Visualiser le tissu interrénal stéroïdogénique et son vasculaire Microenvironnement dans Zebrafish

La glande surrénale, un élément crucial de l'axe hypothalamo-hypophyso-surrénalien, sécrète stéroïdes et coordonne l'homéostasie des stéroïdes et la réponse du corps au stress. La glande surrénale comprend le cortex externe, qui sécrète des stéroïdes d'une manière spécifique de la zone, et la médulla interne, qui synthétise catécholamines. La glande interrénal en téléostéens est la contrepartie de la glande surrénale chez les mammifères et est composé de cellules interrénales et chromaffines stéroïdogenèse, qui sont des équivalents fonctionnels du cortex surrénalien et de la moelle, respectivement ^1-3. Des études réalisées en utilisant le modèle de poisson zèbre ont rapporté que les deux lignées de cellules chromaffines stéroïdogenèse et sont formées par des mécanismes moléculaires et cellulaires très semblables à ceux des mammifères ^1,2. Par conséquent, le poisson zèbre est un modèle potentiellement puissant pour l'étude des troubles génétiques, le contrôle neuroendocrine, et la biologie des systèmes de l'axe hypothalamo-hypophyso-surrénalien (interrénal).

<p class = "jove_content"> Dans la glande surrénale, 3β-HSD catalyse la conversion de la progestérone à partir de prégnénolone, 17α-hydroxyprogestérone , de la 17α-hydroxypregnelolone et de l' androstènedione déhydroépiandrostérone ^4,5. 3β-HSD est essentiel pour la biosynthèse toutes les classes de stéroïdes hormonaux, à savoir la progestérone, les glucocorticoïdes, les minéralocorticoïdes, les androgènes et oestrogènes. Les deux 3β-HSD humaine isoenzymes HSD3B1 et HSD3B2 sont exprimés de manière différentielle ^6. HSD3B1 est exprimée dans le placenta et les tissus périphériques, tandis que HSD3B2 est exprimée dans le cortex surrénal et les gonades. HSD3B1 humaine et HSD3B2 sont co-orthologues de HSD3B1 zebrafish, qui est exprimé au niveau du tissu interrénal et les gonades adultes; hsd3b2 zebrafish est un gène maternellement exprimé dont les transcriptions disparaître avant organogenèse ^7. Le protocole de l'ensemble de montage 3β-HSD dosage d'activité enzymatique pour le poisson zèbre est développé en modifiant la méthode de Levy,s décrite par Milano et al. , Sur des coupes congelées de huit espèces de téléostéens ^8. En raison de la perméabilité du tissu et de la transparence optique du poisson zèbre développement, l'ensemble du montage 3β-HSD histochimie peut être utilisé avec succès pour l'embryon de poisson zèbre fixe et les larves, et plus particulièrement à délimiter les tissus différenciés interrénales.

Ce dosage rapide et sensible a été appliquée à divers mutants et morphants montrent différents types de dysmorphogenèse interrénal. L'activité 3β-HSD interrénal est absent dans l'embryon , où la spécification du tissu interrénal est perturbé par un effet de choc spécifique du facteur de transcription Ff1b et diminue à mesure que la différenciation interrénal est affectée par un effet de choc de la co – régulateur Ff1b Prox1 ^9,10. Notamment, l'activité 3β-HSD peuvent être détectés chez des mutants présentant des défauts graves à un stade précoce, comme borgnes tête d' épingle et strabisme, où le 3β-Hsd histochimie définit la façon dont la migration cellulaire interrénal est affectée ^11. La différenciation du tissu interrénal ne soit pas compromise, même en l'absence complète de sang et le système vasculaire. Par conséquent, comment les signaux de endothéliale façonnent l'organe interrénal développement peut être déterminé ^12,13. Dans l'ensemble, cette analyse histochimique a été utilisé avec succès pour l'étude de la spécification, la différenciation et la migration des cellules stéroïdogènes dans le modèle de poisson zèbre. Par conséquent, il devrait être un moyen efficace et un outil fiable pour tous les écrans génétiques ou chimiques ciblant les troubles des organes surrénales et interrénales.