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ホット スポット領域の変異の包括的かつ同時検出のための単一液滴デジタル ポリメラーゼの連鎖反応
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Single Droplet Digital Polymerase Chain Reaction for Comprehensive and Simultaneous Detection of Mutations in Hotspot Regions
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ホット スポット領域の変異の包括的かつ同時検出のための単一液滴デジタル ポリメラーゼの連鎖反応
DOI:
10.3791/58051-v
•
08:23 min
•
September 25, 2018
•
Charles Decraene
2
,
Amanda Bortolini Silveira
,
Marc Michel
,
François-Clément Bidard
3,4
,
Jean-Yves Pierga
3,5
,
Marc-Henri Stern
6
,
Charlotte Proudhon
1
Circulating Tumor Biomarkers Laboratory, SiRIC, Translational Research Department
,
Institut Curie, PSL Research University
,
2
CNRS UMR144
,
Institut Curie, PSL Research University
,
3
Department of Medical Oncology
,
Institut Curie, PSL Research University
,
4
University Versailles Saint-Quentin-en-Yvelines
,
5
University Paris Descartes
,
6
Inserm U830
,
Institut Curie, PSL Research University
Chapters
00:04
Title
00:48
Blood Collection and Plasma Storage
02:04
cfDNA Extraction
04:45
ddPCR Mix Preparation
05:46
Droplet Generation
06:25
PCR Amplification
07:06
Results:
KRAS
and
EGFR
Drop-off ddPCR Assays
07:50
Conclusion
Summary
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ここでは、ドロップオフ ddPCR と加水分解プローブの一意のペアを使用して単一の反作用で対象地域の複数の遺伝子の変異を正確に定量化するためのプロトコルを提案する.
Tags
Single Droplet Digital PCR
Circulating Tumor DNA
Mutation Detection
Hotspot Regions
Cancer Diagnosis
Absolute Quantification
Molecular Analysis
QPCR Alternative
Plasma Extraction
Proteinase K
Lysis Buffer
Silica Membrane
Vacuum Pump
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