Здесь мы описываем подробный метод бесшовного редактирования генов в плюрипотентных стволовых клетках человека с использованием донорской плазмиды на основе piggyBac и мутанта Cas9 nickase. Две точечные мутации были введены в экзон 8 локуса ядерного фактора гепатоцитов 4 альфа (HNF4α) в эмбриональных стволовых клетках человека (hESCs).
Wang, Y., Smith, A. J. H., Hay, D. C. Introducing Point Mutations into Human Pluripotent Stem Cells Using Seamless Genome Editing. J. Vis. Exp. (159), e61152, doi:10.3791/61152 (2020).