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リン酸化部位決定のためのオリゴペプチド競合アッセイ

JoVE Journal
Bioquímica

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JoVE Journal Bioquímica

Oligopeptide Competition Assay for Phosphorylation Site Determination

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リン酸化部位決定のためのオリゴペプチド競合アッセイ

DOI:

10.3791/55708-v

•

09:16 min

•

May 18, 2017

•

Min Sung Joo, Ja Hyun Koo, Sol-Bi Shin, Hyungshin Yim, Sang Geon Kim

¹College of Pharmacy and Research Institute of Pharmaceutical Sciences,Seoul National University, ²College of Pharmacy and Institute of Pharmaceutical Science and Technology,Hanyang University

Capítulos

00:05Título
01:05Site-directed Mutagenesis of pGEX-Nrf2
03:45In Vitro Competitive 5′ Adenosine Monophosphate-activated Protein Kinase (AMPK) Assay
06:13In Vitro AMPK Activity Assay with a Site-specific Mutant
07:39Results: In Vitro AMPK Assays with Competitive Oligopeptides or a Site-specific Mutant Protein
08:31Conclusion

Summary

Tadução automática

ペプチド競合アッセイは、種々の分子および免疫学的実験において広く使用されている。本稿では、in vitroオリゴペプチド競合キナーゼアッセイの詳細な方法と、特定のリン酸化部位を見出すのに有用な関連する検証手順について説明します。

Tags

Keywords: Oligopeptide Competition Assay Phosphorylation Site Determination Cell Signaling Post-translational Modifications Site-directed Mutagenesis PCR DpnI Digestion Bacterial Transformation DNA Sequencing Protein Expression And Purification

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