Dieses Video beschreibt die Verwendung von Video- und Tracking-Software, um Wurmbewegungen in einer Arena aufzuzeichnen. Das Beispielprotokoll misst die Auswirkungen der Ethanolexposition auf die Schneckenfortbewegung.
Protocol
Das folgende Protokoll ist ein Auszug aus Davies et al, An Assay for Measuring the Effects of Ethanol on the Locomotion Speed of Caenorhabditis elegans, J. Vis. (2015). Schritte, die am Tag vor dem Assay durchgeführt werden sollen L4-Bühnenwürmer auf frische Nematoden-Wachstumsmedium (NGM)-Platten mit einem Rasen von O…
Materials
C. elegans strains
Caenorhabditis Genetics Center
60 x 15 mm Petri plates, triple vented
Greiner Bio-One
628161
Other plate brands will suffice.
NGM agar
Various
NaCl (3 g/L), agar (17 g/L), peptone (2.5 g/L), 1 ml cholesterol (5 mg/ml in ethanol), 1 ml (1 M) MgSO4, 1 ml (1 M) CaCl2, 25 ml (1 M) KPO4, pH=6, 975 ml H2O
Forceps
Various
e.g., Fisher Scientific #10300
37 °C Incubator
Various
For drying agar
Copper rings
Plumbmaster
STK#35583 (48 cap thread gasket)
1.6 cm inner diameter, 1.8 cm outer diameter copper rings
100% ethanol
Various
Parafilm M
Bemis
PM996
CCD camera
QImaging
RET-4000R-F-M-12
This camera has a large field of view.
Stereomicroscope with C-mount and 0.5X objective
Leica
MZ6
Discontinued model, M60 is current equivalent.
Light source
Schott
A08923
3”x3” backlight for even illumination across the field of view
Imaging and tracking software
Media Cybernetics
ImagePro-Plus v6.0-6.3
Newer versions of the software have tracking functions.