Cuticle Disruption: Eine Methode, um Hämolymphe von Drosophila Larven zu sammeln
Published: April 30, 2023
Abstract
Quelle: Reimels, T. A. und Pfleger, C.M. Methoden zur Untersuchung der Lymphdrüse und Hämozyten in Drosophila Larvae. J. Vis. (2016).
Die Drosophila Hämolymphe dient sowohl als Blut und interstitielle Flüssigkeit, zirkuliert im ganzen Körper während der Larve und Erwachsenenstadien. Dieses Video beschreibt ein Protokoll zur Sammlung von Larvenhämolympiden, um die zirkulierenden Zellen zu quantifizieren.
Protocol
Dieses Protokoll ist ein Auszug aus Reimels und Pfleger, Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. (2016). 1. Zirkulierende Hämozytenkonzentration Um Larven von ungefähr der gleichen Entwicklungsstufe für diesen Test zu erhalten, beschränken Sie die Eiersammlung, indem sie Den Weibchen erlauben, Eier für einen bestimmten Zeitraum von 2 – 6 Stunden zu legen. Larven in Sezieren von Tellerbrunnen sammeln, die mit…
Materials
| PBS tablets | MP Biomedicals | 2810305 | |
| dissecting dish | Corning | 7220-85 | |
| microcentrifuge tube | Denville | C2170 | |
| silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit | Krayden (distributed through Fisher) | NC9644388 (Fisher catalog number) | Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions. |
| stereomicroscope | Morrell Instruments (Nikon distributor) | mna42000, mma36300 | Nikon models SMZ1000 and SMZ645 |
| tissue wipe | VWR | 82003-820 | |
| forceps | Electron Microscopy Sciences | 72700-DZ | |
| p200 pipette | Eppendorf | 3120000054 | |
| Countess Automated Cell Counter | Invitrogen | C10227 | |
| Countess cell counting chamber slides | Invitrogen | C10283 | |
| hemocytometer | Hausser Scientific | 3200 | |
| trypan blue stain | Life Technologies | T10282 |
Citar este artigo
Cuticle Disruption: A Method to Collect Hemolymph from Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20126, doi: (2023).