This content is Free Access.
章
- 00:05Introduction
- 01:34Engineering a Fluorescence-Based Reporter Cell Line
- 03:10Designing gRNAs for CRISPR/dCas9-Based Epigenetic Silencing of Target Gene
- 04:13Arrayed Transient Delivery of CRISPR/dCas9-Based ETRs in Reporter Cell Line
- 07:19Analyzing Transcriptional Activity of Target Gene Over Time
- 08:11Results: dCas9 ETR-Mediated Epigenetic Silencing of Human B2M Gene by gRNAs
- 09:23Conclusion
В данной работе мы представляем протокол отбора in vitro инженерных транскрипционных репрессоров (ETR) с высокой, долгосрочной, стабильной, целевой эффективностью подавления и низкой общегеномной внецелевой активностью. Этот рабочий процесс позволяет свести первоначальный сложный репертуар кандидатов ETR к короткому списку, пригодному для дальнейшей оценки в терапевтически значимых условиях.
