C. elegans Tracciamento del movimento: un metodo per valutare la locomozione nei vermi
Published: April 30, 2023
Abstract
Fonte: Davies, A. G. et al. Un saggio per misurare gli effetti dell’etanolo sulla velocità di locomozione di Caenorhabditis elegans. J. Vis. Exp. (2015).
Questo video descrive l’uso di software video e di tracciamento per registrare il movimento del worm in un’arena. Il protocollo di esempio misura l’effetto dell’esposizione all’etanolo sulla locomozione dei vermi.
Protocol
Il seguente protocollo è un estratto da Davies et al, An Assay for Measuring the Effects of Ethanol on the Locomotion Speed of Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2015). Passaggi da eseguire il giorno prima del saggio Raccogliere i vermi stadio L4 su piatti freschi di mezzo di crescita del nematode (NGM) seminati con u…
Materials
| C. elegans strains | Caenorhabditis Genetics Center | ||
| 60 x 15 mm Petri plates, triple vented | Greiner Bio-One | 628161 | Other plate brands will suffice. |
| NGM agar | Various | NaCl (3 g/L), agar (17 g/L), peptone (2.5 g/L), 1 ml cholesterol (5 mg/ml in ethanol), 1 ml (1 M) MgSO4, 1 ml (1 M) CaCl2, 25 ml (1 M) KPO4, pH=6, 975 ml H2O | |
| Forceps | Various | e.g., Fisher Scientific #10300 | |
| 37 °C Incubator | Various | For drying agar | |
| Copper rings | Plumbmaster | STK#35583 (48 cap thread gasket) | 1.6 cm inner diameter, 1.8 cm outer diameter copper rings |
| 100% ethanol | Various | ||
| Parafilm M | Bemis | PM996 | |
| CCD camera | QImaging | RET-4000R-F-M-12 | This camera has a large field of view. |
| Stereomicroscope with C-mount and 0.5X objective | Leica | MZ6 | Discontinued model, M60 is current equivalent. |
| Light source | Schott | A08923 | 3”x3” backlight for even illumination across the field of view |
| Imaging and tracking software | Media Cybernetics | ImagePro-Plus v6.0-6.3 | Newer versions of the software have tracking functions. |
Cite This Article
C. elegans Movement Tracking: A Method to Assess Locomotion in Worms. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20163, doi: (2023).