社会交往行为的评估

1。设备和房间设置： 克劳利的社交能力和偏爱社会的新颖性测试仪器是由一个长方形，三腔框。每个分庭是19 × 45厘米，是由明确的有机玻璃隔板，以开放的中间部分，允许自由进入每个分庭，的。 使用两个相同的，具有可拆卸盖的容器丝杯，大到足以容纳一个单一的鼠标。这些都是垂直放置内的器具，在每一方室之一，将包含的天真/陌生的鼠标。每个容器是由金属导线允许气缸但足够小，以防止在外面里面的动物之间的直接物理相互作用的内部和外部之间的空气交换。 应执行行为测试，从上午9:00和下午6:00。 一般室内照明是650勒克斯。 聘请观察员6.0（Noldus）程序（或合适的替代品），以监测和记录的观察和跟进参数，在4.3节中提到。 每次试验后，用70％乙醇（小鼠之间）清洁所有分庭，然后Clidox 1时05分01秒之间的笼子里，以防止嗅觉线索的偏见，并确保适当的消毒，分别。 使观察的人有至少2米距离的仪器。 2。动物的制备： 楼三至五年每笼的小鼠在12 小时随意获取食物和水的光/暗周期（上午7:00灯）的房间，根据当地动物保护委员会的指导和协议的标准和要求。 传送所有进入房间的第一次审判开始前30分钟的行为包含小鼠的笼子。 有两类本实验所需的鼠标，作为对照，天真或“unfamiliarized”动物和一个测试题目。对于控制鼠标使用相同的背景（通常C57BL6），年龄（一般为8-12周岁），性别和体重的鼠标，没有任何事先的接触与主题鼠标（不窝）。两个对照组小鼠要求每个实验，一个是用于会议上，我和另一个会议第二。可以使用相同的对照组小鼠试验之间。 3。习惯（适应）： 使用分裂的有机玻璃墙隔离的车厢左，右。 放置在左，右室（每个站点的每一个）的中间空的电线遏制杯。 放置在适应的中间腔的中心主题的鼠标。 Habituate为5分钟。 4。测试的社会从属关系方面（会议）： 对照组小鼠的地点之一（“陌生人”）是位于一个侧面商会内电线遏制杯。系统改变之间的试验室的左边或右边的陌生人1的位置。 取出车厢之间的墙壁，允许自由出入的主题鼠标，探索三个分庭。 随即，开始监测和记录以下参数： 时间和直接（有源）接触之间的主题鼠标和遏制杯房屋或没有住房的陌生人1个鼠标，每个分庭，单独的数目。主题鼠标和遏制杯，或伸展身体受到鼠标在3-5厘米左右的杯子是作为一个积极的接触计算的地方之间的直接接触; 时间和主题鼠标在每个车厢的其他行为，包括行走，自我修饰，缺乏任何超过5秒（“冻结”）的肢体动作，以及不寻常的行为，如跳跃，重复的行为等，数量; 时间和每个车厢的条目数量。鼠标被认为是在会议厅内，当它的头和四只爪子输入进入会议厅。 我的会话的持续时间为10分钟。 5。社会新奇/偏好会话测试（第二节）： 将相同的电线遏制杯内第二个控制鼠标在对面室（“陌生人”）（已在第一节空）。监视器在4.3中描述的相同的参数，区分陌生人1的存在之间的主题鼠标的行为，与陌生人2。 第二场会议的持续时间为10分钟。 6。统计分析： 通过使用原产6.0程序（或合适的替代品）以下参数进行分析，使用记录的数据： 总数的接触和总工期实验谅解备忘录之间的接触E和VS空遏制杯或1杯房屋陌生人“（在会议上，我），或与实验小鼠和1杯房屋陌生人与陌生人2（第二节）; 平均每次接触时间; 总数和其他行为的持续时间（冻结，自我修饰，步行） 主题鼠标在每个车厢花费的总时间。 分析上述各参数的显着的差异，通过比较各组： “空”遏制杯VS“陌生人1”为野生型（WT）的主题 “空”遏制杯VS“陌生人1”实验小鼠（如一个基因敲除，转基因或药物治疗的老鼠，等等）。 “陌生人”和“陌生人2”为WT主题 “陌生人”和“陌生人2”的实验小鼠，基因敲除，转基因或药物治疗等。 目前每个我作为会议的上述参数的数据集：WT和实验课题;第二节：WT和实验课题，如在图1所示（A和B）和2（A和B），分别为。 我们也建议要考虑到审议的其他参数，有助于规范这个测试，如以往的经验，识别特定的鼠标行为模式，如嗅，仪容，揉，战斗，安装，这可以在很大程度上取决于主观的个人观察， 。作为记录仪在测试过程中的行为参数中的人应该是盲目的基因型或治疗条件和解码之后这个信息。 7。代表性的成果： 社会交往测试的两个步骤的一个例子是在图1和2所示。测试的第一届会议上，允许社会背景和动机的主题鼠标估算。在这部分的测试，陌生人鼠标被封闭在一个圆形的线杯，让鼻子接触，但阻止小鼠战斗之间。这些条件保证，社会的做法都是由主题的鼠标，仅是调查没有直接的身体接触，。鼠标选择花费更多的时间围绕遏制包含一杯陌生人鼠标或空杯车厢，以避免任何接触。其他参数，如个别接触，可用于额外的持续时间，花了近陌生人鼠标。 通常情况下，野生型动物会花更多的时间在车厢内与陌生人相比，空杯（图1A）车厢，表明正常的社交能力，社会动机和隶属关系。在GSK -3α基因敲除小鼠，例如，有之间所花费的时间与空杯陌生人1杯（图1B）相比无显着差异，说明在这些动物模型的受损社交性 6 。 测试的第二届会议的目的是估计社会的新颖性和社会记忆。在这一部分，主体的鼠标有一个第一，已经调查，陌生的鼠标（陌生人1）之间的自由选择，和一个新的陌生的鼠标（陌生人2）。通常情况下，野生型动物回顾其以前与陌生人1接触，并且，在这次会议上，往往花费更多的时间与新遇到的鼠标（陌生人2），说明完整的社会记忆和偏爱新经验（图2A）。 与野生型小鼠，突变动物的GSK -3α不显示包含新推出的鼠标（陌生人2）包含现在熟悉的鼠标在第二节（图2B）（陌生人1）室室的偏好。 KO小鼠漠不关心的行为，在本次测试是减少社会的积极性和新奇的指示。 图1第一节：社会从属关系和社交能力。 （“陌生人方”）相比，相反商会（下称“空方”）与陌生人室的平均时间长度（± SEM）的。与野生型男性（A）正（二）动物未能证明支出在两院同时为社会接近的偏好。 *** P≤0.0001在WT组。 图2第二节：社会记忆和新颖性。从社交阶段（“陌生人”），在陌生的鼠标在一个新的陌生的鼠标（“陌生人”）相反室室和平均持续时间（± SEM）。与野生型男性（A）正（二）动物未能证明支出在两院同时为社会新奇的偏爱。 *** P≤0.0001在WT组。