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基因靶向随机诱变在裂变酵母中选择染色质稳定蛋白酶突变体
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Gene-targeted Random Mutagenesis to Select Heterochromatin-destabilizing Proteasome Mutants in Fission Yeast
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基因靶向随机诱变在裂变酵母中选择染色质稳定蛋白酶突变体
DOI:
10.3791/57499-v
•
07:18 min
•
May 15, 2018
•
Hogyu David Seo
,
Daeyoup Lee
1
Department of Biological Sciences
,
Korea Advanced Institute of Science and Technology
Chapters
00:04
Title
00:37
Random Mutagenesis of
rpt4+
by Error-prone PCR
01:33
Transformation of Fission Yeast by Electroporation
04:01
Selection of Heterochromatin-destabilizing Mutants and Checking for False Positives
05:44
Results: Random Mutagenesis of Heterochromatin-destabilizing Proteasome Mutants in Fission Yeast
06:36
Conclusion
Summary
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本文介绍了一种用于裂变酵母靶基因随机诱变的详细方法。例如, 我们针对的是
rpt4+
, 它对19S 蛋白酶体的亚基进行编码, 并筛选出破坏染色质的突变。
Tags
Gene-targeted Random Mutagenesis
Heterochromatin-destabilizing
Proteasome Mutants
Fission Yeast
Error-prone PCR
Transformation-fusion Construct
Electroporation
Sorbitol Wash
Heterochromatin Formation And Maintenance
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