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Kontinuierlicher fluoreszenzbasierter Endonuklease-gekoppelter DNA-Methylierungsassay zum Screening auf DNA-Methyltransferase-Inhibitoren
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
Continuous Fluorescence-Based Endonuclease-Coupled DNA Methylation Assay to Screen for DNA Methyltransferase Inhibitors
DOI:

06:07 min

August 05, 2022

, ,

Chapters

  • 00:05Introduction
  • 00:24Prepare Assay Solutions for the Screen
  • 01:48Prepare Enzyme Solutions for the Screen
  • 02:52Run the Methylation Assay and Analyze the Data
  • 04:29Results: Determination of Initial Velocities of DNA Methylation in the Presence and Absence of Potential Inhibitors
  • 05:40Conclusion

Summary

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DNA-Methyltransferasen sind potenzielle Ziele für Krebsmedikamente. Hier wird ein Protokoll vorgestellt, um kleine Moleküle auf DNA-Methyltransferase-Hemmung zu untersuchen. Dieser Assay verwendet eine Endonuklease, um die DNA-Methylierung an die Fluoreszenzerzeugung zu koppeln und ermöglicht die Überwachung der Enzymaktivität in Echtzeit.

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