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RNA配列決定およびTH-プロモーター駆動EGFP発現を使用して中脳培養における生活ドーパミン作動性ニューロンの信頼性の高い同定
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Reliable Identification of Living Dopaminergic Neurons in Midbrain Cultures Using RNA Sequencing and TH-promoter-driven eGFP Expression
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RNA配列決定およびTH-プロモーター駆動EGFP発現を使用して中脳培養における生活ドーパミン作動性ニューロンの信頼性の高い同定

DOI:
10.3791/54981-v

•

10:54 min

•

February 10, 2017

•

, , , , , , ,
1Division of Biology and Biological Engineering,California Institute of Technology (Caltech)

Chapters

  • 00:05Title
  • 00:59Isolation of Embryonic Midbrain
  • 02:55Dissociation and Plating of Cells
  • 05:34Harvesting Cultured Dopaminergic Neurons for RNA Sequencing
  • 07:04Generation, Purification and Amplification of First-strand cDNA
  • 09:13Results: RNA-seq Detection of Expressed Transcripts in Single Dopaminergic Neurons
  • 09:39Conclusion

Summary

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パーキンソン病（PD）では、黒質（SNC）ドーパミン作動性ニューロンは、運動機能障害につながる、退化します。ここでは、チロシンヒドロキシラーゼ（TH）プロモーター配列によって駆動されるeGFPを発現するマウスから腹側中脳の神経細胞を培養する培養物から個々の蛍光ニューロンを収穫し、RNA-seqのを使用して、それらのトランスクリプトームを測定するためのプロトコルを報告しています。

Tags

RNA SequencingTyrosine HydroxylaseEGFPDopaminergic NeuronsMidbrain CulturesParkinson’s DiseaseDrug AddictionVentral MesencephalonVentral Tegmental AreaSubstantia NigraDissection

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