In this article we explain how to set up a concurrent transcranial alternating current stimulation and EEG experiment.
Oscillatory brain activities are considered to reflect the basis of rhythmic changes in transmission efficacy across brain networks and are assumed to integrate cognitive neural processes. Transcranial alternating current stimulation (tACS) holds the promise to elucidate the causal link between specific frequencies of oscillatory brain activity and cognitive processes. Simultaneous electroencephalography (EEG) recording during tACS would offer an opportunity to directly explore immediate neurophysiological effects of tACS. However, it is not trivial to measure EEG signals during tACS, as tACS creates a huge artifact in EEG data. Here we explain how to set up concurrent tACS-EEG experiments. Two necessary considerations for successful EEG recording while applying tACS are highlighted. First, bridging of the tACS and EEG electrodes via leaking EEG gel immediately saturates the EEG amplifier. To avoid bridging via gel, the viscosity of the EEG gel is the most important parameter. The EEG gel must be viscous to avoid bridging, but at the same time sufficiently fluid to create contact between the tACS electrode and the scalp. Second, due to the large amplitude of the tACS artifact, it is important to consider using an EEG system with a high resolution analog-to-digital (A/D) converter. In particular, the magnitude of the tACS artifact can exceed 100 mV at the vicinity of a stimulation electrode when 1 mA tACS is applied. The resolution of the A/D converter is of importance to measure good quality EEG data from the vicinity of the stimulation site. By following these guidelines for the procedures and technical considerations, successful concurrent EEG recording during tACS will be realized.
Dinâmicas rítmicas de correntes elétricas extracelular no cérebro foram observados durante um século 1,2. Enquanto que para a maior parte desse tempo sendo considerado como o ruído não específico nos dados, hoje eles estão amplamente considerado como desempenhar um papel principal na transformação de informação no cérebro 3,4,5,6,7,8,9. Nossa compreensão do nexo de causalidade entre as freqüências específicas da atividade do cérebro oscilatório e processos cognitivos avançou na última década através do desenvolvimento de diversas estratégias de intervenção para modular diretamente a atividade oscilatório 8,10. Transcranial estimulação alternando atual (TAC) é uma tal abordagem promissora para modular a atividade rítmica no cérebro 10. TAC é um método de estimulação cerebral não invasiva, que se aplica fraca alternada (senoidais) correntes do couro cabeludo e modula a excitabilidade do córtex cerebral de uma forma específica de frequências de 11, 12, </ sup> 13, 14, 15. Apesar de ser uma técnica promissora para o estudo do papel da atividade rítmica no cérebro, os mecanismos neurofisiológicos dos TAC ainda são tímidas. Vários estudos têm relatado efeitos de TAC sobre perceptual 11,13,16,17,18 e funções motoras 19,20,21,22, bem como os efeitos sobre os processos cognitivos de ordem superior 23,24,25,26,27, 28 . Evidência neurofisiológica para arrastamento de oscilações cerebrais após a estimulação foram apresentados usando EEG 13, 14, 15. Atualmente poucos relatos de evidência neurofisiológica em seres humanos para efeitos de TAC durante a estimulação 12, 13, 22. Como o cérebro é altamente robusta para perturbação externa, tais provas on-line é crucial para compreender os efeitos neurofisiológicos imediatas dos TAC.
Electroencephalography (EEG), capturando atividade eletrofisiológica no cérebro com alta resolução temporal, é uma escolha ideal para o estudo endógeno e atividades neurais oscilatórios arrastadas. Estudos recentes realizados por Helfrich e colegas relataram efeitos neurofisiológicos on-line dos TAC, mas ao mesmo tempo medir EEG durante a TAC tem sido difícil devido à proeminente TAC artefato 12, 13. Para as experiências de TAC-EEG simultâneas bem sucedidos, a gravação de dados de EEG boa qualidade é um aspecto importante, que é o foco do artigo actual, e ao mesmo tempo, o método de pré-processamento para remover o artefacto TAC também é crucial. Em nosso laboratório, temos vindo a desenvolver o nosso próprio gasoduto de pré-processamento que permite a remoção do artefato TAC de dados de EEG 29. Aqui vamos descrever como gravar com sucesso sinais de EEG a partir da área de estimulação, e considerações técnicas importantes para a gravação bem sucedida.
Experimentos Os procedimentos para configurar simultâneos TAC-EEG são descritos aqui. Passamos agora a discutir considerações para a configuração das gravações TAC-EEG, das quais as duas primeiras considerações são vitais para gravações simultâneas TAC-EEG sucesso.
Evitando eletrodo TAC-EEG colmatar através de gel
É crucial para evitar a ponte entre EEG e TAC eletrodos através de vazamento de gel EEG, como ponte imediatamente satura o respectivo canal de um amplificador de EEG. Por esta razão, a viscosidade do gel EEG é um parâmetro crucial para o sucesso da gravação TAC-EEG. Nunca use um gel fluido EEG, como um fluido riscos de gel de EEG escapar para fora do eléctrodo TAC e ponte com eletrodos de EEG adjacentes. Ao mesmo tempo, um gel de EEG muito viscosa tem uma desvantagem em penetrar no cabelo e lubrificar a pele para reduzir a impedância. Para os eletrodos de EEG nas proximidades do eletrodo TAC, um gel mais viscoso pode bE utilizada, como se pode usar uma vara de madeira para reduzir a impedância. Para os TAC e eletrodos de EEG restantes, use um pouco menos viscoso (embora ainda não líquidos) gel de EEG. Este tipo de gel requer menos esforço para impedâncias mais baixas. Como é difícil para raspar sob o eletrodo TAC, é melhor usar um gel ligeiramente menos viscoso aqui.
Lidar com TAC magnitudes artefato
A segunda questão é para lidar com a grande magnitude do artefacto TAC, variando de 10 mV na EEG eléctrodos distante da área de estimulação, para mais do que 100 mV no local da estimulação durante a presente intensidade de estimulação de 0,9 mA (Figura 6) . Figura 7 ilustra a relação linear entre as intensidades de estimulação (0,5 a 2,0 mA pico-a-pico) e a magnitude do artefacto resultante no sítio de estimulação (canal F3). A primeira medida é manter uma baixa impedância de ambos os EEG e TAC eletrodos. Insuficientecontato entre o eletrodo TAC e do couro cabeludo cria maiores amplitudes do artefato TAC nos dados de EEG e, além disso aplicada corrente eletrônica tenderia a ser não homogênea. Em segundo lugar, é preciso considerar o nível de resolução do conversor A / D do sistema de EEG. Um conversor de 24 bits A / D pode, teoricamente, cobrir um intervalo de 1,68 V, com uma resolução de 0,1 mV / bit. Em contraste, um conversor A / D de 16 bits com uma resolução de 0,1 mV / bit vai cobrir uma gama de tensão de 6,5 mV – demasiado baixo para cobrir a gama do artefacto TAC (Figura 6). Assim a resolução de gravação de tensão tem de ser reduzido. A fim de cobrir as magnitudes artefato de até 100 mV no local da estimulação com um sistema de 16 bits, a resolução de gravação de tensão seria teoricamente precisa de ser reduzido para cima 1,53 mV / bit. Em estudos recentes facto simultâneas TAC-EEG com um sistema de 16 bits não pode gravar os sinais do EEG da vizinhança do local de estimulação devido à saturação da ampl ifier mesmo quando a resolução foi reduzida para 0,5 mV / mordeu 12,13.
Considerações para reduzir a impedância do eletrodo
A razão para a primeira começar a trabalhar sobre as impedâncias dos eletrodos de EEG localizados no meio ou imediações do eletrodo TAC, é que esses eletrodos de EEG exigir algum trabalho paciente e cuidadosa, para evitar ligações. Ao começar com esses eletrodos, não há tempo para esperar até que o gel aplicada teve algum tempo para lubrificar o couro cabeludo, antes de considerar aplicar mais gel EEG, se necessário. Gel adicional deve ser aplicado sob o eletrodo TAC, uma vez que tenha sido colocado no couro cabeludo, nomeadamente se o participante tem um monte de cabelo. A razão não é apenas para reduzir a impedância – boa impedância pode ser alcançado sem este passo – mas para obter uma ligação uniforme em todo o couro cabeludo com a superfície do eléctrodo de TAC.
Considerações de design e montagem
ntent "> A figura 1 ilustra a montagem dos eletrodos TAC. O design em forma de rosquinha dos TAC couro cabeludo eletrodo / eletrodos eo eletrodo TAC ombro rectangular são retratados. A forma do eletrodo TAC couro cabeludo permite um eletrodo de EEG para ser colocado em no meio da área estimulada. Uma vantagem da concepção em forma de anel é que ele permite a gravação do sinal a partir da área estimulada. Em segundo lugar, também faz com que seja fácil manter a posição do eléctrodo TAC inalterado. Dependendo do local da estimulação, alguma outra forma do eletrodo TAC seria mais adequado. A forma eletrodo TAC retangulares é mais adequado durante a gravação de um site entre eletrodos de EEG.Deve ser advertidos de que a forma ea posição do eletrodo TAC não é o mesmo que a área efectivamente a ser estimulada, mas poderia ser um pouco deslocado 31. Ao decidir a posição dos eléctrodos de TAC, modelação da corrente Fbaixo para estimar a melhor posição dos eletrodos para a segmentação da região de interesse é sempre altamente recomendável.
A configuração atual é adequado para a modulação da atividade rítmica em redes de larga escala. Mais estimulação focal pode ser conseguido de várias maneiras 13, 32, 33, 34. Em primeiro lugar, reduzir o tamanho do eléctrodo TAC. Nitsche e colegas demonstraram que um eléctrodo de 3,5 cm 2 pode modular a excitabilidade do córtex motor com ETCC 32. Uma segunda abordagem é a de explorar uma configuração de alta definição 13,33,34, onde um eléctrodo de estimulação é rodeado por quatro eléctrodos de referência. Outra vantagem da configuração de alta definição é que a densidade de eléctrodos de EEG pode ser aumentada, uma vez que os eléctrodos de borracha convencionais limitar o espaço para os eléctrodos de EEG e sessenta e quatro eléctrodos de EEG não é viável para implementar na configuração corrente. Enquanto these modificações para maior especificidade espacial requerem diferentes procedimentos de configuração, as considerações técnicas descritas aqui ainda se aplicam.
Neste protocolo, colocar os eletrodos TAC de acordo com o sistema internacional 10-20 para EEG eletrodo de posicionamento 30. Whileindividual optimização de uma localização estimulação seria a alternativa, pode constituir um problema para comparação, quando variar a localização estimulação entre indivíduos na experiência, como o local de estimulação varia em relação aos locais de registo do EEG. O uso combinado recentemente demonstrado de magnetoencefalografia (MEG) e TAC, por Neuling e colegas 35, pode superar este problema e problemas relacionados com o artefato TAC, como métodos de filtragem espaciais com MEG beamforming permite estimar a atividade cerebral independente de um site TAC.
Em relação à montagem, duas montagens monopolares são descritas aqui, ou seja, com extracephalic localização do eléctrodo de referência (Figura 1B e 1C), e uma montagem unipolar, ou seja, com dois eléctrodos localizados sobre o couro cabeludo (Figura 1A) (veja-se outras classificações de montagens de eléctrodos por Nasseri et ai. 36). A vantagem de utilizar uma montagem monopolar é a prevenção de estimulação adicional cefálica de qualquer interesse para o estudo. A principal preocupação na escolha de uma montagem monopolar é o fluxo de corrente embora estruturas subcorticais, incluindo o tronco cerebral, com o risco potencial de modular funções do tronco cerebral vitais. Ambos colocação ombro extracephalic e ipsilateral do eletrodo de referência foi confirmado não para modular funções do tronco cerebral para 1 mA intensidade do ETCC 37,38 (por exemplo, variabilidade da frequência cardíaca, frequência respiratória e pressão arterial). Como uma montagem monopolar pode ter vantagens claras dependendo do desenho experimental, existe uma necessidade para testar exaustivamenteo efeito nas funções do tronco cerebral vitais durante mais elevadas intensidades de estimulação e diferentes montagens monopolares, bem como para comparar a influência entre ETCC e TAC.
Note-se que a configuração de alta definição é uma outra solução para o problema de evitar a montagem bipolar de estimulação adicional cefálica de qualquer interesse. A configuração de alta definição com um eletrodo de estimulação cercado por quatro eletrodos de referência leva à alta densidade de corrente sob o eletrodo central e baixa densidade de corrente por baixo dos quatro eletrodos circundantes. À medida que o efeito de estimulação depende da densidade da corrente, isso significa uma modulação unidireccional sob o eléctrodo central para a configuração de alta definição, em contraste com a modulação de bi-direccional de uma configuração de dois eléctrodos 39.
Visual percepção flicker induzido pelo TAC é um fator limitante crítico para a intensidade de estimulação quando colocar o tACS eletrodo no lóbulo frontal, devido à estimulação da retina por TAC. Em particular, os TAC em freqüência beta-band induz oscilação visual mesmo em baixa intensidade de TAC 11. Na nossa experiência 0,9 mA estimulação (pico-a-pico) através da DLPFC (eléctrodo F3) em 6 Hz é um nível de intensidade apropriada para minimizar a sensação de oscilação visual.
Dependendo da concepção da experiência, pode ser necessário para controlar o estimulador com um dispositivo externo (se esta função está disponível para o estimulador utilizado). Nós usamos uma placa de saída analógica de forma de onda para controlar o estimulador e enviar gatilhos para o amplificador de EEG (veja mais especificações de hardware e software na tabela de materiais). Em caso de que o estimulador aqui utilizada (ver tabela de materiais), o nível de ruído de saída de corrente com o comando à distância é maior do que com a interface estimulador incorporado. Daí a opção para controlar remotamente o estimulador deve ser escolhidosomente se forem requisitadas pelo projeto experimental.
Solução de problemas de saturação dos canais de EEG
Temos demonstrado que a ponte entre os TAC e eletrodos de EEG via vazando resultados gel de EEG em saturar o respectivo canal do amplificador de EEG e exclui dados de gravação a partir desses eletrodos (Figura 5A). Há outras razões para a saturação de um canal de EEG. Uma razão pode ser que o ganho do amplificador é demasiado estreito, e a resolução de gravação tensão não foi ajustada em conformidade. Neste caso, a resolução de gravação de tensão tem de ser reduzido para cobrir a gama de a magnitude do artefacto TAC. Outra razão é que o local de gravação é muito perto do local da estimulação. Neste caso, mesmo uma resolução de gravação de tensão muito grossa ainda pode não cobrir a gama de o artefato. A gravação deve ser localizado mais longe do local de estimulação.
O pro atualtocol abrangente descreve as definições e considerações técnicas para experimentos TAC-EEG em simultâneo. Com métodos para remover o artefato TAC e protocolos para a gravação de boa qualidade durante TAC, TAC será realmente um método promissor tofurther nossa compreensão da característica mais proeminente da atividade cerebral, dinâmicas rítmicas.
The authors have nothing to disclose.
This project has been supported by the Japan Science and Technology Agency (JST) PRESTO program.
Stimulator for tACS: Eldith DC-Stimulator plus | NeuroConn GmbH, Germany | For remote input, be sure to order a model with this feature enabled | |
Analog Output board for sending triggers: Static and Waveform Analog Output board, model NI PCI-6723 | National Instruments, USA | 13-bit, 32 channels. | |
Matlab and data acquisition toolbox | The MathWorks, Inc., USA | The 'Data acquisition toolbox' available for MATLAB provides functions to control data acquisition hardware such as an analog output board, produced by several manufacturers. | |
EEG system: eegosports, with a 32 channel waveguard EEG cap | ANT neuro, Netherlands | ||
tACS electrodes | NeuroConn GmbH, Germany | 305090-05 305050 | Materials: conductive-rubber electrodes. Dimensions of scalp electrodes: Outer Ø: 60 mm, Inner Ø:25 mm (Part# 305090-05) Cut from the original size Ø 75mm Dimensions of shoulder electrode: 50 x 50 mm (Part# 305050) |
EEG gel | Inselspital, Bern, Switzerland | Electrode paste, containing abrasives (i.e. pumice) which scrub the skin, improving the electrode-to-skin contact. | |
Abrasive skin preparing gel for EEG and electrocardiography: Nuprep | Weaver and Company, USA | ||
Cotton swabs, wooden handle | Salzmann MEDICO, Switzerland | Dimensions: 150 x 1.5 mm; wooden handle Ø 2.2 mm |
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Adhesive tape: Leukofix | BNS medical GmbH, Germany | 04.107.12 |