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Produção de partículas Pseudotyped para estudar a alta patogenicidade coronavírus em uma configuração de nível 2 de biossegurança
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1Department of Microbiology and Immunology, College of Veterinary Medicine,Cornell University, 2INRA, Virologie et Immunologie Moléculaires, 3Robert Frederick Smith School of Chemical and Biomolecular Engineering,Cornell University, 4Department of Microbiology, College of Agricultural and Life Sciences,Cornell University, 5Horae Gene Therapy Center,University of Massachusetts Medical School
Chapters
- 00:04Title
- 00:41Cell Seeding for Pseudotyped Particle Production
- 02:05Three-plasmid Co-transfection
- 03:53Pseudotyped Particles Collection
- 04:46Pseudotyped Particle Infection
- 05:54Infectivity Quantification by Luciferase Assay Readout
- 07:04Results: Infectivity Assays of SARS-CoV S and MERS-CoV S Pseudotyped Particles
- 08:02Conclusion
Aqui, apresentamos um protocolo para gerar pseudotyped partículas em um cenário de BSL-2 incorporando a proteína de aumento da síndrome respiratória do vírus de alta patogenicidade Oriente e coronavírus síndrome respiratória aguda grave. Estas partículas pseudotyped contêm um gene do repórter do luciferase permitindo a quantificação de entrada de vírus em células de host de destino.
