Dissezione della ghiandola linfatica larvale: isolamento dell'organo produttore di emociti Drosophila

Published: April 30, 2023

Abstract

Fonte: Reimels, T. A. e Pfleger, C.M. Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (2016).

Questo video descrive la ghiandola linfaca drosofila – il sito primario dell’ematopoiesi nella larva della mosca – e mostra un protocollo di esempio per sezionare e montare l’organo per l’immunoistochimica e l’imaging fluorescente.

Protocol

Questo protocollo è un estratto da Reimels e Pfleger, Methods to Examine the Lymph Gland and Hemocytes in Drosophila Larvae, J. Vis. Exp. 1. Immunoistochimica della ghiandola linfale larvale NOTA: La ghiandola linfatico si trova a circa un terzo di lunghezza dall’estremità anteriore di una larva leggermente sotto il cervello sul lato dorsale. (Vedere freccia nella figura 1B</strong…

Representative Results

Figura 1: Melanizzazione in vivo delle cellule di cristallo. A) Le larve sono state posizionate singolarmente in tubi PCR prima del riscaldamento. Le frecce rosse indicano larve che non si trovano nella parte inferiore dei tubi. B) Un tipico modello di melanizzazione delle cellule cristalline dopo il riscaldamento, che a volte rivela la ghiandola linfaca (freccia; lato dorsale mo…

Materials

PBS tablets MP Biomedicals 2810305
dissecting dish Corning 7220-85
microcentrifuge tube Denville C2170
silicone dissecting pad, made from Sylgard 184 kit Krayden (distributed through Fisher) NC9644388 (Fisher catalog number) Made in petri dish by mixing components of Sylgard elastomer kit according to manufacturer instructions.
stereomicroscope Morrell Instruments (Nikon distributor) mna42000, mma36300 Nikon models SMZ1000 and SMZ645
tissue wipe VWR 82003-820
forceps Electron Microscopy Sciences 72700-DZ
p200 pipette Eppendorf 3120000054
formaldehyde Fisher BP531-500
Triton Fisher BP151-500
Tween 20 Fisher BP337-500
bovine serum albumin Rocky Mountain Biologicals BSA-BSH-01K
normal goat serum Sigma G9023-10ML
normal donkey serum Sigma D9663-10ML
200 proof ethanol VWR V1001
N-propyl gallate MP Biomedicals 102747
glycerol VWR EM-4750
DAPI (4',6-diamidino-2-phenylindole) Fisher 62248
microscope cover glass, 18 mm circular Fisher 12-545-100
glass microscope slides Fisher 22-034-980
24-well plate Corning 351147
disposable transfer pipet Fisher 13-711-9AM
fluorescence microscope Zeiss Axio Imager.Z1

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Cite This Article
Larval Lymph Gland Dissection: Isolating the Drosophila Hemocyte-Producing Organ. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20117, doi: (2023).

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