La alteración del neurotransmisor es un mecanismo de disfunción neuronal que se produce después de la conmoción cerebral y contribuye a las consecuencias a largo plazo a veces catastróficas. Este modelo de rata combina microdiálisis, permitiendo la cuantificación del neurotransmisor in vivo, con una técnica de caída de peso que ejerce una rápida aceleración y desaceleración de la cabeza y el torso, un factor importante del trauma craneocerebral humano.
Los síntomas cognitivos y motores persistentes son consecuencias conocidas de las conmociones cerebrales/lesiones cerebrales traumáticas leves (MFI) que pueden ser en parte atribuibles a la neurotransmisión alterada. De hecho, los estudios de microdiálisis cerebral en roedores han demostrado una liberación excesiva de glutamato extracelular en el hipocampo dentro de los primeros 10 minutos después de un trauma. La microdiálisis ofrece la clara ventaja del muestreo continuo del neurotransmisor in vivo sin tener que sacrificar al animal. Además de la técnica antes mencionada, se necesita un modelo de lesión en la cabeza cerrada que ejerce una rápida aceleración y desaceleración de la cabeza y el torso, ya que tal factor no está disponible en muchos otros modelos animales. El modelo de caída de peso de Wayne State imita este componente esencial del trauma craneocerebral humano, permitiendo la inducción de un impacto en la cabeza de un roedor sin restricciones con un peso que cae. Nuestro modelo de rata novedoso y traslacional combina la microdiálisis cerebral con el modelo de caída de peso de Wayne State para estudiar, en ratas adultas ligeramente anestesiadas y sin restricciones, los cambios agudos en los niveles de neurotransmisores extracelulares después de la conmoción cerebral. En este protocolo, la sonda de microdiálisis se insertó dentro del hipocampo como región de interés, y se dejó insertada en el cerebro al impactar. Hay una alta densidad de terminales y receptores en el hipocampo, por lo que es una región relevante para documentar la neurotransmisión alterada después de la conmoción cerebral. Cuando se aplica a ratas Adults Sprague-Dawley, nuestro modelo combinado indujo aumentos en las concentraciones de glutamato extracelular del hipocampo dentro de los primeros 10 minutos, de acuerdo con la sintomatología post-conmoción cerebral previamente reportada. Este modelo combinado de caída de peso proporciona una herramienta fiable para que los investigadores estudien las respuestas terapéuticas tempranas a las conmociones cerebrales además de una lesión cerebral repetitiva, ya que este protocolo induce un trauma tenal de cabeza cerrada.
El propósito de este método es proporcionar a los investigadores una herramienta confiable que reproduzca fielmente la biomecánica del trauma craneocerebral humano al tiempo que permite la caracterización longitudinal de los efectos moleculares de las conmociones cerebrales/cerebro traumático leve lesiones (mTB). Este método combina la microdiálisis cerebral con el modelo de caída de peso del estado de Wayne para documentar, en ratas adultas ligeramente anestesiadas y sin restricciones, los cambios agudos en los niveles de neurotransmisores extracelulares después de la conmoción cerebral. Con este método mínimamente invasivo, neurotransmisores como glutamato, GABA, taurina, glicina y serina pueden ser cuantificados rápida y continuamente después de trauma, in vivo, mientras que no tener que sacrificar el animal.
La conmoción cerebral/mTBI es una interrupción fisiopatológica que afecta el funcionamiento cerebral causado por un mecanismo de fuerza externa. La conmoción cerebral/mTBI es la forma más común de lesión cerebral traumática, ya que representa el 70-90% de los casos1. La mayoría de las alteraciones funcionales agudas después de una conmoción cerebral pueden atribuirse a una lesión cerebral primaria y secundaria2,3: (1) la lesión cerebral primaria es inducida por la rápida aceleración y desaceleración de la cabeza y el torso que daña los tejidos cerebrales por compresión seguida del estiramiento y cizallamiento de los axons durante la contragolpe4,5,6 y (2) la lesión cerebral secundaria es la respuesta celular indirecta al trauma. Tiene lugar horas y días después de la lesión cerebral primaria y juega un papel importante en el deterioro motor y cognitivo observado con el tiempo. Muchos de los síntomas pueden atribuirse a una neurotransmisión alterada, como la liberación excesiva de glutamato extracelular previamente demostrada en los primeros 10 minutos después de una lesión7,8,9. Dada su alta densidad de terminales y receptores, el hipocampo es una estructura cerebral particularmente vulnerable a esta respuesta excitotóxica después de una lesión. Estar muy involucrado en la función cognitiva10,11, estudios en roedores informaron que el daño del hipocampo asociado con la conmoción cerebral puede conducir a deficiencias en el acondicionamiento del miedo y el aprendizaje de la memoria espacial12 , 13. El objetivo principal de esta metodología era elaborar un modelo de rata de conmoción cerebral/mTBI, utilizando el procedimiento de caída de peso de cabeza cerrada de Wayne State para reproducir fielmente los mecanismos de la lesión cerebral primaria, e incorporar microdiálisis para estudiar in vivo, el neurotransmisor extracelular agudo cambia debido a la lesión cerebral secundaria después de una conmoción cerebral. Concentraciones de glutamato extracelular y GABA se midieron en el hipocampo para actuar como resultados representativos de nuestro método.
Estudios anteriores de roedores han combinado microdiálisis y otros modelos de lesión, como la caída de peso de cráneo abierto y el impacto cortical controlado, para demostrar los cambios agudos en los niveles de neurotransmisores extracelulares después de una lesión de diversa gravedad grados14,15,16,17. Sin embargo, además de los altos grados de variabilidad, el valor traslacional de modelos como la caída del peso de cráneo abierto y el impacto cortical controlado se ve obstaculizado por una falta inherente de validez ecológica debido a 2 factores: (1) estos modelos inducen lesiones más graves que las conmociones cerebrales relacionadas con el deporte sufridas en humanos, que implican la carga directa del cerebro y (2) estos modelos requieren una craneectomía o una craneotomía, la cabeza del roedor está completamente sujetada en un marco estereotaxico, impidiendo el rápido aceleración y desaceleración de la cabeza y el torso, reproduciendo así mal la biomecánica de la conmoción cerebral.
La microdiálisis es un método mínimamente invasivo que ofrece la clara ventaja de tomar muestras de neurotransmisores como glutamato, GABA, taurina, glicina y serina, in vivo y continuamente después de trauma, sin tener que sacrificar al animal. Además de las ventajas que ofrece la microdiálisis, la Universidad Estatal de Wayne desarrolló un modelo de caída de peso de cráneo cerrado (a diferencia de la calavera abierta de otros modelos), que permite la inducción de un mTBI en un roedor ligeramente anestesiado y sin restricciones, permitiendo así la rápida aceleración y desaceleración de la cabeza y el torso18. Como se mencionó anteriormente, la aceleración y desaceleración de la cabeza y el torso es una característica biomecánica central de las conmociones cerebrales relacionadas con el deporte vistas en humanos que los modelos anteriores de mTBI de roedores no han podido abordar. El procedimiento de caída de peso se puede hacer muy rápidamente y no requiere ninguna cirugía previa o incisión del cuero cabelludo. Después de la inducción de la conmoción cerebral, los roedores recuperan el reflejo de enderecimiento casi espontáneamente y no experimentan parálisis, convulsiones o dificultad respiratoria después de un solo impacto. Las hemorragias intracraneales y las fracturas craneales son poco frecuentes, y sólo se han notificado déficits menores en la coordinación motora en roedores. Este modelo de rata es fácil de usar, económico y facilita la cuantificación de los neurotransmisores liberados en la fase aguda después de una conmoción cerebral sin quitar la sonda de microdiálisis durante el impacto.
Nuestro modelo de rata que combina microdiálisis y conmoción cerebral es adecuado para investigadores que buscan caracterizar longitudinalmente los efectos moleculares de la conmoción cerebral y podría ser utilizado en una amplia variedad de estudios terapéuticos. De hecho, a pesar de varios años de investigación y una necesidad abrumadora, ningún fármaco para prevenir los efectos a largo plazo de las conmociones cerebrales ha pasado la fase de ensayo clínico19. Una de las posibles razones de estos fracasos podría ser el uso de modelos animales que no reproducen fielmente las fuerzas biomecánicas traumáticas de las conmociones cerebrales experimentadas por los seres humanos. El método presentado aquí cumple con la definición de conmociones cerebrales humanas que especifica que la lesión cerebral primaria es inducida por un impacto contundente, así como una rápida aceleración y desaceleración de la cabeza y el torso2,3.
Además, nuestro modelo combinado es apropiado para los investigadores que estudian los efectos de la lesión cerebral traumática leve repetida (rmTBI) ya que una de sus características clave que lo diferencia de otros modelos animales de conmoción cerebral es que permite inducir lesiones leves repetidas en el mismo caso18. En los seres humanos, rmTBI se asocia con síntomas postraumáticos más graves, tiempos de recuperación más largos, y deterioros motores y cognitivos agravados que tienden a propagarse en el tiempo20,21. Otros modelos animales relevantes también han hecho posible comprender mejor la fisiopatología postraumática de rmTBI22,23,24,25,26,27 . Aumento de la vulnerabilidad cerebral se ha demostrado en roedores después de un mínimo de 5 mTBI a intervalos de 24 h. La neuroinflamación aumenta con el número de mTBI experimentados y los marcadores de neurodegeneración aparecen28. El mTBI repetido evitaría la transición de la microglia de un modo proinflamatorio a un modo normal de recuperación, resultando en una actividad excitotóxica prolongada y la activación de mecanismos neurodegenerativos 29. Con nuestro modelo, las ratas podrían estar expuestas a 1 impacto por día durante el período de 1 semana para un total de 5 exposiciones. Dada la simplicidad de este modelo animal, podría facilitar la caracterización de los efectos acumulativos de la liberación aguda de neurotransmisores indiscriminados que surgen inmediatamente después de un mTBI.
Este modelo también permite a los animales estar fácilmente expuestos a 2 impactos por día, lo que permite estudiar condiciones aún más severas, como cuando un atleta recibe otro impacto traumático en poco tiempo desde el primer golpe30. Como se demostró en un estudio anterior31,el momento de un segundo golpe en la cabeza puede afectar dramáticamente el daño vascular y axonal. Cuanto más cerca esté el segundo golpe del primer golpe, más perjudiciales son las consecuencias. Este modelo es apropiado para investigar cómo esta condición particular afecta la liberación de neurotransmisores extracelulares.
En este método, el hipocampo fue utilizado como región de interés debido a su relevancia en la investigación de conmoción cerebral, pero muestras de microdiálisis pueden ser recogidas de otras regiones de interés también. Sin embargo, cualquier otra región cerebral tiene que ser considerada debido al espacio dejado por el sitio de impacto de la cánula guía, incluyendo el cemento dental que la rodea, puede ocupar una cantidad considerable de espacio en la cabeza de la rata. Además de esto, los parámetros de microdiálisis presentados en este método tales como el corte del peso molecular de la membrana y la longitud activa, los intervalos de tiempo de muestreo y el caudal se pueden ajustar de acuerdo con el tipo de molécula estudiada. La recolección eficiente de citoquinas proinflamatorias implicadas en conmociones cerebrales, por ejemplo, requeriría una membrana con un tamaño de poro mucho más grande.
Pasos críticos en el protocolo
Para la generación de resultados confiables, los pasos críticos en este protocolo requieren una atención particular. Durante la cirugía de implantación de cánulas, evite el uso de más cemento del necesario, especialmente cuando sea muy líquido para evitar derrames sobre el lugar del impacto. Para evitar bloquear el lugar de implantación, utilice un obturador que tenga la misma longitud que la cánula. Durante el procedimiento de microdiálisis, inserte la sonda lentamente en la cánula y asegúrese de que se inserta completamente para el muestreo de dializado. Antes de la inducción de la conmoción cerebral, asegúrese de que la hoja de aluminio esté correctamente ranurada con una cuchilla de afeitar afilada. De lo contrario, el impacto del peso de latón no será suficiente para rasgar la hoja de aluminio y la rata permanecerá en el pecho hacia abajo en lugar de someterse a una rotación de 180o y aterrizar en su espalda. Si este es el caso, las lesiones inducidas resultarán del impacto contundente, no muy diferente de lo que se ve en los modelos de caída de peso de cráneo abierto y serán significativamente más graves. Durante la inducción de la conmoción cerebral, evite impactar la cánula con el peso, ya que esto generaría daño crítico al cráneo de la rata. Es muy recomendable trabajar en equipos de 2 para restringir los errores de manipulación durante el experimento.
Modificaciones y solución de problemas
Durante el procedimiento de microdiálisis, el flujo debe ser constante y producir un volumen adecuado a la velocidad de perfusión, una vez que la sonda está conectada a la bomba. Los volúmenes más bajos pueden indicar la presencia de obstrucción en la membrana de la sonda o burbujas de aire en las líneas. En caso de obstrucción, la sonda debe desecharse y reemplazarse. Sin embargo, las burbujas de aire se pueden expulsar circulando ACSF en las líneas. Si no se observan obstrucciones o burbujas de aire y todavía no hay flujo, se puede cortar una pequeña parte del tubo de salida más cercano al extremo.
Limitaciones del método
Otros estudios que utilizan la caída de peso de la Universidad Estatal de Wayne han evaluado algunos cambios estructurales y moleculares fundamentales18. Sin embargo, una investigación más amplia mantendría la legitimidad de este procedimiento. La información sobre los cambios biológicos y neuroanatómicos que tienen lugar a nivel epigenético y celular consolidaría aún más el valor fiable y traslacional de nuestro método. Además, la evaluación de la función cognitiva es una medida fiable del resultado relacionado con el mTBI en los modelos de roedores33. Si bien el tiempo correcto se midió en este protocolo y se retrasó significativamente en los casos lesionados en comparación con los casos falsos, los estudios en el futuro deberían concentrarse en medir metódicamente la función cognitiva después de la inducción del trauma en roedores.
Importancia del método con respecto a los métodos existentes/alternativos.
La importancia principal del método es doble: En primer lugar, permite la inducción exitosa de una conmoción cerebral con el procedimiento de la Universidad Estatal de Wayne, que permite una rápida aceleración y desaceleración de la cabeza y el torso. Con este método, se evitaron los resultados de lesiones graves como detenciones cardiorrespiratorias, fractura de cráneo, alta mortalidad y signos de contusiones cerebrales visibles en el lugar del impacto. En segundo lugar, esta técnica de microdiálisis replicó con éxito la liberación de glutamato extracelular aguda y de corta duración que tuvo lugar dentro de los primeros 10 minutos después de la inducción del trauma14,16. Además, mantener la sonda insertada durante todo el procedimiento reduce significativamente la probabilidad de inducir daño a la barrera hematoencefálica sensible a mTBI vinculada a la inserción repetida de la sonda de microdiálisis34.
Aplicaciones futuras o direcciones del método.
Dados los aspectos fáciles de usar del procedimiento de caída de peso de la Universidad Estatal de Wayne y los cambios agudos del nivel de neurotransmisores extracelulares medidos por microdiálisis, nuestro modelo de rata que combina microdiálisis y conmoción cerebral proporciona a los investigadores una herramienta para reproducir fielmente la biomecánica del trauma craneocerebral humano y caracterizalongitudinalmente los efectos moleculares de las conmociones cerebrales. Nuestro modelo de rata también podría ser utilizado en una amplia variedad de estudios terapéuticos, ya que ofrece una valiosa oportunidad para estudiar el mecanismo y la eficacia de los agentes farmacológicos in vivo, de forma continua y sin tener que sacrificar al animal. Además, la disponibilidad de un modelo de rata como el que se presenta aquí podría facilitar en gran medida la mejor comprensión de la relación entre los desequilibrios de neurotransmisores y las consecuencias conductuales de las conmociones cerebrales.
The authors have nothing to disclose.
Agradecemos a Louis Chiocchio por el cuidado y mantenimiento de los animales, Morgane Regniez por la ayuda con el procedimiento de perfusión intracardiaca, y David Castonguay por la ayuda con el criostato. Este trabajo fue apoyado por la Cátedra de Traumatología Aguda de la Universidad de Montreal otorgada al LDB.
Animal Preparation | |||
Sprague Dawley Rats | Charles River Laboratories | SAS SD 40 | |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Microdialysis Guide Cannula Implantation Surgery | |||
Ketamine Hydrochloride (100 mg/ml) | Bioniche | 1989529 | |
Xylazine Hydrochloride (100 mg/ml) | Bimeda | 8XYL004C | |
Solution of Chlorhexidine Gluconate 2% and Isopropyl Alcohol 2% | Carefusion | 260100C | |
Lidocaine Hydrochloride | Alveda Pharma | 0122AG01 | |
Bupivacaine Hydrochloride | Hospira | 1559 | |
Ophthalmic Ointment | Baussh and Lomb inc. | 2125706 | |
Stereotaxic Frame | Stoelting | 51600 | |
Stereotaxic Cannula Holder Arm | Harvard Apparatus | 72-4837 | |
Drill | Dremel | 8050-N/18 | |
Suture Thread Coated Vicryl Rapide 4-0 | Ethicon | VR2297 | |
Dental Acrylic Cement | Harvard Apparatus | 72-6906 | |
Screws | JI Morris Company | P0090CE125 | |
Isoflurane | Baxter | CA2L9100 | |
Cannula Gauge 20 10.55mm | HRS Scientific | C311G/SPC | |
Dummy-Cannula 10.55mm | HRS Scientific | C311DC/1/SPC | |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Microdialysis Procedure | |||
CMA 402 Syringe Pump | Harvard Apparatus Canada | CMA-8003110 | |
Microsyringe 2.5ml Glass | Harvard Apparatus Canada | CMA-8309021 | |
Syringe Clip Medium For 1-2.5ml | Harvard Apparatus Canada | CMA-3408310 | |
Low-Torque Dual Channel Quartz-Lined Swivel | Instech Laboratories Inc. | 375/D/22QM | |
GSC Cast Iron Support Ring Stand | Fisher Scientifique | S13748 | |
Fisherbrand Castaloy Adjustable-Angle Clamps | Fisher Scientifique | 05769Q | |
NaHCO3 Sodium Bicarbonate | Sigma-Aldrich Canada | S5761-500G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
MgCl2 Magnesium Chloride | Sigma-Aldrich Canada | M8266-100G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
NaCl Sodium Chloride | Sigma-Aldrich Canada | S7653-1KG | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
L-Ascorbic Acid | Sigma-Aldrich Canada | A5960-25G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
KCl Potassium Chloride | Sigma-Aldrich Canada | P9333-500G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
NaH2PO4 Sodium Phosphate Monobasic | Sigma-Aldrich Canada | S0751-1KG | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
CaCl2 Calcium Chloride | Sigma-Aldrich Canada | 383147-100G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
Lighter | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
Epoxy Glue | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
Super Glue Gel | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
Heat Shrink Tube 0.063" Inner Diameter Gardner Bender | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
Cut-Off Wheels Dremel #409 | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
BD Needle 26 Gauge 0.5 Inch PrecisionGlide Sterile 305111 | Fisher Scientifique | 14-826-15 | For Laboratory Constructed Probes |
BD Needle 21 Gauge 1.5 Inch PrecisionGlide Sterile 305167 | Fisher Scientifique | 14-826-5B | For Laboratory Constructed Probes |
26G Stainless Steel Tubing One Foot | HRS Scientific | SST-26/FT | For Laboratory Constructed Probes |
Polyethylene Tubing PE/20 .024" OD X .015" ID | HRS Scientific | C315CT | For Laboratory Constructed Probes |
Polyethylene Tubing PE/10 .024" OD X .011" ID | HRS Scientific | C314CT | For Laboratory Constructed Probes |
Polyethylene Tubing PE/50 .038" OD X .023" ID | HRS Scientific | C313CT | For Laboratory Constructed Probes |
30S WIRE ST.ST 0.008X 1’ Long | HRS Scientific | 008BSH/30S | For Laboratory Constructed Probes |
Polymicro Technologies Flexible Fused Silica Capillary Tubing Inner Diameter 50µm, Outer Diameter 150µm | Molex LLC Polymicro Technologies | 106815-0015 | For Laboratory Constructed Probes |
Spectra Por 132294 Micro-Dialysis Hollow Fiber Membranes 13 kD MWCO | Spectrum Labs | FSSP9778671 | For Laboratory Constructed Probes |
Stainless Steel Collar | Sirnay In.c | 304 | For Laboratory Constructed Probes / Custome made |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Concussion Apparatus | |||
Brass Weight | Rapido Métal Inc. | Attach metal loop to base | |
Metal Loop | Rona Inc. | Available at most hardware stores | |
PVC Guide Tube | Rona Inc. | Available at most hardware stores | |
Alluminum Foil | Alcan | Available at most grocery stores | |
Tape | Available commercially | ||
GSC Cast Iron Support Ring Stand | Fisher Scientifique | S13748 | |
U-Shaped Plexiglas Frame | Présentoirs PlexiPlus Inc. | Custom made | |
Foam Cushion | Mousse D&R Foam Inc. | Custom made | |
Razor Blades | VWR International | 55411-055 | |
Super Strong Trilene XT 20 lb. Berkley | Canadian Tire | Available at most hardware stores | |
Isoflurane | Baxter | CA2L9100 | |
Stop Watch | Available at most sporting goods retailer |
Animal Preparation | |||
Sprague Dawley Rats | Charles River Laboratories | SAS SD 40 | |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Microdialysis Guide Cannula Implantation Surgery | |||
Ketamine Hydrochloride (100 mg/ml) | Bioniche | 1989529 | |
Xylazine Hydrochloride (100 mg/ml) | Bimeda | 8XYL004C | |
Solution of Chlorhexidine Gluconate 2% and Isopropyl Alcohol 2% | Carefusion | 260100C | |
Lidocaine Hydrochloride | Alveda Pharma | 0122AG01 | |
Bupivacaine Hydrochloride | Hospira | 1559 | |
Ophthalmic Ointment | Baussh and Lomb inc. | 2125706 | |
Stereotaxic Frame | Stoelting | 51600 | |
Stereotaxic Cannula Holder Arm | Harvard Apparatus | 72-4837 | |
Drill | Dremel | 8050-N/18 | |
Suture Thread Coated Vicryl Rapide 4-0 | Ethicon | VR2297 | |
Dental Acrylic Cement | Harvard Apparatus | 72-6906 | |
Screws | JI Morris Company | P0090CE125 | |
Isoflurane | Baxter | CA2L9100 | |
Cannula Gauge 20 10.55mm | HRS Scientific | C311G/SPC | |
Dummy-Cannula 10.55mm | HRS Scientific | C311DC/1/SPC | |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Microdialysis Procedure | |||
CMA 402 Syringe Pump | Harvard Apparatus Canada | CMA-8003110 | |
Microsyringe 2.5ml Glass | Harvard Apparatus Canada | CMA-8309021 | |
Syringe Clip Medium For 1-2.5ml | Harvard Apparatus Canada | CMA-3408310 | |
Low-Torque Dual Channel Quartz-Lined Swivel | Instech Laboratories Inc. | 375/D/22QM | |
GSC Cast Iron Support Ring Stand | Fisher Scientifique | S13748 | |
Fisherbrand Castaloy Adjustable-Angle Clamps | Fisher Scientifique | 05769Q | |
NaHCO3 Sodium Bicarbonate | Sigma-Aldrich Canada | S5761-500G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
MgCl2 Magnesium Chloride | Sigma-Aldrich Canada | M8266-100G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
NaCl Sodium Chloride | Sigma-Aldrich Canada | S7653-1KG | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
L-Ascorbic Acid | Sigma-Aldrich Canada | A5960-25G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
KCl Potassium Chloride | Sigma-Aldrich Canada | P9333-500G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
NaH2PO4 Sodium Phosphate Monobasic | Sigma-Aldrich Canada | S0751-1KG | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
CaCl2 Calcium Chloride | Sigma-Aldrich Canada | 383147-100G | For Artificial Cerebrospinal Fluid (aCSF) |
Lighter | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
Epoxy Glue | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
Super Glue Gel | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
Heat Shrink Tube 0.063" Inner Diameter Gardner Bender | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
Cut-Off Wheels Dremel #409 | Canadian Tire | For Laboratory Constructed Probes / Available at most hardware stores | |
BD Needle 26 Gauge 0.5 Inch PrecisionGlide Sterile 305111 | Fisher Scientifique | 14-826-15 | For Laboratory Constructed Probes |
BD Needle 21 Gauge 1.5 Inch PrecisionGlide Sterile 305167 | Fisher Scientifique | 14-826-5B | For Laboratory Constructed Probes |
26G Stainless Steel Tubing One Foot | HRS Scientific | SST-26/FT | For Laboratory Constructed Probes |
Polyethylene Tubing PE/20 .024" OD X .015" ID | HRS Scientific | C315CT | For Laboratory Constructed Probes |
Polyethylene Tubing PE/10 .024" OD X .011" ID | HRS Scientific | C314CT | For Laboratory Constructed Probes |
Polyethylene Tubing PE/50 .038" OD X .023" ID | HRS Scientific | C313CT | For Laboratory Constructed Probes |
30S WIRE ST.ST 0.008X 1’ Long | HRS Scientific | 008BSH/30S | For Laboratory Constructed Probes |
Polymicro Technologies Flexible Fused Silica Capillary Tubing Inner Diameter 50µm, Outer Diameter 150µm | Molex LLC Polymicro Technologies | 106815-0015 | For Laboratory Constructed Probes |
Spectra Por 132294 Micro-Dialysis Hollow Fiber Membranes 13 kD MWCO | Spectrum Labs | FSSP9778671 | For Laboratory Constructed Probes |
Stainless Steel Collar | Sirnay In.c | 304 | For Laboratory Constructed Probes / Custome made |
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Concussion Apparatus | |||
Brass Weight | Rapido Métal Inc. | Attach metal loop to base | |
Metal Loop | Rona Inc. | Available at most hardware stores | |
PVC Guide Tube | Rona Inc. | Available at most hardware stores | |
Alluminum Foil | Alcan | Available at most grocery stores | |
Tape | Available commercially | ||
GSC Cast Iron Support Ring Stand | Fisher Scientifique | S13748 | |
U-Shaped Plexiglas Frame | Présentoirs PlexiPlus Inc. | Custom made | |
Foam Cushion | Mousse D&R Foam Inc. | Custom made | |
Razor Blades | VWR International | 55411-055 | |
Super Strong Trilene XT 20 lb. Berkley | Canadian Tire | Available at most hardware stores | |
Isoflurane | Baxter | CA2L9100 | |
Stop Watch | Available at most sporting goods retailer |