تحليل التشريح القوارض الدماغية تلعب دورا مهما في مجال البحوث التجريبية السكتة الدماغية. وفي هذا السياق، فقد اعتبر نضح داخل الأوعية الملونة مع اللاتكس كأداة قياسية لعدة سنوات. ومع ذلك، هذه التقنية يعني القيود التقنية المتميزة، التي تقوض استنساخ لها. هنا، نحن تصف طريقة بسيطة لتصور الأوعية الدماغية بطريقة استنساخه. حقن مزيج من اثنين من الأحبار السوداء الكربون المتاحة تجاريا من خلال نتائج البطين الأيسر في عضلة القلب ملء الأوعية الدماغية كافية من التصور مع التباين العالي. لقد طبقنا بنجاح هذه التقنية لتحديد نقاط تفاغري بين الأراضي الأوعية الدموية الدماغية من الفئران مع خلفيات وراثية مختلفة. وأخيرا نقدم أدلة على أن يمكن الجمع بين هذه الطريقة ورواية بسيطة لتلطيخ السفينة مع كلوريد triphenyltetrazolium (TTC) تلوين – أداة تستخدم على نطاق واسع لمراقبة وتحليل كميات احتشاء في الفئران.
التركيب التشريحي للسفن الدماغي هو أحد المحددات الرئيسية لديناميكا الدم في الدماغ وكذلك شدة الاصابة بعد الشتائم الدماغية. الأوعية الدموية الدماغية بشكل حيوي يستجيب لمختلف الدول المرضية في جسم المريض ويجعلها تظهر اختلافات كبيرة بين السلالات وتحت ظروف من التلاعب الجيني. أساسا، وهي تقنية يمكن الاعتماد عليها لتلطيخ السفينة داخل الجمجمة أمر ضروري من أجل دراسة التسبب في السكتة الدماغية. حتى وقت قريب، واستخدمت مجموعة من التقنيات المختلفة لتصور الأوعية الدموية الدماغية بما في ذلك حقن الراتنج اللزوجة المنخفضة، araldite F، مختلطة مع الجيلاتين الأصباغ المختلفة 1 (أي كارمين الأحمر، الهند الحبر) أو اللاتكس مع 2 أو 3 دون أسود الكربون. وقد نضح من مجمع المطاط الأبيض من خلال الأبهر الصاعد لاول مرة من قبل كويل وJokelainen 3. عدلت مايدا وآخرون (2) وذلك بإضافة بروتوكول كاربون الحبر الأسود إلى مجمع اللاتكس لتحسين التصور المقابل من السفن بعد نضح المياه المالحة من الدماغ. ومع ذلك، من ذوي الخبرة في كثير من الأحيان غير فعالة نضح وشغل كافية من السفن بسبب اللزوجة العالية للمجمع المطاط 4. لذلك، وقد وصفت لنا تقنية بسيطة وفعالة من حيث التكلفة باستخدام مزيج من اثنين من الأحبار السوداء الكربون المتاحة تجاريا (CB1 CB2 و) لتصور الأوعية الدموية الدماغية بطريقة استنساخه 5. وقد أظهرت لنا أن نضح مع CB2 + CB1 في نتائج الفئران في تلطيخ من الأوعية الدماغية أقل بكثير في أعلى كثافة بالمقارنة مع اللاتكس نضح 5. هنا، نحن تصف بروتوكول لدينا للتعرف على نقاط تفاغري بين الأمامي (ACA) والشرايين الدماغية الأوسط (MCA) لدراسة التغيرات في الفئران السفينة مع خلفيات وراثية مختلفة. وأخيرا، فإننا بيان جدوى أسلوبنا في اتصال عابر نموذج نقص التروية الدماغية في الفئران من خلال الجمع بين CB1 +CB2 بوساطة السفينة تلطيخ مع تلطيخ TTC بدرجات مختلفة من الإصابات الدماغية.
يمكن أن يتم نضح من CB2 + CB1 عن طريق الحقن اليدوي بنجاح من دون التدريب المكثف لأنها لا تنطوي على أي جهاز معين يعني أن ضغط معينة 2،3. عدم تجانس النتائج نضح في بروتوكول لدينا هو أيضا لا تذكر. فقط 1 الحيوانية من الحيوانات غير الدماغية 16 و 3 من الحيوانات من 20 الدماغية أظهرت ?…
The authors have nothing to disclose.
نود أن نشكر بريتا Kaltwasser للحصول على المساعدة التقنية لها ممتازة وماهيش كومار تيلي لتنظيم إعداد تصوير الفيديو.
Name of reagent | Company Name | Catalog No. |
Scribtol Schwarz (CB2) | Pelican, Germany | 221 135 |
Stempelfarbe (CB1) | Herlitz PBS AG, Germany | 10417202 |
Gedeo Latex | Pebeo, France | 13042B |