Analyse du gradient de température : méthode pour tester la préférence de température chez les larves de drosophiles
Published: April 30, 2023
Abstract
Source : Liu, J., et coll. A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (2018).
Les mouches des fruits drosophiles peuvent distinguer les petits changements de température et donc choisir des environnements avec des conditions thermiques favorables. Cette vidéo décrit un test comportemental qui teste la préférence de température des larves de Drosophila sur un gradient thermique linéaire.
Protocol
Ce protocole est un extrait de Liu et coll. A Temperature Gradient Assay to Determine Thermal Preferences of Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2018). 1. Configuration du gradient de température Préparer le gradient unidirectnel Pour créer un environnement ambiant humide pendant les analyses, placez les deux blocs d’aluminium reliés à deux bains d’eau sur des serviettes en papier humide, séparées par 10 cm (figure 1</st…
Representative Results
Figure 1 : Configurations d’analyse de gradient simples et bidirectionnels. (A) Configuration de gradient monodirectdirectal avec deux plaques d’analyse en aluminium sur deux blocs d’aluminium. Les températures des blocs d’aluminium sont contrôlées par l’eau circulante de deux bains d’eau. (B) L’agencement des trois blocs d’aluminium, des bains d’eau et d’une plaque…
Materials
| Gradient assay apparatus | |||
| PolyScience 9106, Refrigerated/Heated 6L Circulating Bath | Thomas Scientific | 9106 | This model is discontinued. Updated replacement models include: 1186R00 and 1197U04 for 120 V, 60 Hz, or 1184L08 and 1197U04 for 240 V, 50 Hz. |
| Aluminum assay plate (for single directional gradient) | Outer size: 14 x 10.1 x 0.9 cm, inner size: 12.9 x 8.7 x 0.8 cm, black anodized. | ||
| Aluminum plate (for bidirectional gradient) | 25 x 22 x 0.2 cm, black anodized. | ||
| Aluminum block | Outer size: 25.5 x 5 x 1.4 cm, parameters of inner channels are shown in Figure 1D. | ||
| Connector for aluminum blocks and tubing | McMaster-Carr | 91355K82 | |
| Tygon Sanitary Silicone Tubing | Tygon | 57296 | 1/4" ID x 3/8" OD x 1/16" wall |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Items and reagents for assay | |||
| Pestle | USA Scientific | 17361 | Pestle for 1.5 mL microcentrifuge tubes |
| Thermometer | Fluke | 51II | |
| Thermocouple | Fluke | K type | |
| Universal microplate lid | Corning | 6980A77 | |
| 35 mm dish | Corning | 9380D40 | |
| Labeling tape (for bidirectional gradient) | Fisher Scientific | 15-951 | Fisherbrand labeling tape 2 in x 14 yds |
| Agarose | Invitrogen | 16500500 | Prepare 1% solution |
| Sucrose | Sigma | S0389-5KG | Prepare 18% solution right before starting assay |
| Paint brush | Fisher Scientific | 11860 | |
| 50 mL centrifuge tubes | Denville | C1062-P | |
| Scoopula | Fisher Scientific | 14-357Q | |
| 500 mL round wide-mouth bottle | Pyrex | 1395-500 | |
| Cell strainer (300 mm pore) | PluriSelect | 43-50300 | Optional item for larvae washing |
| Cardboard box (vial tray) | Genesee Scientific | FS32-124 |
Cite This Article
Temperature Gradient Assay: A Method to Test Temperature Preference in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20147, doi: (2023).