JoVE 비디오를 활용하시려면 도서관을 통한 기관 구독이 필요합니다. 전체 비디오를 보시려면 로그인하거나 무료 트라이얼을 시작하세요.
Chapters
- 00:05Introduction
- 00:51Equipment Preparation
- 03:113’-End Biotinylated mRNA Immobilization
- 05:20Translation Mix Assembly and Delivery
- 07:24Results: Analyses for Saccharomyces cerevisiae Translation of a Firefly Luciferase-encoding mRNA
- 09:12Conclusion
Sporing af individuelle oversættelseshændelser giver mulighed for kinetiske undersøgelser i høj opløsning af cap-afhængige oversættelsesmekanismer. Her demonstrerer vi en in vitro enkeltmolekyleanalyse baseret på billeddiagnostiske interaktioner mellem fluorescerende mærkede antistoffer og epitop-mærkede spirende peptider. Denne metode muliggør enkeltmolekylekarakterisering af initiering og peptidforlængelse kinetik under aktiv in vitro cap-afhængig oversættelse.
