Summary

Evaluatie van het effect van pesticiden op de larven van de solitaire bijen

Published: October 15, 2021
doi:

Summary

Het huidige protocol legt een methode uit om met pesticiden verontreinigde voorzieningen te voeren aan de larven van de solitaire bijen, Osmia excavata. De procedure onderzoekt de ecotoxiciteit van het bestrijdingsmiddel voor de larven van de solitaire bijen.

Abstract

Bij de huidige ecologische risicobeoordelingen van pesticiden op bestuivers is in de eerste plaats alleen rekening gehouden met laboratoriumomstandigheden. Voor de larven van solitaire bijen kan inname van met pesticiden verontreinigde voorzieningen het sterftecijfer van de larven verhogen, het verzamelpercentage en de populatie volwassen solitaire bijen in het komende jaar vanuit een demografisch perspectief verminderen. Maar er zijn beperkte studies over de effecten van pesticiden op de larven van solitaire bijen. Daarom moet het begrijpen hoe pesticiden de larven van solitaire bijen beïnvloeden, worden beschouwd als een integraal onderdeel van de ecologische risicobeoordeling van pesticiden. Deze studie presenteert een methode om de larven van solitaire bijen, Osmia excavata, bloot te stellen aan dodelijke of subletale doses pesticide, waarbij larvale gewichtstoename, ontwikkelingsduur, eclosievermogen en voedselconsumptie-efficiëntieconversie van ingenomen voedsel worden gevolgd. Om de effectiviteit van deze methode aan te tonen, werden de larven van O. excavata gevoed met voorzieningen die acute dodelijke en subletale doses chloorpyrifos bevatten. Vervolgens werden de bovenstaande indexen van de behandelde larven onderzocht. Deze techniek helpt om het risico van pesticiden voor bestuivers te voorspellen en te beperken.

Introduction

Bestuivers spelen een cruciale rol in de ecosysteemdiensten van de moderne wereldwijde landbouw. Terwijl honingbijen (Apis mellifera; Hymenoptera: Apidae) worden traditioneel beschouwd als de essentiële economische bestuivers van gewassen, recent onderzoek suggereert dat Osmia (Hymenoptera: Megachilidae) ook erg belangrijk is bij het verbeteren van de bestuiving voor bepaalde gewassen, het vergroten van de vruchtgrootte en het aantal zaden, en het verminderen van het aandeel asymmetrisch fruit in commerciële boomgaarden in verschillende delen van de wereld1. Osmia-opgraving wordt beschouwd als een ideale soort voor appelbestuiving, voornamelijk in Azië, zoals in Noord- en Noordwest-China en Japan 2,3,4. Het kan bestuivingsdiensten voor bepaalde gewassen met vergelijkbare of soms met grotere efficiëntie bieden. In dit opzicht is aangetoond dat ze de honingbijen vervangen of in synergie werken 4,5,6.

De biologische kenmerken van O. excavata zijn uniek in vergelijking met sociale bijen. De univoltine, solitaire en nestactiviteit vindt voornamelijk plaats in het voorjaar en de vroege zomer. De nesten van O. excavata worden meestal gevonden in reeds bestaande gaten, meestal in dood hout, holle planten, strobuizen en bamboestengel in de natuurlijke toestand3. De volwassen O. graaft uit zijn cocon om te paren, stuifmeel te verzamelen en een nest te bouwen om eieren te leggen, die een week later beginnen uit te komen. De bevruchte eieren ontwikkelen zich tot vrouwtjes, terwijl de onbevruchte eitjes zich ontwikkelen tot mannetjes3. Vrouwtjes worden verdeeld in de bodem van de bijenbuis en de bijbehorende voorzieningen zijn belangrijker. Mannetjes daarentegen waren in de buurt van de buisuitgang met kleine voorzieningen7, dus de mannetjes komen als eerste naar buiten en de vrouwtjes komen later naar buiten. Het vrouwtje mengt stuifmeel met een kleine hoeveelheid nectar tot een vochtige klodder, de enige voedselbron voor elke larve in de cel8.

Verschillende studies hebben een afname van de populatie bestuivende insecten gemeld 9,10. Het uitgebreide gebruik van pesticiden is geïdentificeerd als een van de belangrijkste factoren voor het verminderen van de overvloed en diversiteit van bestuivers en kan ook bestuivingsdiensten in gevaar brengen11,12. Om de schadelijke effecten van pesticiden te verminderen en te beperken, is het noodzakelijk een risicobeoordeling van bestrijdingsmiddelen voor bestuivers uit te voeren. Sommige landen hebben regelgevingskaders vastgesteld om de veiligheid van bijen tegen de gebruikte pesticiden te waarborgen13,14. Recente studies hebben aangetoond dat Osmia gevoeliger was voor pesticiden dan honingbijen 1,15.

Interessant is dat de meeste risicobeoordelingen gericht waren op volwassen honingbijen 11,12; er is weinig onderzoek gedaan naar O. excavata, met name de larven. Bovendien wordt de mortaliteit van Osmia direct veroorzaakt door pesticiden meestal beschouwd als16. Toch kunnen de chronische toxiciteiten zoals larvale gewichtstoename, ontwikkelingsduur, voedingspatronen, eclosievermogen, daaropvolgend volwassen gedrag en vruchtbaarheid dezelfde schade hebben als de acute dodelijke toxiciteiten en worden ze vaak genegeerd vanwege een gebrek aan een effectieve experimentele methode voor de solitaire bijen17.

Tot nu toe worden twee methoden gebruikt om de effecten van pesticiden op de larven van solitaire bijen te evalueren: (1) een geschikte hoeveelheid pesticide werd toegepast op de gelokaliseerde plek van voorzieningen zonder het ei van solitaire bijente verwijderen 1,18,19,20; (2) vervanging van voorzieningen door kunstmatige mengsels van stuifmeel en nectar die een specifieke hoeveelheid bestrijdingsmiddel21 bevatten. Er zijn echter enkele beperkingen aan de bovenstaande twee methoden. De eerste kan alleen acute toxiciteit meten, maar geen chronische toxiciteit omdat de larven de volledige dosis in korte tijd hebben ingenomen; dit laatste zou leiden tot een hoog sterftecijfer vanwege menselijke manipulatie1. Hier werd de onderdompelingsmethode beschreven om de ecotoxiciteit van pesticiden naar O. exvata te bestuderen onder zeer gecontroleerde onderzoeksomstandigheden door het gedrag van larven die zich voeden met resterende pesticiden in de voorzieningen in de echte omgeving te simuleren. De methode van deze studie lost de nadelen van de bovenstaande twee methoden op en is geschikt voor het meten van de effecten van een gevaarlijke stof op acute en chronische toxiciteit.

Protocol

1. Bereiding van de voedingssonde Pons een gat (diameter ~ 0,3 mm) in het deksel van een centrifugebuis van 2 ml met behulp van een elektrisch wikkelijzer (zie Tabel met materialen). Gebruik zo’n centrifugebuis om een O. exvata-larve en zijn voorzieningsmassa te behouden. 2. Bereiding van pesticiden Los het bestrijdingsmiddel van technische kwaliteit (zie materiaaltabel) op in aceton om stamo…

Representative Results

De gehalten aan veelgebruikte bestrijdingsmiddelen, chloorpyrifos, imidacloprid, fendifenuron, phoxim, avermectine in voorzieningen waren lager dan de bepaalbaarheidsgrens (0,01-0,02 mg kg-1) in de controlegroep; deze resultaten sloten de invloed van residuen van bestrijdingsmiddelen op elke behandeling uit. De sterfte met en zonder het verwijderen van larven uit de proviand na 48 uur in controlegroepen werd geëvalueerd; de resultaten toonden geen significante verschillen (tabel 1), wat wijst…

Discussion

Voor volwassen bestuivers zijn er twee hoofdmethoden voor het meten van de ecotoxiciteit van pesticiden. Een daarvan is de contactmethode, waarbij het bestrijdingsmiddel wordt toegepast op de prothorax van de volwassen insecten; de andere is de maagtoxiciteitsmethode, waarbij de volwassen bestuivers worden gevoed met honingwater dat pesticide25,26 bevat. In de afgelopen jaren is gebleken dat het bestuivingseffect en de eclosiesnelheid van O. excavata rel…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Deze studie werd ondersteund door het National Key R & D-programma van China (2017YFD0200400), Major Scientific and Technological Innovation Project (2017CXGC0214), Bee Industry Innovation Team van de provincie Shandong, Agricultural Science and Technology Innovation Project van Shandong Academy of Agricultural Sciences (CXGC2019G01) en Agricultural Science and Technology Innovation Project van Shandong Academy of Agricultural Sciences (CXGC2021B13).

Materials

Abamectin Jinan Lvba Pesticide Co. Ltd
Black-light lamps Kanghua Medical Device Co., Ltd
Centrifugal tube box with 100 Wells Shanghai Rebus Network Technology Co., Ltd
Centrifuge tube Shanghai Rebus Network Technology Co., Ltd 2 mL;  Serve as bee tube
Electric soldering iron Kunshan Kaipai Hardware Electromechanical Co., Ltd
Electronic scale Sartorius Scientific Instruments (Beijing) Co., Ltd 3137510295
Graduated cylinder Anhui Weiss Experimental Equipment Co. Ltd
Petri dishes (60 mm diameter) Qingdao jindian biochemical equipment co., LTD
Pollen provision Yantai Bifeng Agricultural Science and Technology Co. Ltd
Soft brush Wengang Wenhai painting material factory
Solitary bees Yantai Bifeng Agricultural Science and Technology Co. Ltd

References

  1. Sgolastra, F., Tosi, S., Medrzycki, P., Porrini, C., Burgio, G. Toxicity of spirotetramat on solitary bee larvae, Osmia cornuta (hymenoptera: megachilidae), in laboratory conditions. Journal of Apicultural Science. 59 (2), 73-83 (2015).
  2. Wei, S. G., Wang, R., Smirle, M. J., Xu, H. L. Release of Osmia excavata and Osmia jacoti (Hymenoptera: Megachilidae) for apple pollination. TheCanadian Entomologist. 134 (3), 369-380 (2002).
  3. Men, X. Y., et al. Biological characteristics and pollination service of Mason bee. Chinese Journal of Applied Entomology. 55 (6), 973-983 (2018).
  4. Bosch, J., Kemp, W. P., Trostle, G. E. Bee population returns and cherry yields in an orchard pollinated with Osmia lignaria (Hymenoptera: Megachilidae). Journal of Economic Entomology. 99 (2), 408-413 (2006).
  5. Winfree, R., Williams, N. M., Dushoff, J., Kremen, C. Native bees provide insurance against ongoing honey bee losses. Ecology Letters. 10 (11), 1105-1113 (2007).
  6. Garibaldi, L. A., Steffan-Dewenter, I., Winfree, R. Wild pollinators enhance fruit set of crops regardless of honey bee abundance. Science. 339 (6127), 1608-1611 (2013).
  7. Bosch, J., Sgolastra, F., Kemp, W. P., James, R. R., Pitts-Singer, T. L. Life cycle ecophysiology of Osmia. mason bees used as crop pollinators. Bee Pollination in Agricultural Ecosystems. , 83-104 (2008).
  8. Liu, L., et al. Population investigation and restriction factors analyses of Osmia excavata Alfken in Jiaodong. Apiculture of China. 69 (9), 68-71 (2018).
  9. Biesmeijer, J. C., Roberts, S. P. M., Reemer, M. Parallel declines in pollinators and insect-pollinated plants in Britain and the Netherlands. Science. 313 (5785), 351-354 (2006).
  10. Potts, S. G., Biesmeijer, J. C., Kremen, C. Global pollinator declines: trends, impacts and drivers. Trends in Ecology & Evolution. 25 (6), 345-353 (2010).
  11. Chen, L., Yan, Q., Zhang, J., Yuan, S., Liu, X. Joint toxicity of acetamiprid and co-applied pesticide adjuvants on honeybees under semi-field and laboratory conditions. Environmental Toxicology and Chemistry. 38 (9), 1940-1946 (2019).
  12. Sgolastra, F., Medrzycki, P., Bortolotti, L., Renzi, M. T., Bosch, J. Synergistic mortality between a neonicotinoid insecticide and an ergosterol-biosynthesis-inhibiting fungicide in three bee species. Pest Management Science. 73 (6), 1236-1243 (2017).
  13. Bireley, R., et al. Preface: Workshop on pesticide exposure assessment paradigm for non-Apis bees. Environmental Entomology. 48 (1), 1-3 (2019).
  14. European Food Safety Authority. EFSA Guidance Document on the risk assessment of plant protection products on bees (Apis mellifera, Bombus spp. and solitary bees). EFSA Journal. 11 (7), 3295 (2013).
  15. Rundlof, M., et al. Seed coating with a neonicotinoid insecticide negatively affects wild bees. Nature. 521 (7550), 77-80 (2015).
  16. Yuan, R., et al. Toxicity and hazard assessment of six neonicotinoid insecticides on Osmia excavata (hymenoptera:megachilidae). Acta Entomologica Sinica. 61 (8), 950-956 (2018).
  17. Lin, Z., Meng, F., Zheng, H., Zhou, T., Hu, F. Effects of neonicotinoid insecticides on honeybee health. Acta Entomologica Sinica. 57 (5), 607-615 (2014).
  18. Gradish, A. E., Scott-Dupree, C. D., Cutler, G. C. Susceptibility of Megachile rotundata to insecticides used in wild blueberry production in Atlantic Canada. Journal of Pest Science. 85, 133-140 (2012).
  19. Hodgson, E. W., Pitts-Singer, T. L., Barbour, J. D. Effects of the insect growth regulator, novaluron on immature alfalfa leafcutting bees, Megachile rotundata. Journal of Insect Science. 11, 43 (2011).
  20. Konrad, R., Ferry, N., Gatehouse, A. M. R., Babendreier, D. Potential effects of oilseed rape expressing oryzacystatin-1 (OC-1) and of purified insecticidal proteins on larvae of the solitary bee Osmia bicornis. PLoS ONE. 3 (7), 2664 (2008).
  21. Abbott, V. A., Nadeau, J. L., Higo, H. A., Winston, M. L. Lethal and sublethal effects of imidacloprid on Osmia lignaria and clothianidin on Megachile rotundata (Hymenoptera: megachilidae). Journal of Economic Entomology. 101, 784-796 (2008).
  22. Yan, Z., Wang, Z. Sublethal effect of abamectin on 3rd instar larvae of Prodenia litura. Chinese Journal of Tropical Crops. 32 (10), 1945-1950 (2011).
  23. Song, Y., et al. Comparative ecotoxicity of insecticides with different modes of action to Osmia excavata (Hymenoptera: Megachilidae). Ecotoxicology and Environmental Safety. 212 (5), 112015 (2021).
  24. Chen, F. J., Wu, G., Ge, F., Parajulee, M. N., Shrestha, R. B. Effects of elevated CO2 and transgenic Bt cotton on plant chemistry, performance, and feeding of an insect herbivore, the cotton bollworm. Entomologia Experimentalis Et Applicata. 115 (2), 341-350 (2005).
  25. Cang, T., et al. Toxicity and safety evaluation of pesticides commonly used in strawberry production to bees. Zhejiang Agricultural Sciences. (4), 785-787 (2009).
  26. Cang, T., et al. Acute toxicity and safety assessment of chiral fipronil against Apis mellifera and Trichogramma ostriniae. Ecotoxicology. 7 (3), 326-330 (2012).
  27. Liu, X., Pan, W. Measures to ensure pollination effect and cocoon recovery rate of Osmia excavata in apple orchard. Northwest Horticulture. (3), 20-21 (2017).
  28. Meikle, W. G., Adamczyk, J. J., Weiss, M., Ross, J., Beren, E. Sublethal concentrations of clothianidin affect honey bee colony growth and hive CO2 concentration. Scientific Reports. 11 (1), 4364 (2021).
  29. Meikle, W. G., Adamczyk, J. J., Weiss, M., Ross, J., Beren, E. Sublethal concentrations of clothianidin affect honey bee colony behavior and interact with landscapes to affect colony growth. BioRxiv. , (2020).
  30. Wang, Y. F., et al. Combination effects of three neonicotinoid pesticides on physiology and survival of honey bees (Apis mellifera L). Journal of Environmental Entomology. 41 (3), 612-618 (2019).
  31. Kopit, A. M., Pitts-Singer, T. L. Routes of pesticide exposure in solitary, cavity-nesting bees. Environmental Entomology. 47 (3), 499-510 (2018).
  32. Cheng, Y., et al. Chronic oral toxicity of chlorpyrifos and imidacloprid to adult honey bees (Apis mellifera L). Asian Journal of Ecotoxicology. 11 (2), 715-719 (2016).
  33. Li, M., Ma, C., Xiao, L., Li, Z., Su, S. Effects of chlorpyrifos on behavior response of Apis mellifera and Apis cerana. Apicultural Science Association of China. , (2016).
  34. Cresswell, J. E. A meta-analysis of experiments testing the effects of a neonicotinoid insecticide (imidacloprid) on honey bees. Ecotoxicology. 20 (1), 149-157 (2011).
  35. Nauen, R., Ebbinghaus-Kintscher, U., Schmuck, R. Toxicity and nicotinic acetylcholine receptor interaction of imidacloprid and its metabolites in Apis mellifera (Hymenoptera; Apidae). Pest Management Science. 57 (7), 577-586 (2001).
  36. Colin, M. E., et al. A method to quantify and analyze the foraging activity of honey bees: relevance to the sublethal effects induced by systemic insecticides. Archives of Environmental Contamination and Toxicology. 47 (3), 387-395 (2004).
  37. Decourtye, A., et al. Comparative sublethal toxicity of nine pesticides on olfactory learning performances of the honeybee Apis mellifera. Archives of Environmental Contamination & Toxicology. 48 (2), 242-250 (2005).
  38. Williamson, S. M., Wright, G. A. Exposure to multiple cholinergic pesticides impairs olfactory learning and memory in honeybees. Journal of Experimental Biology. 216 (10), 1799-1807 (2013).
  39. Henry, M., et al. A common pesticide decreases foraging success and survival in honey bees. Science. 336 (6079), 348-350 (2012).
  40. Matsumoto, T. Reduction in homing flights in the honey bee Apis mellifera after a sublethal dose of neonicotinoid insecticides. Bulletin of Insectology. 66 (1), 1-9 (2013).

Play Video

Cite This Article
Song, Y., Li, R., Li, L., Ouyang, F., Men, X. Evaluating the Effect of Pesticides on the Larvae of the Solitary Bees. J. Vis. Exp. (176), e62946, doi:10.3791/62946 (2021).

View Video