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Cella singola quantificazione dei tassi di degradazione delle proteine mediante microscopia a fluorescenza time-lapse in coltura delle cellule aderenti
JoVE 신문
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JoVE 신문 발생학
Single-Cell Quantification of Protein Degradation Rates by Time-Lapse Fluorescence Microscopy in Adherent Cell Culture
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Cella singola quantificazione dei tassi di degradazione delle proteine mediante microscopia a fluorescenza time-lapse in coltura delle cellule aderenti

DOI:
10.3791/56604-v

•

12:06 min

•

February 04, 2018

•

,
1UPSUTER, Institute of Bioengineering (IBI), School of Life Sciences,École Polytechnique Fédérale de Lausanne (EPFL)

Chapters

  • 00:00Title
  • 01:42Cell seeding and pulse labeling of the SNAP-tag
  • 04:15Time-lapse microscopy
  • 05:23Image processing and analysis
  • 07:55Results
  • 10:13Conclusions

Summary

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Questo protocollo descrive un metodo per determinare la proteina emivite in singole cellule aderenti, utilizzando impulsi etichettatura e time-lapse imaging di fluorescenza di proteine di fusione SNAP-tag.

Tags

Protein DegradationSingle-cellTime-lapse Fluorescence MicroscopyAdherent Cell CultureSNAP-tagProtein Half-lifeFluorescence ImagingProtein TurnoverHeterogeneityEndogenous Protein TaggingOverexpressionDNA Repair EnzymeBenzylguanineFluorescent DyeExponential DecayEmbryonic Stem CellsMonolayerCell-cell InteractionsN-cadherin

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