社会的インタラクション挙動の評価

1。機器や部屋の設定： ローリーの社交性と社会的な新規性のテストのための優先するための装置は、長方形の、3室のボックスに構成されています。各チャンバーは19 × 45 cmの隔壁が各チャンバーへの無料アクセスを可能にするオープンミドルセクションで、透明なプレキシグラスから作られています。 つの同一、ワイヤーカップ状取り外し可能な蓋つき容器に十分な大きさの単一のマウスを保持することを使用してください。これらは、装置、各側のチャンバー内の1つの内側に垂直に配置され、そしてナイーブ/なじみのないマウスが含まれます。各コンテナは、内部と外部円筒のが、外側に1つずつ付いている内部での動物の間に直接の物理的相互作用を防ぐために十分に小さいとの間の空気の交換を可能にするために金属線で構成されています。 行動試験は午前と午後6時9時までの間実行する必要があります。 一般的な部屋の照明は650ルクスです。 観察を監視および記録するためにオブザーバー6.0（Noldus）プログラム（または適切な代替）を採用し、4.3節で述べたパラメータを、フォローアップ。 各試験の後、70％エタノールですべての部屋をきれいに（マウスの間）としClidox一時05分01秒（ケージの間）と嗅覚キューバイアスを防ぐために、それぞれ、適切な消毒を確実にする。 観察をする者は、少なくとも2メートル装置からにする必要があります。 2。動物の準備： ローカルアニマルケア委員会の指導とプロトコルの標準や要件に応じて食料と水にアドリブでアクセス権を持つ12時間の明/暗サイクル（午前7時点灯）と部屋のハウスケージに3〜5匹、。 最初の試験が始まる30分前行動の部屋にマウスを含むすべてのケージを転送する。 この実験に必要なマウスの二つのクラス、コントロール、ナイーブまたは"unfamiliarized"動物とテストの対象である1つのとして機能する1つがあります。コントロールマウスは、対象マウスと事前に接触（ではない同腹）することなく、同じバックグラウンド（通常C57BL6）、年齢（通常は8-12週齢）、性別と体重のマウスを使用してください。二つの対照マウスは、実験ごとに、いずれかのセッションのセッションIIのための私と別のに使用されている必要があります。同じコントロールマウスは、試験間で使用されることがあります。 3。馴化（適応）： 割っプレキシガラスの壁を使って、右と左の区画を隔離する。 右と左室（各サイトごとに1つ）の途中で空のワイヤーの封じ込めのカップを置きます。 適応のための中央の室の中央の被写体にマウスを置きます。 5分間慣らす。 4。テストの社会的な所属のアスペクト（セッションI）： 側の室のいずれかに配置されているワイヤの封じ込めのカップ内のコントロールマウス（"ストレンジャー1"）のいずれかを置きます。チャンバーの左側または右側のストレンジャー1の配置は、体系的に試験の間に変更されます。 3室の各々を探索する対象マウスのための自由なアクセスを可能にするために、区画間の壁を削除します。 すぐに、次のパラメータを監視し、録音を開始します。 持続時間と個別にそれぞれのチャンバーの件名マウスと封じ込めカップハウジングかハウジングストレンジャー1マウスの間に直接の（アクティブ）連絡先、数。主題マウスと封じ込めのコップ、またはコップ約3〜5センチメートルがアクティブな連絡先としてカウントされているエリア内の対象マウスの体の伸張の間に直接接触。 持続時間とウォーキング、セルフグルーミング、5秒以上（"凍結"）の任意の体の動きの欠如、ならびにそのようなジャンプ、反復的な行動、などなど、異常な行動、を含む、各コンパートメント内のサブジェクトマウスによる他の行動の数; 持続時間と各コンパートメントへのエントリの数。その頭とフォーパウがチャンバー内に入力したときにマウスをチャンバーにあると見なされます。 セッションの持続時間は、私は10分です。 5。テストの社会的な新規性/優先セッション（セッションII）： 反対側のチャンバー内の同一のワイヤの封じ込めのカップ内に2番目のコントロールのマウスを（"ストレンジャー2"）（セッションIの間に空のされていた）に置きます。ストレンジャー2と比較しストレンジャー1の存在下で対象とマウス間の行動を区別する、4.3で説明したのと同じパラメータを監視します。 セッションIIの持続時間は10分です。 6。統計解析： 起源6.0プログラムを使用して（または適切な代替）、記録されたデータを使用して、次のパラメータを分析する。 コンタクトの合計数と実験的な覚書の間で連絡先の合計時間eと空の封じ込めカップ対またはカップハウジングストレンジャー1（セッションのI）、または実験的なマウスとカップの住宅ストレンジャー1対のストレンジャー2の間（セッションIIで）; 連絡先ごとに期間を意味する。 他の行動の合計数と持続時間（歩行、セルフグルーミング、凍結） 合計時間は、それぞれの区画で対象をマウスで過ごした。 グループを比較することにより、前述の各パラメータの有意差を分析する。 野生型（WT）の対象は、"空の"封じ込めカップVS"ストレンジャー1" 実験的なマウス（ノックアウト、トランスジェニックや薬剤投与マウス、などなど）は、"空の"封じ込めカップVS"ストレンジャー1"。 WT主題のための"ストレンジャー1"対"ストレンジャー2" 実験的なマウスのための"ストレンジャー1"対"ストレンジャー2"（ノックアウト、トランスジェニック、または薬物治療、など）。 私は、セッションとして、前述の各パラメータのデータセットを提示：WTと実験対象、セッションII：WTと実験対象、図1に示すように（とB）と2（とB）、それぞれ。 それは主観的な個人的な観察に大きく依存することができるなどなど、スニッフィンググルーミング、摩擦、戦って、マウントなどの特定のマウスの行動パターンを、認識の前の経験としてこの試験を標準化するのに役立つ考慮他のパラメータ、、、考慮することもお勧めです。 。テスト中に動作を決定するパラメータのレコーダーとして機能している人は、遺伝子型や治療の条件とその後デコード、この情報に盲目にする必要があります。 7。代表的な結果： 社会的相互作用試験の二つのステップの例を図1と図2に示されています。テストの最初のセッションは、社会的な所属と対象マウスの動機の推定が可能になります。テストのこの部分では、他人のマウスは、鼻の接触を許可された円形のワイヤーカップで囲みますが、マウスとの間で戦って阻止された。これらの条件は、社会的なアプローチが対象とマウスによって開始されていることを確認し、直接物理的に接触することなく、唯一の調査のです。マウスは、見知らぬ人のマウスを含んだ封じ込めカップ周りの多くの時間を費やすか、空のカップをコンパートメントに移動することで、任意の接触を避けるために、選択肢を持っています。そのような個々の連絡先の数などの他のパラメータは、、見知らぬ人のマウスに近い過ごした期間に、追加で使用することができます。 一般的に、野生型動物は通常の社交性、社会的な動機と所属を示す、空のカップ（図1A）とコンパートメントに比べストレンジャー1のコンパートメントで有意に多くの時間を過ごすことになります。 GSK -3αノックアウトマウスでは、例えば、これらの動物モデル6に障害社交性を示す見知らぬ1を含むカップ（図1B）に比べて空のコップと一緒に過ごした時間の間に有意差は、ありません。 テストの第二セッションは、社会的な新規性と社会的なメモリを見積もるために設計されています。この部分では、被験者マウスは、最初に、既に-調査、なじみのないマウス（ストレンジャー1）の間に自由な選択、そして小説なじみのないマウス（ストレンジャー2）を持っています。通常は、WTの動物はストレンジャー1と、その前の接触をリコール、そして、このセッションでは、小説の経験（図2A）のための完全な社会的記憶と好みを示す、新たに発生するマウス（ストレンジャー2）と過ごす時間を増やす傾向にある。 野生型マウスとは異なり、GSK -3α変異動物は、セッションII（図2B）で、使い慣れたマウス（ストレンジャー1）を含むチャンバを介して、新たに導入されたマウス（ストレンジャー2）を含むチャンバーの優先順位を示していない。このテストでのKOマウスの無関心動作が減少し、社​​会動機と新規性を示している。 図1：セッションI：社会的所属と社交性。反対側の室（"空の側"）と比較して見知らぬ人（"見知らぬ人の側"）とチャンバー内の時間の長さ（± SEM）を意味する。 WTの男性（）とは異なり、KO（B）の動物は、衆参両院で同じ時間を費やすことで社会的な近接性に対する選好を示すことができなかった。 *** P WT群で≤0.0001。 図2セッションII：社会メモリーとノベルティ。社交性のフェーズ（"ストレンジャー1"）からのなじみのないマウスで、新たな不慣れなマウス（"ストレンジャー2"）と反対側のチャンバー内のチャンバー内の時間の持続時間（± SEM）を意味する。 WTの男性（）とは異なり、KO（B）の動物は、衆参両院で同じ時間を費やすことで社会的な新規性のための好みを示すことができなかった。 *** P WT群で≤0.0001。