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Selektionsabhängige und unabhängige Erzeugung von CRISPR / Cas9-vermittelten Gen-Knockouts in Säugetierzellen
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JoVE 신문 유전학
Selection-dependent and Independent Generation of CRISPR/Cas9-mediated Gene Knockouts in Mammalian Cells

Selektionsabhängige und unabhängige Erzeugung von CRISPR / Cas9-vermittelten Gen-Knockouts in Säugetierzellen

DOI:

11:35 min

June 16, 2017

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Chapters

  • 00:05Title
  • 00:57Transfection of CRISPER Component into Cultured Cells and Drug Selection
  • 02:31Isolation of Clonal Populations
  • 03:53Screening Candidates by Dot Blot
  • 06:30Screening Candidates by Colony PCR
  • 08:59Results: Knockout Cell Lines Generated by Two CRISPER/Cas9 Methods
  • 10:40Conclusion

Summary

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Jüngste Fortschritte in der Fähigkeit, somatische Zelllinien genetisch zu manipulieren, haben großes Potenzial für grundlegende und angewandte Forschung. Hier präsentieren wir zwei Ansätze für CRISPR / Cas9-produzierte Knockout-Produktion und Screening in Säugetierzelllinien, mit und ohne Verwendung von selektierbaren Markern.

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