الإنبثاث التجريبية وCTL المناعي نقل بالتبني النموذجي ماوس
Summary
والانبثاث الرئة التجريبية وCTL نموذج الفأر المناعي لتحليل التفاعل خلية ورم الخلايا التائية<em> في الجسم الحي</em>.
Abstract
الفأر نموذج تجريبي الانبثاث الانبثاث هو نموذج بسيط ولكن ذات الصلة من الناحية الفسيولوجية. يتم حقن الخلايا السرطانية عن طريق الوريد (رابعا) في أوردة الذيل الماوس واستعمار في الرئتين ، وبالتالي ، تشبه الخطوات الأخيرة من خلايا الورم ورم خبيث عفوية : البقاء في التسرب وتداولها والاستعمار في الأجهزة الطرفية. من وجهة نظر علاجية ، والنموذج التجريبي الانبثاث هو النموذج المثالي منذ أبسط والهدف من العلاجات غالبا ما تكون نقطة النهاية في الانبثاث : الورم النقيلي أنشئت في الجهاز البعيد. في هذا النموذج ، يتم حقن الخلايا السرطانية في أوردة الذيل الرابع الماوس ويسمح للاستعمار وتنمو في الرئتين. ثم يتم حقن الورم محددة CTLs الرابع في الماوس الانبثاث الحاملة. يمكن التحكم في عدد وحجم الرئة الانبثاث من قبل عدد من خلايا الورم ليتم حقنه والوقت للنمو الورم. لذلك ، مراحل مختلفة من ورم خبيث ، من الحد الأدنى لالانبثاث الانبثاث واسعة ، يمكن أن تكون على غرار. ويتم تحليل الانبثاث الرئة بسبب التضخم مع الحبر ، مما يتيح سهولة الملاحظة البصرية والكمي.
Protocol
Disclosures
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
بدعم من المنح المقدمة من المعاهد الوطنية للصحة (CA133085 إلى كوالا لمبور) والجمعية الأميركية للسرطان (RSG – 09 – 209 – 01 – TBG إلى كوالا لمبور).
Materials
Solutions:
India Ink Solution (17):
- Pour 150 ml of distilled water into a 250 ml flask.
- Add 4 drops ammonium hydroxide to the distilled water.
- Add 30 ml India Ink stock (i.e. Sanford Black Magic Waterproof Drawing Ink 4465 Item 44011) to the ammonia and water mixture.
- Top off with distilled water to a volume of 200 ml. Solution is ready for injection.
Fekete’s Solution (17):
Fekete’s solution is used to bleach India ink-inflated tumor-bearing lungs to distinguish white tumor nodules from the black background of normal tissues.
- Add 350ml 95% EtOH to 1L glass bottle.
- Add 150ml distilled water
- Add 50ml formaldehyde
- Add 25ml glacial acidic acid
References
- Ryan, M. H., Bristol, J. A., McDuffie, E., Abrams, S. I. Regression of extensive pulmonary metastases in mice by adoptive transfer of antigen-specific CD8(+) CTL reactive against tumor cells expressing a naturally occurring rejection epitope. J Immunol. 167 (8), 4286-4292 (2001).
- Caldwell, S. A., Ryan, M. H., McDuffie, E., Abrams, S. I. The Fas/Fas ligand pathway is important for optimal tumor regression in a mouse model of CTL adoptive immunotherapy of experimental CMS4 lung metastases. J Immunol. 171 (5), 2402-2412 (2003).
- Liu, K., Caldwell, S. A., Greeneltch, K. M., Yang, D., Abrams, S. I. CTL Adoptive Immunotherapy Concurrently Mediates Tumor Regression and Tumor Escape. J Immunol. 176 (6), 3374-3382 (2006).
- Yang, D., Stewart, T. J., Smith, K. K., Georgi, D., Abrams, S. I., Liu, K. Downregulation of IFN-gammaR in association with loss of Fas function is linked to tumor progression. International journal of cancer. 122 (2), 350-362 (2008).
- Pages, F., Berger, A., Camus, M. Effector memory T cells, early metastasis, and survival in colorectal cancer. N Engl J Med. 353 (25), 2654-2666 (2005).
- Galon, J., Costes, A., Sanchez-Cabo, F. Type, density, and location of immune cells within human colorectal tumors predict clinical outcome. Science. 313 (5795), 1960-194 (2006).
- Strater, J., Hinz, U., Hasel, C. Impaired CD95 expression predisposes for recurrence in curatively resected colon carcinoma: clinical evidence for immunoselection and CD95L mediated control of minimal residual disease. Gut. 54 (5), 661-665 (2005).
- Camus, M., Tosolini, M., Mlecnik, B. Coordination of intratumoral immune reaction and human colorectal cancer recurrence. Cancer research. 69 (6), 2685-2693 (2009).
- Dudley, M. E., Wunderlich, J. R., Yang, J. C. Adoptive cell transfer therapy following non-myeloablative but lymphodepleting chemotherapy for the treatment of patients with refractory metastatic melanoma. J Clin Oncol. 23 (10), 2346-2357 (2005).
- Srivastava, M. K., Sinha, P., Clements, V. K., Rodriguez, P., Ostrand-Rosenberg, S. Myeloid-derived suppressor cells inhibit T-cell activation by depleting cystine and cysteine. Cancer research. 70 (1), 68-77 (2010).
- Nagaraj, S., Gabrilovich, D. I. Tumor escape mechanism governed by myeloid-derived suppressor cells. Cancer research. 68 (8), 2561-2563 (2008).
- Nguyen, D. X., Bos, P. D., Massague, J. Metastasis: from dissemination to organ-specific colonization. Nature reviews. 9 (4), 274-284 (2009).
- Heijstek, M. W., Kranenburg, O., Rinkes, B. o. r. e. l., H, I. Mouse models of colorectal cancer and liver metastases. Digestive surgery. 22 (1-2), 1-2 (2005).
- Yang, D., Ud Din, N., Browning, D. D., Abrams, S. I., Liu, K. Targeting lymphotoxin beta receptor with tumor-specific T lymphocytes for tumor regression. Clin Cancer Res. 13 (17), 5202-5210 (2007).
- Yang, D., Thangaraju, M., Browning, D. D. IFN Regulatory Factor 8 Mediates Apoptosis in Nonhemopoietic Tumor Cells via Regulation of Fas Expression. J Immunol. 179 (7), 4775-4782 (2007).
- Yang, D., Thangaraju, M., Greeneltch, K. Repression of IFN regulatory factor 8 by DNA methylation is a molecular determinant of apoptotic resistance and metastatic phenotype in metastatic tumor cells. Cancer research. 67 (7), 3301-3309 (2007).
- Wexler, H. Accurate identification of experimental pulmonary metastases. Journal of the National Cancer Institute. 36 (4), 641-645 (1966).
