C. elegans Seguimiento del movimiento: un método para evaluar la locomoción en gusanos
Published: April 30, 2023
Abstract
Fuente: Davies, A. G. et al. Un ensayo para medir los efectos del etanol en la velocidad de locomoción de Caenorhabditis elegans. J. Vis. (2015).
Este video describe el uso de software de video y seguimiento para grabar el movimiento de gusanos en una arena. El protocolo de ejemplo mide el efecto de la exposición al etanol en la locomoción del gusano.
Protocol
El siguiente protocolo es un extracto de Davies et al, An Assay for Measuring the Effects of Ethanol on the Locomotion Speed of Caenorhabditis elegans, J. Vis. (2015). Pasos a realizar el día antes del ensayo Elija gusanos de etapa L4 en placas frescas de medio de crecimiento de nematodos (NGM) sembradas con un césped d…
Materials
| C. elegans strains | Caenorhabditis Genetics Center | ||
| 60 x 15 mm Petri plates, triple vented | Greiner Bio-One | 628161 | Other plate brands will suffice. |
| NGM agar | Various | NaCl (3 g/L), agar (17 g/L), peptone (2.5 g/L), 1 ml cholesterol (5 mg/ml in ethanol), 1 ml (1 M) MgSO4, 1 ml (1 M) CaCl2, 25 ml (1 M) KPO4, pH=6, 975 ml H2O | |
| Forceps | Various | e.g., Fisher Scientific #10300 | |
| 37 °C Incubator | Various | For drying agar | |
| Copper rings | Plumbmaster | STK#35583 (48 cap thread gasket) | 1.6 cm inner diameter, 1.8 cm outer diameter copper rings |
| 100% ethanol | Various | ||
| Parafilm M | Bemis | PM996 | |
| CCD camera | QImaging | RET-4000R-F-M-12 | This camera has a large field of view. |
| Stereomicroscope with C-mount and 0.5X objective | Leica | MZ6 | Discontinued model, M60 is current equivalent. |
| Light source | Schott | A08923 | 3”x3” backlight for even illumination across the field of view |
| Imaging and tracking software | Media Cybernetics | ImagePro-Plus v6.0-6.3 | Newer versions of the software have tracking functions. |
Cite This Article
C. elegans Movement Tracking: A Method to Assess Locomotion in Worms. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20163, doi: (2023).