درجة الحرارة الانحدار المقايسة: طريقة لاختبار درجة الحرارة تفضيل في يرقات Drosophila
Published: April 30, 2023
Abstract
المصدر: ليو، ج.، وآخرون: A درجة الحرارة الانحدار المقايسة لتحديد التفضيلات الحرارية لليرقات Drosophila. ج. فيس إكسب. (2018).
يمكن لذباب الفاكهة Drosophila التمييز بين التغيرات الصغيرة في درجة الحرارة وبالتالي اختيار البيئات ذات الظروف الحرارية المواتية. يصف هذا الفيديو المقايسة السلوكية التي تختبر تفضيل درجة الحرارة ليرقات دروسوفيلا على تدرج حراري خطي.
Protocol
هذا البروتوكول هو مقتطف من ليو وآخرون. اختبار تدرج درجة الحرارة لتحديد التفضيلات الحرارية ليرقات دروسوفيلا، J. Vis. Exp. (2018). 1. إعداد تدرج درجة الحرارة إعداد تدرج أحادي الاتجاه لخلق بيئة رطبة المحيطة خلال المقايسات، وضع كتل الألومنيوم اثنين متصلة اثنين …
Representative Results
الشكل 1: إعدادات المقايسة التدرج أحادية و ثنائية الاتجاه. (أ) إعداد التدرج أحادي الاتجاه مع اثنين من لوحات قياس الألومنيوم على كتلتين من الألومنيوم. يتم التحكم في درجات حرارة كتل الألومنيوم عن طريق تعميم المياه من اثنين من حما…
Materials
| Gradient assay apparatus | |||
| PolyScience 9106, Refrigerated/Heated 6L Circulating Bath | Thomas Scientific | 9106 | This model is discontinued. Updated replacement models include: 1186R00 and 1197U04 for 120 V, 60 Hz, or 1184L08 and 1197U04 for 240 V, 50 Hz. |
| Aluminum assay plate (for single directional gradient) | Outer size: 14 x 10.1 x 0.9 cm, inner size: 12.9 x 8.7 x 0.8 cm, black anodized. | ||
| Aluminum plate (for bidirectional gradient) | 25 x 22 x 0.2 cm, black anodized. | ||
| Aluminum block | Outer size: 25.5 x 5 x 1.4 cm, parameters of inner channels are shown in Figure 1D. | ||
| Connector for aluminum blocks and tubing | McMaster-Carr | 91355K82 | |
| Tygon Sanitary Silicone Tubing | Tygon | 57296 | 1/4" ID x 3/8" OD x 1/16" wall |
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Items and reagents for assay | |||
| Pestle | USA Scientific | 17361 | Pestle for 1.5 mL microcentrifuge tubes |
| Thermometer | Fluke | 51II | |
| Thermocouple | Fluke | K type | |
| Universal microplate lid | Corning | 6980A77 | |
| 35 mm dish | Corning | 9380D40 | |
| Labeling tape (for bidirectional gradient) | Fisher Scientific | 15-951 | Fisherbrand labeling tape 2 in x 14 yds |
| Agarose | Invitrogen | 16500500 | Prepare 1% solution |
| Sucrose | Sigma | S0389-5KG | Prepare 18% solution right before starting assay |
| Paint brush | Fisher Scientific | 11860 | |
| 50 mL centrifuge tubes | Denville | C1062-P | |
| Scoopula | Fisher Scientific | 14-357Q | |
| 500 mL round wide-mouth bottle | Pyrex | 1395-500 | |
| Cell strainer (300 mm pore) | PluriSelect | 43-50300 | Optional item for larvae washing |
| Cardboard box (vial tray) | Genesee Scientific | FS32-124 |
Cite This Article
Temperature Gradient Assay: A Method to Test Temperature Preference in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20147, doi: (2023).