この記事では、マウスの常駐肺間葉系幹細胞(肺MSC)、それらの拡大、特性評価および免疫調節特性の分析の分離を示しています。
組織の居住者間葉系幹細胞(MSC)は、組織の修復や再生、線維症、炎症、血管新生と腫瘍形成の重要な調節因子である。これらの研究は、居住者の肺のMSCは、このような肺線維症(PF)と動脈性高血圧症(PAH)などの疾患時の肺組織の恒常性、損傷および修復の間に役割を果たすことを示唆して一緒になって。ここでは、居住者の肺のMSCの人口を定義するために技術を説明します。この人口の定義は、in vivoでのマーカーのセットを定義を使って肺組織では、フローサイトメトリーおよび特定の細胞型と機能の研究により、十分に特徴付けられた幹細胞集団の繰り返し分離を容易にします。
我々は当初、居住者の肺のMSCの特定の集団を単離するためにBM造血細胞を識別するために使用される手法を適応している。分離の再現性に起因するこれらの細胞は、その後もMSCとして特徴づけられた。その起源は、成体マウスの肺における居住者(のような派生BMとは対照的に)と2を文書化表現型と分子プロファイルとして定義されています。繰り返しこの特徴集団を単離する能力は、組織の恒常性と疾患の間に肺のMSCの生物学的重要性と役割のさらなる研究が可能になります。マウスとヒトの両方の肺組織のin vivoでのこの集団の最近の定義は、傷害と疾病の間に肺の修復を促進する内因性細胞の救出に向けられた治療戦略の開発を容易にします。
The authors have nothing to disclose.
AHA GIA0855953G、NIH 1R01 HL091105 – 01:この作品は、SMMへの補助金によって賄われていた。追加のサポートされていました:DW:NIH RO1DK075013、DDKとKleberg財団、UCCCフローサイトメトリーコア(NIH 5 P30 CA 46934〜15)、UCCCマイクロアレイコア(NCI P30 CA 46934〜14)。
Name of the reagent | Company | Catalogue number | Comments (optional) |
---|---|---|---|
Phosphate buffered saline (PBS) | Sigma | P-5368 | |
Hanks buffered salt solution (HBSS) | Thermo Scientific | SH30588.01 | |
0.2% Worthington type 2 collagenase | Worthington Biochemicals | LS004202 | |
Red blood cell lysis buffer | eBiosciences | 00-4333-57 | |
DMEM | Invitrogen Gibco | 11965-092 | |
Hoechst 33342 dye | Sigma | B2261 | |
CD45-APC | BD Pharmingen | 559864 | |
Propidium iodide | Sigma | 81845 | |
a-MEM | Thermo Scientific | SH30265.01 | |
FBS | Invitrogen | 16000-069 | |
0.5% trypsin/EDTA | Cellgro | 25-053-Cl | |
Complete MesenCult Medium | Stem Cell Technologies | 05511 | |
0.4% w/v Giemsa staining solution | Sigma | GS1L | |
4% paraformaldehyde | Electron Microscopy Services | 15710 | 16% paraformeldehyde is diluted to 4% using PBS |
Carboxyfluorescein succinimidyl ester (CFSE) | Sigma | 21888 |