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Uma Abordagem DNA afinidade G-quadruplex para a purificação de enzimaticamente activa G4 Resolvase1
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A G-quadruplex DNA-affinity Approach for Purification of Enzymatically Active G4 Resolvase1

Uma Abordagem DNA afinidade G-quadruplex para a purificação de enzimaticamente activa G4 Resolvase1

9,452 Views

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11:25 min

•

March 18, 2017

DOI:

10.3791/55496-v

DOI:
10.3791/55496-v

•

11:25 min
March 18, 2017

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4 Views
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1Department of Cancer Biology,Wake Forest School of Medicine, 2YX Genomics, 3Department of Biology,Ball State University, 4Department of Hematology and Oncology,Roper St. Francis Hospital

Summary

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G4 Resolvase1 liga-se a (G4) estruturas G-quadruplex com mais apertados afinidade reportada para uma proteína de ligação e G4 representa a maior parte da actividade de desenrolamento-G4 ADN em células HeLa. Nós descrevemos um protocolo romance que aproveita a afinidade e atividade desenrolamento dependente de ATP G4-Resolvase1 para purificar especificamente G4R1 recombinante cataliticamente ativo.

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G-quadruplex DNAG4 Resolvase1Enzymatic PurificationATP-dependent PurificationRecombinant ProteinBacterial ExpressionCatalytically Active EnzymeLysozymeProtease InhibitorSonicationCentrifugationStreptavidin Paramagnetic Beads

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Routh, E. D., Creacy, S. D., Beerbower, P. E., Akman, S. A., Vaughn, J. P., Smaldino, P. J. A G-quadruplex DNA-affinity Approach for Purification of Enzymatically Active G4 Resolvase1. J. Vis. Exp. (121), e55496, doi:10.3791/55496 (2017).

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