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Nano-Differential-Scanning-Fluorimetrie für das Screening in der fragmentbasierten Lead-Discovery
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Nano-Differential Scanning Fluorimetry for Screening in Fragment-based Lead Discovery
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Nano-Differential-Scanning-Fluorimetrie für das Screening in der fragmentbasierten Lead-Discovery

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06:26 min

•

May 16, 2021

DOI:

10.3791/62469-v

DOI:
10.3791/62469-v

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06:26 min
May 16, 2021

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1Oncode Institute and Division of Biochemistry,the Netherlands Cancer Institute, 2Institute for Organic Chemistry and Chemical Biology, Center for Biomolecular Magnetic Resonance (BMRZ),Johann Wolfgang Goethe-University

Summary

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Die Überwachung von Änderungen der Schmelztemperatur eines Zielproteins(z. B.Thermal Shift Assay, TSA) ist eine effiziente Methode zum Screening von Fragmentbibliotheken von einigen hundert Verbindungen. Wir präsentieren ein TSA-Protokoll, das eine robotergestützte Nano-Differential Scanning Fluorimetry (Nano-DSF) zur Überwachung der intrinsischen Tryptophanfluoreszenz und der Lichtrückstreuung für das Fragmentscreening implementiert.

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Nano-differential Scanning FluorimetryFragment-based Lead DiscoveryProtein SampleLigand ScreeningFragment PlateProtein PlateNano DispenserDeck ConfigurationFragment DispensingProtein Sample Preparation

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Ahmad, M. U. D., Fish, A., Molenaar, J., Sreeramulu, S., Richter, C., Altincekic, N., Schwalbe, H., Wienk, H., Perrakis, A. Nano-Differential Scanning Fluorimetry for Screening in Fragment-based Lead Discovery. J. Vis. Exp. (171), e62469, doi:10.3791/62469 (2021).

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