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Chapters
- 00:04Title
- 01:12Large Scale Expression of Histidine-6 (His6)-Tagged Nuclear Factor-kappa-B Essential Modulator Crystallography Construct (NEMO-EEAA)
- 02:33His6-Tagged NEMO-EEAA Purification
- 04:42His6 Tag Cleavage and Purification
- 07:09Sparse Matrix Screening
- 08:23Seed Stock Generation
- 09:00Crystal Looping
- 09:43X-Ray Data Processing and Structure Solution
- 10:38Results: Representative Production, Crystallization, and Structure Determination of the IKK-Binding Domain of NEMO
- 12:28Conclusion
Descrevemos protocolos para a determinação da estrutura do domínio ikk-obrigatório da NEMO por cristalografia de raios-X. Os métodos incluem expressão de proteína, purificação e caracterização, bem como estratégias para otimização de cristal bem-sucedida e determinação da estrutura da proteína em sua forma desvinculada.
