בדיקת חום הדרגתית: שיטה לבדיקת העדפת טמפרטורה בזחלי דרוזופילה
Published: April 30, 2023
Abstract
מקור: ליו, J., ואח ‘. בדיקת שיפוע טמפרטורה כדי לקבוע העדפות תרמיות של זחלים Drosophila. ג’יי ויס אקספ. (2018).
זבובי פירות Drosophila יכול להבחין שינויים קטנים בטמפרטורה ולכן בחר סביבות עם תנאים תרמיים נוחים. סרטון זה מתאר בדיקה התנהגותית הבודקת את העדפת הטמפרטורה של זחלי דרוזופילה על שיפוע תרמי ליניארי.
Protocol
פרוטוקול זה הוא קטע מתוך ליו ואח ‘. בדיקת שיפוע טמפרטורה לקביעת העדפות תרמיות של זחלי דרוזופילה, J. Vis. Exp. (2018). 1. הגדרת מעבר צבע בטמפרטורה הכנת מעבר צבע חד-כיווני ליצירת סביבת סביבה לחה במהלך מבחני האדון, הניחו את שני גושי האלומיניום המחוברים לשתי אמבטי?…
Representative Results
איור 1: הגדרות של מבחני מעבר צבע יחיד ודו-כיווני. (A) הגדרת שיפוע חד כיוונית עם שתי לוחות מבחני אלומיניום על שני גושי אלומיניום. הטמפרטורות של גושי האלומיניום נשלטות על ידי מים במחזור משתי אמבטיות מים. (ב) סידור שלושת גו…
Materials
| Gradient assay apparatus | |||
| PolyScience 9106, Refrigerated/Heated 6L Circulating Bath | Thomas Scientific | 9106 | This model is discontinued. Updated replacement models include: 1186R00 and 1197U04 for 120 V, 60 Hz, or 1184L08 and 1197U04 for 240 V, 50 Hz. |
| Aluminum assay plate (for single directional gradient) | Outer size: 14 x 10.1 x 0.9 cm, inner size: 12.9 x 8.7 x 0.8 cm, black anodized. | ||
| Aluminum plate (for bidirectional gradient) | 25 x 22 x 0.2 cm, black anodized. | ||
| Aluminum block | Outer size: 25.5 x 5 x 1.4 cm, parameters of inner channels are shown in Figure 1D. | ||
| Connector for aluminum blocks and tubing | McMaster-Carr | 91355K82 | |
| Tygon Sanitary Silicone Tubing | Tygon | 57296 | 1/4" ID x 3/8" OD x 1/16" wall |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Items and reagents for assay | |||
| Pestle | USA Scientific | 17361 | Pestle for 1.5 mL microcentrifuge tubes |
| Thermometer | Fluke | 51II | |
| Thermocouple | Fluke | K type | |
| Universal microplate lid | Corning | 6980A77 | |
| 35 mm dish | Corning | 9380D40 | |
| Labeling tape (for bidirectional gradient) | Fisher Scientific | 15-951 | Fisherbrand labeling tape 2 in x 14 yds |
| Agarose | Invitrogen | 16500500 | Prepare 1% solution |
| Sucrose | Sigma | S0389-5KG | Prepare 18% solution right before starting assay |
| Paint brush | Fisher Scientific | 11860 | |
| 50 mL centrifuge tubes | Denville | C1062-P | |
| Scoopula | Fisher Scientific | 14-357Q | |
| 500 mL round wide-mouth bottle | Pyrex | 1395-500 | |
| Cell strainer (300 mm pore) | PluriSelect | 43-50300 | Optional item for larvae washing |
| Cardboard box (vial tray) | Genesee Scientific | FS32-124 |
Cite This Article
Temperature Gradient Assay: A Method to Test Temperature Preference in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20147, doi: (2023).