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면역학 및 감염병학
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Isolamento e quantificazione del virus Epstein-Barr dalla linea cellulare P3HR1
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JoVE 신문 면역학 및 감염병학
Isolation and Quantification of Epstein-Barr Virus from the P3HR1 Cell Line
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Isolamento e quantificazione del virus Epstein-Barr dalla linea cellulare P3HR1

DOI:
10.3791/64279-v

•

09:14 min

•

September 28, 2022

•

, ,
1Department of Experimental Pathology, Immunology and Microbiology, Faculty of Medicine,American University of Beirut, 2Center for Infectious Diseases Research (CIDR), Faculty of Medicine,American University of Beirut

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:36Preparing the Plate for Culture
  • 01:49Induction and Isolation of Epstein-Barr Virus Particles
  • 02:45DNA Extraction from Viral Particles
  • 04:45Checking DNA Concentration and Purity
  • 05:34Quantification by Real-Time Polymerase Chain Reaction
  • 07:54Results: Cell Counting and Induction of P3HR-1 Cells with PMA and DMSO
  • 08:48Conclusion

Summary

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Questo protocollo consente l'isolamento delle particelle virali di Epstein-Barr dalla linea cellulare umana P3HR1 inducendo il ciclo litico virale con forbolo 12-miristato 13-acetato. Il DNA viene successivamente estratto dalla preparazione virale e sottoposto a PCR in tempo reale per quantificare la concentrazione di particelle virali.

Tags

Epstein-Barr VirusP3HR1 Cell LineViral StockVirus IsolationVirus QuantificationPMADMSOCell CultureCentrifugationPhenol-chloroform ExtractionEthanol Precipitation

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