Анализ грызунов цереброваскулярных анатомии играет важную роль в экспериментальных исследованиях инсульта. В этом контексте внутрисосудистого перфузии с цветным латексом была рассмотрена в качестве стандартного инструмента в течение нескольких лет. Однако, этот метод предполагает различные технические ограничения, которые подрывают его воспроизводимости. Здесь мы рассмотрим простой способ для визуализации сосудов головного мозга в воспроизводимым образом. Инъекции смесь двух коммерчески доступных углерода черные чернила через левый желудочек инфаркт результатов в достаточном наполнении сосудов головного мозга с высоким визуализация контраста. Мы успешно применять эту технику, чтобы определить анастомоза между точками церебральных сосудистых территорий мышей с различным генетическим фоном. Мы, наконец, дать показания, что это новый и простой способ окрашивания судна могут быть объединены с трифенилтетразолий хлорид (TTC) окрашивание – широко используемый инструмент для наблюдения и анализа объемов инфаркта у мышей.
Анатомического строения сосудов головного мозга является ключевым фактором для мозга гемодинамики, а также от степени серьезности травмы после ишемических инсультов. Церебральной сосудистой динамически реагирует на различные патофизиологические состояния и оно проявляет значительные различия между штаммами и в условиях генетических манипуляций. По сути, надежная техника для окрашивания внутричерепного судна необходимо в целях изучения патогенеза ишемического инсульта. До недавнего времени, множество различных методов был использован для визуализации мозговой сосудистой включая инъекции смола низкой вязкости, Araldite F, желатина смешивают с различными красителями 1 (т.е. карминно-красные, тушь) или латекса с 2 или без 3 сажи. Перфузии белого латекса соединение через восходящую аорту была впервые сообщил Койл и Jokelainen 3. Maeda и др. 2. Изменили протокол, добавив карбоп черные чернила на латекс соединения для улучшения визуализации контрастности сосудов после солевого перфузии головного мозга. Тем не менее, неэффективная и неадекватная перфузия заполнения сосудов часто испытывал из-за высокой вязкости соединения латекса 4. Таким образом, мы описали простой и экономически эффективный метод, используя смесь двух коммерчески доступных углерода черные чернила (CB1 и CB2) для визуализации мозговой сосудистой воспроизводимым образом 5. Мы показали, что перфузия CB1 + CB2 у мышей приводит к окрашиванию значительно меньших сосудов головного мозга в более высокую плотность по сравнению с латексом перфузии 5. Здесь мы описываем наш протокол для определения точки анастомоза между передней (ACA) и средней мозговой артерии (СМА), чтобы изучить судно изменений у мышей с различным генетическим фоном. Наконец, мы демонстрируем возможности нашей техники в переходном церебральной ишемии модели у мышей путем объединения CB1 +CB2-опосредованной судна окрашивания TTC окрашивания в различные степени ишемического повреждения.
Перфузии + CB1 CB2 ручной инъекций может осуществляться успешно без интенсивного обучения, поскольку оно не связано с каким-либо конкретным устройством, подразумевает определенное давление 2,3. Неоднородность перфузии результатов в нашем протоколе также незначительна. Только 1 живо…
The authors have nothing to disclose.
Мы хотели бы поблагодарить Бритта Kaltwasser за отличную техническую помощь и Махеш Кумар Тели организовать подготовку видеосъемки.
Name of reagent | Company Name | Catalog No. |
Scribtol Schwarz (CB2) | Pelican, Germany | 221 135 |
Stempelfarbe (CB1) | Herlitz PBS AG, Germany | 10417202 |
Gedeo Latex | Pebeo, France | 13042B |