils – A comprehensive method comparison. Soil Biology and Biochemistry. 125, 10-26 (2018).
  11. Heckman, K., Lawrence, C. R., Harden, J. W. A sequential selective dissolution method to quantify storage and stability of organic carbon associated with Al and Fe hydroxide phases. Geoderma. 312, 24-35 (2018).
  12. Frostegård, &. #. 1. 9. 7. ;., Tunlid, A., Bååth, E. Microbial biomass measured as total lipid phosphate in soils of different organic content. Journal of Microbiological Methods. 14 (3), 151-163 (1991).
  13. Plante, A. F., Conant, R. T., Paul, E. A., Paustian, K., Six, J. Acid hydrolysis of easily dispersed and microaggregate-derived silt- and clay-sized fractions to isolate resistant soil organic matter. European Journal of Soil Science. 57 (4), 456-467 (2006).
  14. Eusterhues, K., Rumpel, C., Kögel-Knabner, I. Stabilization of soil organic matter isolated via oxidative degradation. Organic Geochemistry. 36 (11), 1567-1575 (2005).
  15. Moni, C., Derrien, D., Hatton, P. -. J., Zeller, B., Kleber, M. Density fractions versus size separates: does physical fractionation isolate functional soil compartments. Biogeosciences. 9 (12), 5181-5197 (2012).
  16. Lavallee, J. M., Soong, J. L., Cotrufo, M. F. Conceptualizing soil organic matter into particulate and mineral-associated forms to address global change in the 21st century. Global Change Biology. 26 (1), 261-273 (2020).
  17. Sollins, P., et al. Organic C and N stabilization in a forest soil: Evidence from sequential density fractionation. Soil Biology and Biochemistry. 38 (11), 3313-3324 (2006).
  18. Sollins, P., et al. Sequential density fractionation across soils of contrasting mineralogy: evidence for both microbial- and mineral-controlled soil organic matter stabilization. Biogeochemistry. 96 (1-3), 209-231 (2009).
  19. Crow, S. E., Swanston, C. W., Lajtha, K., Brooks, J. R., Keirstead, H. Density fractionation of forest soils: methodological questions and interpretation of incubation results and turnover time in an ecosystem context. Biogeochemistry. 85 (1), 69-90 (2007).
  20. Cotrufo, M. F., Ranalli, M. G., Haddix, M. L., Six, J., Lugato, E. Soil carbon storage informed by particulate and mineral-associated organic matter. Nature Geoscience. 12 (12), 989-994 (2019).
  21. Hatton, P. -. J., et al. Transfer of litter-derived N to soil mineral-organic associations: Evidence from decadal 15N tracer experiments. Organic Geochemistry. 42 (12), 1489-1501 (2012).
  22. Lajtha, K., et al. Changes to particulate versus mineral-associated soil carbon after 50 years of litter manipulation in forest and prairie experimental ecosystems. Biogeochemistry. 119 (1-3), 341-360 (2014).
  23. Yeasmin, S., Singh, B., Johnston, C. T., Sparks, D. L. Organic carbon characteristics in density fractions of soils with contrasting mineralogies. Geochimica et Cosmochimica Acta. 218, 215-236 (2017).
  24. Wagai, R., Kajiura, M., Asano, M., Hiradate, S. Nature of soil organo-mineral assemblage examined by sequential density fractionation with and without sonication: Is allophanic soil different. Geoderma. 241-242, 295-305 (2015).
  25. Volk, M., Bassin, S., Lehmann, M. F., Johnson, M. G., Andersen, C. P. 13C isotopic signature and C concentration of soil density fractions illustrate reduced C allocation to subalpine grassland soil under high atmospheric N deposition. Soil Biology and Biochemistry. 125, 178-184 (2018).
  26. Yonekura, Y., et al. Soil organic matter dynamics in density and particle-size fractions following destruction of tropical rainforest and the subsequent establishment of Imperata grassland in Indonesian Borneo using stable carbon isotopes. Plant and Soil. 372 (1-2), 683-699 (2013).
  27. Virto, I., Moni, C., Swanston, C., Chenu, C. Turnover of intra- and extra-aggregate organic matter at the silt-size scale. Geoderma. 156 (1-2), 1-10 (2010).
  28. Poeplau, C., et al. Reproducibility of a soil organic carbon fractionation method to derive RothC carbon pools. European Journal of Soil Science. 64 (6), 735-746 (2013).
  29. Cerli, C., Celi, L., Kalbitz, K., Guggenberger, G., Kaiser, K. Separation of light and heavy organic matter fractions in soil – Testing for proper density cut-off and dispersion level. Geoderma. 170, 403-416 (2012).
  30. Kaiser, K., Guggenberger, G. Distribution of hydrous aluminium and iron over density fractions depends on organic matter load and ultrasonic dispersion. Geoderma. 140 (1-2), 140-146 (2007).
  31. Helbling, E., Pierson, D., Lajtha, K. Sources of soil carbon loss during soil density fractionation: Laboratory loss or seasonally variable soluble pools. Geoderma. 382, 114776 (2021).
  32. Nelson, D. W., Sommers, L. E., Sparks, D. L., Page, A. L., Helmke, P. A., Loeppert, R. H. Total carbon, organic carbon, and organic matter. Methods of Soil Analysis: Part 3 Chemical Methods. , 539-579 (2015).
  33. Pierson, D., et al. Mineral stabilization of soil carbon is suppressed by live roots, outweighing influences from litter quality or quantity. Biogeochemistry. 154 (3), 433-449 (2021).
  34. Kramer, M. G., Lajtha, K., Thomas, G., Sollins, P. Contamination effects on soil density fractions from high N or C content sodium polytungstate. Biogeochemistry. 92 (1-2), 177-181 (2009).
  35. Throop, H. L., Lajtha, K., Kramer, M. Density fractionation and 13C reveal changes in soil carbon following woody encroachment in a desert ecosystem. Biogeochemistry. 112 (1-3), 409-422 (2013).
  36. Amelung, W., Zech, W. Minimisation of organic matter disruption during particle-size fractionation of grassland epipedons. Geoderma. 92 (1-2), 73-85 (1999).
  37. Kaiser, M., Asefaw Berhe, A. How does sonication affect the mineral and organic constituents of soil aggregates?-A review. Journal of Plant Nutrition and Soil Science. 177 (4), 479-495 (2014).

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Cite This Article
Pierson, D., Lajtha, K., Peter-Contesse, H., Mayedo, A. Utilizing Soil Density Fractionation to Separate Distinct Soil Carbon Pools. J. Vis. Exp. (190), e64759, doi:10.3791/64759 (2022).

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