Opfok<em> Ixodes scapularis,</em> De Black-legged Tick: Het voeden van onvolwassen stadia op muizen
Summary
Het produceren van gezonde laboratoriumopgevoerde tegels is essentieel voor het bestuderen van bosluisbiologie en kruis-pathogeen-interacties. Hier tonen wij een simpel protocol voor onvolgroeide tikvoeding die kosteneffectief en minder stressvol is voor muizen.
Abstract
Ixodes scapularis, de vector van de ziekte van Lyme, is een van de meest belangrijke ziekte vectoren in het oosten en het Middenwesten. Deze soort is een drie gastheer teek die een bloedmaaltijd van een gewervelde gastheer voor elke ontwikkelingsfase vereist, en de volwassen vrouwtjes vereisen een bloedmaaltijd voor de voortplanting. Larvale teken hechten aan hun gastheer voor 3-5 dagen voor de voeding en afzetten van de gastheer wanneer deze volledig volgezogen. Deze afhankelijkheid van verschillende hosts en de lange bevestiging tijd voor stuwing compliceert tick opvoeding in het laboratorium setting. Echter, om teek biologie te begrijpen en tick-pathogeen interacties, de productie van gezonde, laboratorium gekweekte teken is van essentieel belang. Hier tonen we een eenvoudige, kosteneffectieve protocol voor onrijpe teek voeden op muizen. We pasten de bestaande protocollen voor verminderde spanning op muizen en verhoogde teek voeden en het voortbestaan met wegwerp kooien zonder gaas bodems contact van teken wi voorkomenHet water besmet met muizen urine en ontlasting.
Introduction
Teken zijn obligate hematophagous ectoparasieten van gewervelde dieren en worden wereldwijd gedistribueerd. In de Verenigde Staten, minstens 11 soorten teken zijn vectoren van ziekteverwekkers van belang voor de volksgezondheid 1. Ixodes scapularis is verantwoordelijk voor de overdracht van verschillende pathogenen zoals de oorzakelijke agentia van de ziekte van Lyme (Borrelia burgdorferi) relapsing fever (B. miyamotoi), humaan granulocytic anaplasmose (Anaplasma phagocytophilum) en babesiose (Babesia spp.). Ondanks het belang van I. scapularis als een ziekte vector, het verzamelen van deze spinachtigen in overvloed in het wild voor studies in het lab is niet altijd haalbaar. Daarom is de productie van gezonde laboratorium gekweekte teken is van essentieel belang om studies op de pof biologie en vink-pathogeen interacties.
De levenscyclus van alle harde teken (familie Ixodidae), met inbegrip van I. scapularis, bestaat uit het ei en drie activE stadia: larven, nimf en volwassenen. Elke actieve fase voedt op een gewervelde gastheer. De complexe interacties die plaatsvinden tussen ticks en hun gastheren gedurende meerdere dagen van aanhechting en voeding, zijn bijna onmogelijk om te repliceren met behulp van kunstmatige voedingsmiddelen, en het zal onwaarschijnlijk genoeg getallen geven voor massaopvang 2 , 3 , 4 . Daarom worden levende muizen en konijnen meestal gebruikt als gastheren voor het volwassenen (larven en nimfen), en volwassen volwassenen van ticks, respectievelijk. Het vereiste van meerdere gastheren voor bloedvoeding tijdens elke ontwikkelingsfase compliceert tikopvang, en is tijd- en kostenintensief 5 , 6 , 7 . De meeste tikopvangprotocollen vereisen het behoud van muizen in een ophanglaag 7 , 8 of in een cilindrische cage zodanige afmetingen dat de dieren niet vrij kunnen bewegen en zich verzorgen 6, 9, 10.
Deze cilindrische kooien later overgebracht naar een schoenendoos kooi met een draadrooster. Gezwollen, vrijstaande teken worden daarna verzameld uit het water eronder. Deze werkwijze resulteert in blootstellen gevoede teken om verontreinigd met urine en feces die schimmelgroei kan verhogen en teken sterfte 9. Bovendien vergroot de mogelijkheid van teken ontsnappen uit de waterbak, maar waardoor stress muizen. Om deze problemen te omzeilen, we hier laten zien larven teek voeden met muizen binnen plastic schoenendoos wegwerpluier kooien. Deze werkwijze maakt het normale gedrag van muizen, toe volgezogen teek herstel en vermindert tick sterfte door vervuiling.
Protocol
Representative Results
Discussion
Kritieke stappen binnen het protocol
Het is belangrijk om meerdere niveaus van veiligheidsmaatregelen te hebben bij het opslaan van bosjes om ongevallen te voorkomen. Gebruik van kleefband en een watergracht zijn cruciaal om de veiligheid te waarborgen. Het is belangrijk om de verdoofde muis op een verwarmingsblok vast te houden om de lichaamstemperatuur constant te houden. We hebben ook geconstateerd dat het scheren van de muis geen extra voordelen biedt voor het bijvullen van een vinkje. Een …
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
The authors acknowledge the help from the staff of Laboratory Animal Medicine, University of Nevada, Reno. MM received funding from Nevada INBRE.
Materials
| Puralube vet ointment | Amazon | Available from any Pet store or online store | |
| Disposable mouse cage | Innovive, San Diego, CA | MV 2 | Set of bottom and lid |
| White Alpha dri bedding | Lab Supply, Fort Worth, TX | ALPHA-Dri™ |
References
- Gleim, E. R., et al. Factors associated with tick bites and pathogen prevalence in ticks parasitizing humans in Georgia, USA. Parasites & Vectors. 9 (125), 1-13 (2016).
- Krober, T., Guerin, P. M. In vitro feeding assays for hard ticks. Trends Parasitol. 23 (9), 445-449 (2007).
- Kuhnert, F. Feeding of Hard Ticks In Vitro: New Perspectives for Rearing and for the Identification of Systemic Acaricides. ALTEX. 13 (2), 76-87 (1996).
- Voigt, W. P., et al. In vitro feeding of instars of the ixodid tick Amblyomma variegaturn on skin membranes and its application to the transmission of Theileria mutans and Cowdria ruminantium. Parasitol. 107, 257-263 (1993).
- Gregson, J. D., Smith, C. N. Ticks. Insect Colonization and Mass Production. , 49-72 (1966).
- Sonenshine, D. E. . Biology of Ticks. 2, (1993).
- Bouchard, K. R., Wikel, S. K., Marquaedt, W. C. Care, maintenance, and experimental infestation of ticks in the laboratory setting. Biology of Disease Vectors. , 705-711 (2005).
- Schumaker, T. S., Barros, D. M. Life cycle of Ornithodoros (Alectorobius) talaje. (Acari:Argasidae) in laboratory. J Med Entomol. 32, 249-254 (1995).
- Banks, C. W., Oliver, J. H., Hopla, C. E., Dotson, E. M. Laboratory life cycle of Ixodes woodi (Acari:Ixodidae). J. Med. Entomol. 35, 177-179 (1998).
- James, A. M., Oliver, J. H. Feeding and host preference of immature Ixodes dammini,I.scapularis,and I.pacificus.(Acari:Ixodidae). J. Med. Entomol. 27, 324-330 (1990).
