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Modification du génome dans des lignées de cellules mammifères à l’aide de CRISPR-Cas
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Genome Editing in Mammalian Cell Lines using CRISPR-Cas
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Modification du génome dans des lignées de cellules mammifères à l’aide de CRISPR-Cas

DOI:
10.3791/59086-v

•

07:56 min

•

April 11, 2019

•

, , ,
1Genome Institute of Singapore,Agency for Science Technology and Research, 2School of Chemical and Biomedical Engineering,Nanyang Technological University

Chapters

  • 00:04Title
  • 00:18Cell Passaging
  • 01:08Cell Transfection
  • 01:47Transfected Cell Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS)
  • 02:32Individual Clone Expansion and Editing Efficiency Evaluation
  • 06:09Results: Representative Gene Editing Efficiency Analyses
  • 07:24Conclusion

Summary

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SAE-CRISPR est une technologie puissante à l’ingénieur les génomes complexes de plantes et d’animaux. Ici, nous détaillons un protocole pour modifier efficacement le génome humain endonucléases de Cas différents. Nous mettons en évidence les considérations importantes et des paramètres de conception pour optimiser l’efficacité édition.

Tags

CRISPR-Cas9Genome EditingMammalian Cell LinesKnock-outKnock-inCell PassagingTrypsin-EDTATransfectionFACSFluorescent MarkerCell Culture MediumGenomic DNA Extraction

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