Manikür Bozulması: Drosophila Larvalarından Hemolimf Toplama Yöntemi

Published: April 30, 2023

Abstract

Kaynak: Reimels, T. A. ve Pfleger, C.M. Drosophila Larvalarında Lenf Bezi ve Hemositleri İnceleme Yöntemleri. J. Vis. Exp. (2016).

Drosophila hemolimf, larva ve yetişkin aşamalarında vücutta dolaşan hem kan hem de interstisyel sıvı görevi görür. Bu videoda, dolaşımdaki hücreleri ölçmek için larva hemolimfini toplamak için bir protokol açıklanmaktadır.

Protocol

Bu protokol Reimels ve Pfleger’den bir alıntıdır, Drosophila Larvalarında Lenf Bezi ve Hemositleri İnceleme Yöntemleri, J. Vis. Exp. (2016). 1. Dolaşımdaki Hemosit Konsantrasyonu Bu test için kabaca aynı gelişim aşamasında larva elde etmek için, dişilerin 2 – 6 saatlik sabit bir süre boyunca yumurta bırakmasına izin vererek yumurta toplamayı kısıtlayın. Larvaları 1x fosfat tamponlu salin (PBS) ile dolu diseksiyon kabı kuyularında t…

Materials

PBS tablets MP Biomedicals 2810305
dissecting dish Corning 7220-85
microcentrifuge tube Denville C2170
silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit Krayden (distributed through Fisher) NC9644388 (Fisher catalog number) Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions.
stereomicroscope Morrell Instruments (Nikon distributor) mna42000, mma36300 Nikon models SMZ1000 and SMZ645
tissue wipe VWR 82003-820
forceps Electron Microscopy Sciences 72700-DZ
p200 pipette Eppendorf 3120000054
Countess Automated Cell Counter Invitrogen C10227
Countess cell counting chamber slides Invitrogen C10283
hemocytometer Hausser Scientific 3200
trypan blue stain Life Technologies T10282

Play Video

Citar este artigo
Cuticle Disruption: A Method to Collect Hemolymph from Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20126, doi: (2023).

View Video