Visualizzare il Tissue interrenale Steroidogenic e la sua Vascolare Microenvironment in Zebrafish

La ghiandola surrenale, una componente fondamentale dell'asse ipotalamo-ipofisi-surrene, secerne gli steroidi e coordina l'omeostasi di steroidi e la risposta del corpo allo stress. La ghiandola surrenale comprende la corteccia esterna, che secerne steroidi in maniera specifica per la zona, e midollo interni, che sintetizza catecolamine. La ghiandola interrenale in teleostei è la controparte della ghiandola surrenale nei mammiferi ed è composto da cellule interrenale e cromaffini steroidogenici, che sono equivalenti funzionali della corteccia surrenale e midollare, rispettivamente, ^1-3. Studi condotti utilizzando il modello zebrafish hanno riferito che entrambe le linee cellulari steroidogenici e cromaffini sono formate da meccanismi molecolari e cellulari altamente simili a quelle dei mammiferi ^1,2. Pertanto, il pesce zebra è un modello potenzialmente potente per lo studio di malattie genetiche, controllo neuroendocrino, e la biologia dei sistemi dell'asse ipotalamo-ipofisi-surrene (interrenale).

<p class = "jove_content"> Nella ghiandola surrenale, 3β-Hsd catalizza la conversione del progesterone dal pregnenolone, 17α-idrossiprogesterone da 17α-hydroxypregnelolone, e androstenedione da deidroepiandrosterone ^4,5. 3β-HSD è essenziale per biosynthesizing tutte le classi di steroidi ormonali, vale a dire il progesterone, glucocorticoidi, mineralcorticoidi, androgeni ed estrogeni,. I due umana 3β-Hsd isoenzimi HSD3B1 e HSD3B2 sono espressi in modo differenziale ^6. HSD3B1 è espressa nella placenta e nei tessuti periferici, mentre HSD3B2 si esprime nella corteccia surrenale e gonadi. HSD3B1 umana e HSD3B2 sono co-ortologhi di hsd3b1 zebrafish, che si esprime al tessuto interrenale e gonadi adulti; hsd3b2 zebrafish è un gene maternamente espresso le cui trascrizioni scomparire prima organogenesi ^7. Il protocollo di tutto il montaggio 3β-Hsd saggio di attività enzimatica per zebrafish è stato sviluppato modificando il metodo di Levy, uns descritto da Milano et al. , Su sezioni congelate di otto specie di teleostei ^8. A causa della permeabilità dei tessuti e la trasparenza ottica del pesce zebra in via di sviluppo, tutto il montaggio 3β-Hsd istochimica può essere utilizzato con successo per l'embrione zebrafish fisso e larve e specificamente delineare i tessuti interrenale differenziati.

Questo test sensibile e rapida è stata applicata a vari mutanti e morphants dimostrano diversi tipi di dysmorphogenesis interrenale. L'attività interrenale 3β-HSD è assente nell'embrione se le specifiche del tessuto interrenale è interrotta attraverso una specifica atterramento del fattore di trascrizione Ff1b ed è diminuito come la differenziazione interrenale è influenzata da un atterramento del coregulator Ff1b Prox1 ^9,10. In particolare, l'attività 3β-Hsd può essere rilevato in mutanti con gravi difetti nelle fasi iniziali, come ad esempio un occhio capocchia di spillo e strabismo, dove il 3β-Hsd istochimica delinea come la migrazione delle cellule interrenale è influenzata ^11. La differenziazione del tessuto interrenale non è compromessa anche in completa assenza di sangue e vascolare. Pertanto, come forma di segnali endotelio-derivati in via di sviluppo dell'organo interrenale può essere determinato ^12,13. Nel complesso, questo saggio istochimico è stato utilizzato con successo per lo studio specificazione, differenziazione e migrazione delle cellule steroidogeniche nel modello zebrafish. Pertanto, dovrebbe essere un efficiente e uno strumento affidabile per eventuali schermi genetici o chimici di targeting disturbi degli organi surrenali e interrenale.