Biz omurgasız koku yolunun ilk üç aşamada koku-uyarılmış yanıtlar karakterize etmek ekstraselüler çoklu ünite kayıt tekniği varyasyonları göstermektedir. Bu teknikler kolayca başka sinir sistemlerinin topluluk etkinliği incelemek için adapte edilebilir.
Olfaktör ipuçları Algılama ve yorumlama birçok organizma hayatta kalmak için çok önemlidir. Dikkate değer, filumlar genelinde türlerin kimyasal algılama için biyolojik yaklaşım evrimsel zaman 1 fazla optimize edildiğini çarpıcı benzer koku sistemleri düşündüren oylandı. Böcek koku sisteminde, koku aksiyon potansiyellerinin trenler içine kimyasal uyaranlara dönüştürmek anteni koku reseptör nöronları (ORN) tarafından transduced edilir. ORNs Duyusal input antennal lob (; omurgalı koku ampul benzer bir yapı AL) ulaştırılıyor. 2,3; al, kokular için sinirsel temsil asıl (nöronlar da projeksiyon nöronlar olarak anılacaktır PNS) oluşan bir grup dağıtılmış zamanmekansal ateşleme kalıpların şeklini alır. AL çıkışı sonradan mansap mantar vücut (MB), olfaktör bellek ve 4,5 öğrenme ile ilişkili bir yapı içinde Kenyon hücreleri (KCS) tarafından işlenir. OnuE, bu koku devrelerde koku-uyarılmış nöral yanıtlarını izlemek üzere elektrofizyolojik kayıt teknikleri sunuyoruz.
İlk olarak, ORNs 6,7 popülasyonlarının seviyesinde koku-uyarılmış yanıtları incelemek için, tek bir sensillum kayıt yöntemi sunulmaktadır. Biz ekstraselüler ORN yanıtları izlemek için elektrotları olarak salin dolu bilenmiş cam pipetler kullanımını tartışmak. Sonra, ekstraselüler ticari bir 16 kanallı elektrot 3 kullanarak PN tepkileri izlemek için bir yöntem mevcut. Ismarlama bir 8-kanal bükülmüş tel tetrode kullanarak benzer bir yaklaşım Kenyon hücre kayıtları 8 için gösterilmiştir. Biz deney düzeneği ve bu tekniklerin her biri için bugünkü temsilcisi kayıt izlerinin ayrıntıları.
En uyarıcılardır nöron toplulukları dağıtılmış kombinatoryal tepkiler çağrıştırıyor. Bu nedenle, çok-nöron aktivitesi eşzamanlı izleme bilgisi beyin sinir devreleri ile temsil edilen ve nasıl işlendiğini uyarıcı özel anlamak için gereklidir. Burada, böcek koku yolu boyunca ilk üç işleme merkezlerinde koku-uyarılmış yanıtlar karakterize ekstrasellüler çoklu ünite kayıt teknikleri göstermiştir. Biz burada sunulan tekniklerin koku kodlama önceki çalışmalarda çok sayıda kullan?…
The authors have nothing to disclose.
Cömert start-up fonları Biyomedikal Mühendisliği Bölümü Washington Üniversitesi, Sistemleri Neuroscience hibe, Donanma Araştırma hibe bir Office için bir McDonnell Merkezi (Grant #: N000141210089) BR yazarlar bu iş için fon aşağıdaki teşekkür etmek istiyorum
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Electrophysiology Equipment | |||
A.C. amplifier | GRASS | Model P55 | for single sensillum recordings |
Audio monitor (model 3300) | A-M Systems | 940000 | |
Custom-made 16 channel pre-amplifier and amplifier | Cal. Tech. Biology Electronics Shop | for AL and MB recordings | |
Data acquisition unit | National Instruments | BNC-2090 | |
Fiber optic light | WPI | SI-72-8 | |
Light source 115 V | WPI | NOVA | |
Manual micromanipulator | WPI | M3301R | for locust brain recordings |
Stereomicroscope1 on boom stand | Leica | M80 | for locust brain recordings |
Stereomicroscope2 | Leica | M205C | for single sensillum recordings |
Vibration-isolation table | TMC | 63-500 series | |
Motorized micromanipulator | Sutter Instruments | MP285/T | |
Oscilloscope | Tektronix | TD2014B | |
Electrodes/Construction Tools | |||
16-channel electrode | NeuroNexus | A2x2-tet-3mm-150-121 | for antennal lobe recordings |
Borosilicate capillary tubes with filament, ID 0.69 mm | Sutter Instruments | BF120-69-10 | for making glass electrodes |
Micropipette puller | Sutter Instruments | P-1000 | |
Function generator | Multimeter Warehouse | SG1639A | for gold-plating electrodes |
Gold plating solution (non cyanide) | SIFCO Industries | NC SPS 5355 | |
Impedance tester | BAK Electronics Inc. | IMP-2 | for gold-plating electrodes |
Switch rotary | Electroswitch | C7D0123N | for gold-plating electrodes |
Pulse isolator | WPI | A365 | for gold-plating electrodes |
Q series electrode holder | Warner Instruments | 64-1091 | |
Silver wire 0.010″ diameter | A-M Systems | 782500 | ground electrode |
8 pin DIP IC socket | Digikey | ED90032-ND | |
Borosilicate capillary tubes with filament, ID 0.58 mm | Warner Instruments | 64-0787 | twisted wire tetrode construction |
Heat gun | Weller | 6966C | |
Rediohm-800 wire | Kanthal Precision Technologies | PF002005 | |
Titer plate shaker | Thermo Scientific | 4625Q | twisting wires |
Carbide scissors, 4.5″ | Biomedical Research Instr | 25-1000 | for cutting twisted tetrode wires |
Fine point tweezers | HECO | 91-EF5-SA | for teasing tetrode wires apart |
Odor Delivery | |||
6 ml syringe | Kendall | 1180600777 | for custom designed activated carbon filter |
Brown odor bottles | Fisher | 08-912-165 | |
Charcoal | BuyActivatedCharcoal.com | GAC-48C | |
Desiccant | Drierite | 23005 | |
Drierite gas drying jar | Fischer Scientific | 09-204 | |
Heat shrink tubing | 3M | EPS-200 | odor filter preparation |
Hypodermic needle aluminum hub, gauge 19 | Kendall | 8881-200136 | for providing inlet and outlet lines for odor bottles |
Mineral oil | Mallinckrodt Chemicals | 6357-04 | for odor dilution |
Nalgene plastic tubing, 890 FEP | Thermo Scientific | 8050-0310 | for carrier gas delivery |
Pneumatic picopump | WPI | sys-pv820 | for odor delivery |
Polyethylene tubing ID 0.86 mm | Intramedic | 427421 | for odor bottle outlet connections and saline profusion tubing |
Stoppers | Lab Pure | 97041 | for sealing odor bottles |
Time tape | PDC | T-534-RP | |
Tubing luer | Cole-Parmer | 30600-66 | |
Vacuum tube | McMaster-Carr | 5488K66 | |
Preparation/Dissection | |||
100 x 15 mm petri dish | VWR International | 89000-304 | |
18 AWG copper stranded wire | Lapp Kabel | 4510013 | wire insulation is used as rubber gaskets |
22 AWG stranded hookup wire | AlphaWire | 1551 | brain platform |
Batik wax | Jacquard | 7946000 | |
Dental periphery Wax | Henry-Schein Dental | 6652151 | |
Electrowaxer | Almore International | 66000 | |
Epoxy, 5 min | Permatex | 84101 | |
Hypodermic needle aluminum hub | Kendall | 8881-200136 | |
Protease from Streptomyces griseus | Sigma-Aldrich | P5147 | for desheathing locust brain |
Suture thread non-sterile | Fisher | NC9087024 | for tying the abdomen after gut removal |
Vetbond | 3M | 1469SB | for sealing amputation sites |
Dumont #1 forceps (coarse) | WPI | 500335 | |
Dumont #5 titanium forceps (fine) | WPI | 14096 | |
Dumont #5SF forceps (super-fine) | WPI | 500085 | desheathing locust brain |
10 cm dissecting scissors | WPI | 14393 | for removing legs and wings |
Vannas scissors (fine) | WPI | 500086 | for removing cuticle, cutting the foregut |
Saline Profusion | |||
Extension set with rate flow regulator | Moore Medical | 69136 | for regulating saline flow |
IV administration set with Y injection site | Moore Medical | 73190 | for regulating saline flow |