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Uma plataforma de espectrometria de massa de troca de hidrogênio (HDX-MS) para investigar enzimas biossintéticas de peptídeos
JoVE 신문
생화학
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JoVE 신문 생화학
A Hydrogen-Deuterium Exchange Mass Spectrometry (HDX-MS) Platform for Investigating Peptide Biosynthetic Enzymes
DOI:

11:32 min

May 04, 2020

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Chapters

  • 00:04Introduction
  • 00:36Bottom-Up Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) Reference Sample Workflow Preparation
  • 01:18Reference Data Processing and Peptide List Definition
  • 05:05Hydrogen-Deuterium Exchange (HDX) Reactions
  • 06:36HDX Data Processing, Analysis, and Visualization
  • 09:03Results: Reapresentative HDX-MS Peptide Biosynthetic Enzyme Evaluation
  • 10:44Conclusion

Summary

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As sintetizações lanthipeptide catalisam reações multistep durante a biossíntese de produtos naturais de peptídeos. Aqui, descrevemos um fluxo de trabalho contínuo, de baixo para cima, de espectrometria de massa de troca de hidrogênio -deutério (HDX-MS) que pode ser empregado para estudar a dinâmica conformacional das sintetizações de lanthipeptídeo, bem como outras enzimas semelhantes envolvidas na biossíntese de produtos naturais peptídeos.

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