Summary

الحبل الشوكي الكهربية ثانيا : خارج الخلية التصنيع الكهربائي شفط

Published: February 20, 2011
doi:

Summary

مظاهرة للتصنيع واستخدام إلكترود شفط خارج الخلية المستخدمة لقياس التسجيلات الكهربية من الحبال القوارض الولدان الشوكي<em> في المختبر</em

Abstract

يمكن دراسة وضع circuitries العصبية وتنقل القوارض باستخدام الحبل الشوكي الولدان مولد النمط المركزي (CPG) السلوك. نحن يبرهن على وجود طريقة لصنع أقطاب الشفط التي يتم استخدامها لفحص النشاط CPG ، أو تنقل الوهمية ، وحبال القوارض تشريح العمود الفقري. توضع الحبال القوارض في السائل النخاعي الشوكي الاصطناعي ويتم رسمها جذور بطني في القطب الشفط. هي التي شيدت من قبل القطب الكهربائي تعديل شفط متاحة تجاريا. يستخدم سلك أثقل الفضة بدلا من الأسلاك القياسية التي قدمها القطب متاحة تجاريا. يتم استبدال الزجاج على طرف القطب التجارية مع طرف من البلاستيك لزيادة المتانة. نحن نستعد جهة أقطاب كهربائية المرسومة ، والمصنوعة من أحجام محددة من الأنابيب ، مما يسمح للاستنساخ والاتساق. يتم جمع البيانات باستخدام مكبر للصوت والبرمجيات neurogram الاستحواذ. تجرى التسجيلات على جدول الهواء داخل قفص فاراداي لمنع التدخل الميكانيكية والكهربائية ، على التوالي.

Protocol

يمكن التسجيلات الكهربية المعزولة من النخاع الشوكي تكشف التغيرات الجينية والتنموية إلى الدوائر العصبية 1. أثبتنا سابقا وسيلة لتشريح الحبال الفأر الشوكي الولدان 2. هنا نقدم طريقة لتحضير الأقطاب شفط مفيدة في تسجيل تنقل الوهمية في النخاع الشوكي معزولة 3.</s…

Discussion

ويمكن دراسة تطوير النظام العصبي باستخدام الحبال القوارض معزولة الشوكي. في وجود العصبية ، ويمكن أن تتولد تنقل الوهمية من الحبل الشوكي في شكل من أشكال النشاط الكهربائي 1،3 منقوشة. ويتم إنتاج هذه الدفقات الإيقاعية في 0،2-0،5 هرتز ومنقوشة في التناوبات بين اليسار والي…

Disclosures

The authors have nothing to disclose.

Acknowledgements

صامويل فاف وهو أستاذ في مختبرات التعبير الجيني في معهد سالك للدراسات البيولوجية ومحقق في معهد هوارد هيوز الطبي. وأيد هذا العمل من قبل كريستوفر ودانا ريف مؤسسة. قدم جو Belcovson ، Schnoeker كينت ومايك سوليفان في الموارد الوسائط المتعددة في معهد سولك المساعدة في التصوير والتحرير.

Materials

Material Name Type Company Catalogue Number Comment
PTFE Sub Lite Wall Tubing (Small tubing)   Zeus 36AWG 0.005”ID x 0.003” Wall (Small Parts) Also available in 0.003” to 0.006”
Large tubing (0.86mm (0.34”))   Clay Adams Brand Intramedic Becton Dickinson and Company 427420 0.86mm (0.34”) O.D. 1.27mm (.050”)
Electrode Barrel   A-M Systems 573000  
Adhesive   JB Weld    
Adhesive: Silicone caulk        
Solder and soldering iron        
Bleach        
Xylene        
Silver wire: 0.010”   A-M Systems    
Insect pins: Austerlitz 0.1mm   Fine Science Tools 26002-10  
Magnetic Stand   Narishige GJ-8  
Micromanipulator   Narishige MN 151  
Miniboard (Headstage)   Grass Industries F-15EB/B1  
Polyview Adaptor Unit   Grass Industries PVA 8  
Bipolar Portable Physiodata Amplifier System   Grass Industries 15LT  
ANALOG TO DIGITAL CARD   National Instruments 6035E  
Air Table; Vibraplane   Kinetic Systems    

References

  1. Gallarda, B. W., Sharpee, T. O., Pfaff, S. L., Alaynick, W. A. Defining rhythmic locomotor burst patterns using a continuous wavelet transform. Ann N Y Acad Sci. 1198, 133-139 (2010).
  2. Meyer, A., Gallarda, B. W., Pfaff, S., Alaynick, W. Spinal cord electrophysiology. J Vis Exp. , (2010).
  3. Gallarda, B. W. Segregation of axial motor and sensory pathways via heterotypic trans-axonal signaling. Science. 320, 233-236 (2008).
  4. Landmesser, L. The development of motor projection patterns in the chick hind limb. J Physiol. 284, 391-414 (1978).
  5. Myers, C. P. Cholinergic input is required during embryonic development to mediate proper assembly of spinal locomotor circuits. Neuron. 46, 37-49 (2005).
  6. Chanin, M. The determination of chloride by use of the silver-silver chloride electrode. Science. 119, 323-324 (1954).
  7. Goulding, M. Circuits controlling vertebrate locomotion: moving in a new direction. Nat Rev Neurosci. 10, 507-518 (2009).

Play Video

Cite This Article
Garudadri, S., Gallarda, B., Pfaff, S., Alaynick, W. Spinal Cord Electrophysiology II: Extracellular Suction Electrode Fabrication. J. Vis. Exp. (48), e2580, doi:10.3791/2580 (2011).

View Video