Isolatie en adoptief overdracht van hoge zout behandeld antigeen-presenteren dendritische cellen

Overtollige dieet zout is een belangrijke risicofactor voor hoge bloeddruk. ^{1 , 2} the American Heart Association adviseert een maximum van 2.300 milligram (mg), natrium (Na⁺) inname per dag, echter; minder dan 10% van de Amerikaanse bevolking merkt deze aanbeveling. ^{3 , 4} bescheiden verlaging van de⁺ Na inname de bloeddruk verlagen en de jaarlijkse nieuwe gevallen van hart-en vaatziekten en beroerte in de VS met 20% verminderen. ⁵ een groot probleem met overmatige consumptie van zout is dat 50% van de bevolking van hypertensieve zout-gevoeligheid vertoont, gedefinieerd als een stijging van de bloeddruk Na⁺ laden of een gelijkaardige daling van de bloeddruk na na Na^{met 10 mmHg +} beperking en diurese. ⁶ zout-gevoeligheid ook optreedt in 25% van de normotensive personen, en is een onafhankelijke voorspeller van dood en cardiovasculaire gebeurtenissen. ^{7 , 8} zout-sensing mechanismen in hypertensie waarbij de nieren zijn goed bestudeerd; recente studies suggereren echter dat de immuuncellen nb⁺kunnen voelen. ^{9 , 10}

Recent bewijs suggereert dat veranderingen in extra renale nb⁺ behandeling kunnen leiden ophoping van nb⁺ in het interstitium tot en bevordering van ontsteking. ^{11 , 12} ons laboratorium en anderen hebben aangetoond dat de cellen van het aangeboren en adaptieve immuunsysteem aan de verergering van hypertensie bijdragen. ^{9 , 13 , 14 , 15} verschillende hypertensieve stimuli, met inbegrip van angiotensine II, noradrenaline en zout oorzaak macrofagen, monocyten en T-lymfocyten infiltreren de nier- en therapieën te bevorderen nb⁺ retentie, vasoconstrictie, bloeddruk hoogte en einde-orgel schade. ^{9 , 16 , 17 , 18 , 19 , 20} in voorafgaande studies, vonden we dat DCs isolevuglandin (IsoLG accumuleren)-eiwit adducten in reactie op verschillende stimuli van hypertensieve met inbegrip van angiotensine II en DOCA-zout hypertensie. ¹⁴ IsoLGs zijn zeer reactieve producten van lipide peroxidatie die snel en covalent te lysines op eiwitten adduct en hun accumulatie wordt geassocieerd met DC activering. ¹⁴ we hebben onlangs vastgesteld dat verhoogde nb⁺ een krachtige stimulans voor IsoLG-eiwit is adduct vorming in RattenUitrustingen DCs.⁹ nb⁺ inwerkingtreding DCs is bemiddeld door amiloride gevoelige vervoerders. NB⁺ wordt vervolgens omgewisseld voor calcium (Ca^{2 +}) via de nb⁺/CA^{2 +} warmtewisselaar. CA^{2 +} wordt geactiveerd proteïne kinase, C (PKC) die activeert de NADPH oxidase leidt tot verhoogde superoxide (O₂^{· –}) en IsoLG-eiwit adduct vorming. ⁹ adoptief overdracht van zout-blootgesteld DCs priemgetallen hypertensie in reactie op een sub pressor dosis van angiotensine II. ⁹

Identificatie van CD11c⁺ DCs uit weefsels is eerder beperkt immunohistochemistry en RT-PCR, en isolatie van DCs is beperkt tot de cel Sorteren op stroom cytometry. Hoewel stroom cytometry cel Sorteren een krachtige methode voor de isolatie van immune cellen is, het is duur, tijdrovend, en leidt tot een lage rendement van levensvatbare cellen. Daarom hebben we een stap voor stap-protocol voor het weefsel spijsvertering, in vitro stimulatie en adoptief overdracht van CD11c geoptimaliseerd⁺ DCs te bestuderen van hypertensie.