Summary

Bir geliştirilmiş çoklu tetrot hiper motor yapımı fareler davranışlar içinde büyük ölçekli sinirsel kayıt için

Published: May 09, 2018
doi:

Summary

Biz on sekiz bağımsız olarak ayarlanabilir tetrodes ile 3D yazdırılabilir bir hipersürücü inşaatı mevcut. Hiper-sürücüyü özgürce bir birkaç hafta boyunca fareler davranışlar içinde beyin etkinliklerini kaydetmek için tasarlanmıştır.

Abstract

Nöronlar büyük bir nüfus birçok gün uyanık hayvanlar içerisinde faaliyet şekillerinin izleme sistemleri Nörobilim alanında değerli bir tekniktir. Bu tekniğin bir anahtar bileşen istenen beyin bölgeleri içine birden çok elektrotlar kesin yerleşimini ve onların istikrar bakımından oluşur. Burada, on sekiz bağımsız olarak ayarlanabilir tetrodes içerir ve fareler serbestçe davranıyor in vivo hücre dışı sinir kayıt için özel olarak tasarlanmış bir 3D yazdırılabilir hipersürücü inşası için bir protokol açıklayın. Micro için bağlı tetrodes da tek tek parça boyunca birden çok beyin bölgeleri gelişmiş olabilir veya elektrotlar bir dizi daha küçük bir alanına yerleştirmek için kullanılır. Birden çok tetrodes etkin davranış sırasında beyinde action potentials bireysel nöronlar onlarca yanı sıra yerel alan potansiyelleri nöronların nüfus üzerinden eşzamanlı muayene için izin verir. Buna ek olarak, tasarımı farklı deneysel ihtiyaçları için kolayca değiştirilebilir yazılım hazırlanması için daha basit 3D sağlar.

Introduction

Sistemleri Nörobilim alanında, bilim adamları sinir ilişkilendirir Bilişsel süreçler mekansal kullan, bellek ve karar verme gibi temel eğitim. Bu tür çalışmalar için hayvan davranış sırasında birçok bireysel nöronlar etkinliğini izlemek için önemlidir. Geçtiğimiz on yıl içinde iki önemli gelişmeler küçük hayvan1,2,3hücre dışı sinir kayıt için deneysel ihtiyaçlarını karşılamak için yapılmıştır. İlk tetrot, dört microwires nöronlar sinirsel aktivite aynı anda kaydetmek için kullanılan bir bohça oldu1,2,4. Diferansiyel sinyal genlikleri faaliyet bir tetrot dört kanal genelinde bireysel nöron aktivitesi birçok aynı anda kaydedilen hücre5yalıtım sağlar. Ayrıca, microwires esnek doğası tetrot ve hedef hücre nüfus arasındaki göreceli öteleme minimize tetrot daha fazla istikrar sağlar. Tetrodes, çeşitli türler, kemirgenler1,2,6, primatlar7ve böcekler8de dahil olmak üzere birçok beyin araştırmaları şimdi yerine tek bir elektrot yaygın olarak kullanılmaktadır. İkinci bir hiper motor gelişimi taşıdığı birden çok bağımsız olarak hareketli tetrodes, hangi sinirsel aktivite nöronların birden çok kayıt konumları3, daha büyük nüfus üzerinden eşzamanlı izlenmesi için izin 9,10,11,12.

Küçük hayvanlar için güvenilir ve uygun fiyatlı çok tetrot kayıt cihazı kullanılabilirliği sınırlıdır. Başlangıçta Bruce McNaughton13tarafından geliştirilen klasik hiper sürücü başarıyla serbestçe fareler, son yirmi yılda9,10,14, birçok laboratuvarlarında davranıyor sinirsel kayıtlarından kullanılmaktadır 15. ancak, teknik nedenlerden dolayı McNaughton sürücü oluşturmak için gereken özgün bileşenler şimdi elde etmek çok zordur ve son zamanlarda geliştirilmiş veri edinme arayüzleri ile uyumlu değildir. Hipersürücü de kabul edilen diğer tasarımını tek tek el işi için Micro tutarsız sonuçlar verir ve önemli ölçüde zaman12tüketmek gerekir. Sinirsel aktivite çeşitli beyin bölgelerinden de, davranışlar fareler kaydetmek için stereolithographic teknolojisini kullanan yeni bir hiper motor geliştirdi. Aşağıdaki gereksinimleri karşılamak Aranan: (1) yeni hiper tetrodes beyin kesin deplasman izin ve istikrarlı birden çok hedef bölgeleri; recording sağlamak (2) yeni hiper kolay bağlantıya izin vermek için son zamanlarda geliştirilen manyetik quickclip sistemi ile uyumlu olmalıdır; ve (3) yeni hiper-sürücü doğru bir şekilde kolayca kullanılabilir malzemeler ile çoğaltılabilir. Burada, biz bir teknik McNaughton tasarım dayalı on sekiz bağımsız olarak hareketli tetrodes içeren 3D yazdırılabilir Hiper-sürücüyü oluşturmak için sağlar. İletişim kuralında, biz biz başarıyla kayıt tek-nöron aksiyon potansiyelleri ve yerel alan potansiyelleri postrhinal ve medial entorhinal cortices hafta içinde kullanılan yeni hiper imalat sürecinin ayrıntıları açıklamak bir serbestçe sıçan doğal yiyecek görevleri sırasında davranıyor.

Protocol

1. 3D modellerin Stereolitografi Stereolithographic teknikleri hiper motor parçaları ve aksesuarları yazdırmak için kullanın. Her hipersürücü on sekiz mekikler oluşur, on sekiz civata ve tüm diğer plastik parçaları (şekil 1) her biri olan yakındaki.Not: Aksesuarlar hiper motor parçası olmayan ancak hiper motor yapımı için gereklidir. 2. hazırlama aksesuarları (Şekil 2). Mi…

Representative Results

Yeni inşa edilmiş bir hipersürücü deneme sonuçları elde etmek için kullanılır. Sürücü tetrodes ø 17 µm (0.0007″), polimid kaplı platin-iridyum (% 90-) Tel inşa ile donatılmıştı. Tetrodes uçları Platin siyah çözüm için elektrot impedances 100 ve 200 kΩ 1 kHz arasında azaltmak için kaplama. Hiper-sürücüyü 4.6 mm orta hat ve 0,5 mm anterior transvers sinüs 550 g, erkek uzun-Evans sıçan kafatasında sol implante. Ek zemin teller kafatası vidalar için …

Discussion

Burada, on sekiz bağımsız olarak hareketli tetrodes oluşan yeni geliştirilen hiper sürücü oluşturma işlemini açıklar. Sürücünün uygun yerlerinden stereolithographic baskı tarafından oluşturulan bileşenleri ile birlikte birçok kullanılabilir donanım mağaza satın oluşturulabilir. Hiper-sürücüyü kronik standart cerrahi prosedürler kullanarak bir kafatası implante olması ve hayvan çeşitli davranış görevleri gerçekleştirirken ekstraselüler sinirsel aktivite kaydedebilen.

<p class="…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

Moser laboratuvar Kavli enstitüde sistemleri Nörobilim ve merkezi sinir hesaplama için teşekkür ediyoruz, neural Norveç Üniversitesi bilim ve teknoloji, kronik için yordamlar Rat kayıt. Bu eser NIH grant R21 NS098146 ve insan sınır bilim programı uzun vadeli bursu LT000211/2016-M’ye L. Lu tarafından desteklenmiştir.

Materials

Welding rod Blue Demon ER308L-035-01T Stainless steel, 0.035" in diameter
Screw McMaster 91771A060 Stainless steel, flat head, 0-80 thread, 5/8" in length
Screw McMaster 91772A051 Stainless steel, pan head, 0-80 thread, 5/32" in length
Screw McMaster 92196A056 Stainless steel, socket head, 0-80 thread, 5/16" in length
Screw McMaster 92196A055 Stainless steel, socket head, 0-80 thread, 1/4" in length
Screw McMaster 95868A131 Nylon,  socket head, 2-56 thread, 3/16" in length, black
Screw nut McMaster 90730A001 Stainless steel, narrow hex,  0-80 thread
Shoulder screw McMaster 90298A213 Stainless steel, 8-32 thread, 3/16" in diameter, 1/4" in length
Cup screw McMaster 92313A105 Stainless steel, 4-40 thread, 3/16" in length
Thumb screw McMaster 94323A592 Nylon, 8-32 thread, 3/8" in length, black
Magnet Apex M3X1MMDI Neodymium, 3 mm X 1 mm disc
Metal tubing Small Parts B00137QHNS Stainless steel, 23 gauge, 0.0253" OD, 0.013" ID, 0.006" wall
Metal tubing New England Small Tube Custom-made Stainless steel, 30 gauge, 0.012/0.0125" OD, 0.007/0.008" ID, full hard
Heat-shrink tubing McMaster 7856K72 0.09" ID before shrinking, blue
Silicone tubing A-M Systems 807300 0.040" ID, 0.085" OD
Polyimide tubing A-M Systems 823400 0.0045" ID, 0.0005" wall
Ground wire A-M Systems 791500 0.005" bare, 0.008" coated, half hard
Tetrode wire California Fine Wire Custom-made 0.0007" in diameter, platinum-iridium (90%-10%), HML and VG coating
EIB Neuralynx EIB-72-QC-Large
Gold pins Neuralynx large EIB pins
Tap Balax 01302-000 M1.2 thread size
Tap McMaster 2522A811 0-80 thread size, bottoming
Tap McMaster 2522A771 0-80 thread size, plug
Tap McMaster 26955A94 3/8"-24 thread size, bottoming
Tap McMaster 2522A713 2-56 thread size
Tap McMaster 2522A715 4-40 thread size
Tap McMaster 2522A718 8-32 thread size
Die McMaster 2576A457 3/8"-24 thread size, 1" OD
Drill bit McMaster 30585A82 Wire gauge 65, 0.035" in diameter
Drill bit McMaster 30585A83 Wire gauge 66, 0.033" in diameter
Drill bit McMaster 30585A87 Wire gauge 70, 0.028" in diameter
Drill bit McMaster 30585A88 Wire gauge 71, 0.026" in diameter
Drill bit McMaster 30585A91 Wire gauge 73, 0.024" in diameter
Drill bit McMaster 8870A23 3/16" in diameter
Dremel disc Wagner 31M Diamond coated, 22 mm in diameter, 0.17 mm in thickness
Steel wire Precision Brand 21212 0.012" in diameter, full hard
Steel wire Precision Brand 21007 0.007" in diameter, full hard
Steel wire A-M Systems 792700 0.003" in diameter, half hard
Super glue Loctite LT-40640 # 406
Super glue Loctite LT-41550 # 415
Dental acrylic powder  Teets 223-3773 Coral
Dental acrylic liquid Teets 223-4003

References

  1. O’Keefe, J., Recce, M. L. Phase relationship between hippocampal place units and the EEG theta rhythm. Hippocampus. 3 (3), 317-330 (1993).
  2. Wilson, M. A., McNaughton, B. L. Dynamics of the hippocampal ensemble code for space. Science. 261 (5124), 1055-1058 (1993).
  3. Gothard, K. M., Skaggs, W. E., Moore, K. M., McNaughton, B. L. Binding of hippocampal CA1 neural activity to multiple reference frames in a landmark-based navigation task. J Neurosci. 16 (2), 823-835 (1996).
  4. Gray, C. M., Maldonado, P. E., Wilson, M., McNaughton, B. Tetrodes markedly improve the reliability and yield of multiple single-unit isolation from multi-unit recordings in cat striate cortex. J Neurosci Methods. 63 (1-2), 43-54 (1995).
  5. Buzsaki, G. Large-scale recording of neuronal ensembles. Nat Neurosci. 7 (5), 446-451 (2004).
  6. Fyhn, M., Hafting, T., Witter, M. P., Moser, E. I., Moser, M. B. Grid cells in mice. Hippocampus. 18 (12), 1230-1238 (2008).
  7. Skaggs, W. E., et al. EEG sharp waves and sparse ensemble unit activity in the macaque hippocampus. J Neurophysiol. 98 (2), 898-910 (2007).
  8. Guo, P., Pollack, A. J., Varga, A. G., Martin, J. P., Ritzmann, R. E. Extracellular wire tetrode recording in brain of freely walking insects. J Vis Exp. (86), (2014).
  9. Knierim, J. J., McNaughton, B. L., Poe, G. R. Three-dimensional spatial selectivity of hippocampal neurons during space flight. Nat Neurosci. 3 (3), 209-210 (2000).
  10. Leutgeb, S., et al. Independent codes for spatial and episodic memory in hippocampal neuronal ensembles. Science. 309 (5734), 619-623 (2005).
  11. Lansink, C. S., et al. A split microdrive for simultaneous multi-electrode recordings from two brain areas in awake small animals. J Neurosci Methods. 162 (1-2), 129-138 (2007).
  12. Kloosterman, F., et al. Micro-drive array for chronic in vivo recording: drive fabrication. J Vis Exp. (26), (2009).
  13. . Google Patents Available from: https://www.google.com/patents/US5928143 (1999)
  14. Redish, A. D., et al. Independence of firing correlates of anatomically proximate hippocampal pyramidal cells. J Neurosci. 21 (5), RC134 (2001).
  15. Schmitzer-Torbert, N., Redish, A. D. Neuronal activity in the rodent dorsal striatum in sequential navigation: separation of spatial and reward responses on the multiple T task. J Neurophysiol. 91 (5), 2259-2272 (2004).
  16. Nguyen, D. P., et al. Micro-drive array for chronic in vivo recording: tetrode assembly. J Vis Exp. (26), (2009).
  17. Chang, E. H., Frattini, S. A., Robbiati, S., Huerta, P. T. Construction of microdrive arrays for chronic neural recordings in awake behaving mice. J Vis Exp. (77), e50470 (2013).
  18. Vandecasteele, M., et al. Large-scale recording of neurons by movable silicon probes in behaving rodents. J Vis Exp. (61), e3568 (2012).
  19. Siegle, J. H., et al. Chronically implanted hyperdrive for cortical recording and optogenetic control in behaving mice. Conf Proc IEEE Eng Med Biol Soc. 2011, 7529-7532 (2011).
  20. Brunetti, P. M., et al. Design and fabrication of ultralight weight, adjustable multi-electrode probes for electrophysiological recordings in mice. J Vis Exp. (91), e51675 (2014).
  21. . Google Patents Available from: https://www.google.com/patents/US4575330 (1986)
  22. Ludvig, N., Potter, P. E., Fox, S. E. Simultaneous single-cell recording and microdialysis within the same brain site in freely behaving rats: a novel neurobiological method. J Neurosci Methods. 55 (1), 31-40 (1994).

Play Video

Cite This Article
Lu, L., Popeney, B., Dickman, J. D., Angelaki, D. E. Construction of an Improved Multi-Tetrode Hyperdrive for Large-Scale Neural Recording in Behaving Rats. J. Vis. Exp. (135), e57388, doi:10.3791/57388 (2018).

View Video