במבחנת ההקלטה של פעילות עצבית Mesenteric מביא עכבר Jejunal ופלחים גסים

איתות חושית תפיסת כאב היא תהליך מורכב נובע גומלין מורכב שבין העצבים מביאים, הנוירונים שדרה, עולה ושבילי facilitatory מעכבים וכמה אזורים שונים במוח יורדים. ככזה, שינויים באחת או יותר של רמות אלו עלולים לגרום איתות חושית שינתה וכאב בטן במדינות מחלה. כדי ללמוד את כל ההיבטים השונים הללו של מספר רב של טכניקות חושיות איתות פותחיו החל ניסויי תא בודדים (למשל, הדמית סידן על נוירונים) כדי במודלים של בעלי חיים שלמים (למשל, תגובות התנהגותיות כגון תגובת visceromotor). הטכניקה המתוארת במאמר זה מאפשרת לחוקרים להעריך את פעילות עצב מביאה במיוחד במבחנה מפלחת מבודדת של מעי דק או מעי גס במכרסמים. בקיצור, פלח עיכול מבודד (בדרך כלל מְעִי צָם או מעי גס) מותקן בתא הקלטה ייעודי perfused עם K פיסיולוגיפתרון ריב '. עצב splanchnic הוא גזור חינם ומחובר לאלקטרודה המאפשר רישום של פעילות עצבית מביאה בעצבים מביאים splanchnic או אגן. ניתן להקליט פעילות עצבית basally או בתגובת הגדלה לחצי intraluminal ו / או תרכובות תרופתיות שניתן ליישם באופן ישיר לתוך תא ההקלטה (serosally), או באמצעות perfusate intraluminal (mucosally) כדי להעריך את השפיע על פריקה מביא ^1-6 . ראוי לציין, עצבים splanchnic מכילים גם סיבים efferent ו afferents viscerofugal בנוסף afferents חושית. אחד היתרונות הגדולים של הקלטה עצב splanchnic vivo לשעבר היא העובדה כי החוקרים יכולים לכמת פעילות עצבית ללא אפנון או קלט ממערכת העצבים המרכזית, המאפשר אחד כדי ללמוד את ההשפעה הישירה של תרכובות מיושם באופן מקומי על פעילות עצבית. יתר על כן, ניטור של פרמטרים חיוניים, ככל שיהיה דרוש בגישת in vivo (ראה להלן), הוא no הכלח. הקלטה splanchnic במבחנה הוא סוף סוף הרבה פחות זמן רב יותר מאשר עמיתו vivo ב שלה.

הביא פעילות עצבית בתגובה לגירויים אחרים, כגון ליטוף רירי, חיטוט באמצעות שערות פון פריי או מתיחה של המגזר, ניתן ללמוד בתוך הגדרת ניסוי שונה שבו רקמת המעי היא מרותקת ופתח longitudinally (וזה בניגוד ההגדרה שלנו באמצעות מגזר שלם), כפי שתוארה בגיליון קודם ^7,8. בנוסף, רק לאחרונה, טכניקה תוארה ללמוד הפעלת עצבים מביאים גסה בקיר הגס עצם באמצעות הדמית סידן, שוב באמצעות מרותקים, longitudinally נפתח קטע ^9.

גרסה אלטרנטיבית של טכניקת in vivo זה מורכב מתוך מדידת הפעלה עצבית ליד הכניסה מביאה אל חוט השדרה. בקיצור, החיה המסוממת היא להציב בעמדה, דואר נוטהxposing חוט השדרה lumbosacral שאליו העצב מביא פרויקטים עניין באמצעות laminectomy, בניית היטב מולא פרפין באמצעות העור של החתך ומקשטות את הגב שָׁרשׁוֹן על אלקטרודה דו קוטבית פלטינה ^10,11. טכניקה זו יתר על כן מאפשרת לחוקרים לאפיין סיבים מבוססים על מהירות ההולכה שלהם, ולהבדיל C-סיבי unmyelinated מ Aδ-סיב myelinated הדק. יתר על כן, שורשונים הגבו בלעדי מכילים סיבים חושיים מביאים, בניגוד עצבי splanchnic מביא ו efferent המעורבים כאמורים.

הקלטה פריקה עצב מביא במבחנה מפלחת בטן מבודדת יכול להיעשות גם באמצעות דגימות אנושיות, כמו שתי קבוצות מחקר שפורסמו עצמאי כתבי היד הראשונות ב-אדם הקלטת פעילות עצב מביא גס כריתת אדם דגימות ^12,13. יישום טכניקה זו יכולה לגרום יותר בקלות translatiעל נתוני murine למדינה ההומנית, ויכול לאפשר לחוקרים לזהות תרופות מיקוד העצב התחושתי הרגיש בקלות. החשיבות הקלינית של מאפיינים את פעילות עצבים מביאים, כמו גם גילוי ריאגנטים טיפוליים חדשים כי למקד פעילות עצבית מביאה מופקעת, כבר ונדונה בהרחבה על ידי מומחים רבים בתחום ^14-19.

האמורה במבחנת הטכניקה משלימה את ידוע יותר בכינויו במדידת vivo של פעילות עצבית מביא. במהלך in vivo מדידת פעילות עצבית, פעילות עצבית ניתן למדוד ישירות את החיה המסוממת שבמהלכו הקטע של עניין מזוהה ולאחר מכן מחובר לצינורות, וכן פרפין מלא נוזל גם נבנה באמצעות דופן הבטן והעור של המכרסמים ^20. העצב של עניין המביא מזוהה אז, מחולק והניח על אלקטרודה פלטינה דו קוטבית, המאפשר measuremen פעילות העצביתt. טכניקה זו מאפשרת לחוקר לווסת פעילות עצבית מביאה לחיות אם כי חיות מסוממות; ככזה, אפשר ללמוד הפעילות העצבית להגיב הפרעות כגון התנפחות לומינל או עירוי לוריד של תרכובת.

מחקר Translational כיום בעיקר מתמקד ביישום של supernatants נגזרות האנושיות (למשל., ביופסיות גסות, תאי הדם היקפיים mononuclear מעובדים, וכו ') על afferents עכבר jejunal ו / או מעי הגס ^21,22. חוקרים יכולים ישירות להחיל supernatants או לאמבטית האיבר או לתוך תמיסת intraluminal כי perfuses במגזר המעי, כך השפעות שונות של serosal לעומת יישום רירי ניתן ללמוד על פריקת עצב מביאה. ככזה, הוא הוצג supernatans ביופסיה של רירית מעי גס כי מחולים עם תסמונת מעי רגיז יכול לגרום רגישות יתר ב afferents גס עכבר, נוירונים submucous שרקן ואת שורש הגבה עכברנוירונים גנגליון ^21,23,24.

לבסוף, להקליט פעילות עצבית אינו מצטמצם אך בפגיעת mesenteric ו / או נוירונים אגן innervating מערכת העיכול. אחרים הוכיחו כי הקלטות עצבות יכולות להתבצע afferents באספקת הברך ²⁵ משותפים, בעוד שאחרים הגדירו שלפוחית פעילות עצבית מביא גם ^26-28, והוכיחו כי afferents אגן משלפוחית השתן וכן מערכת העיכול להתכנס, ואולי וכתוצאה מכך עצבי crosstalk ^29.