Infection à Pseudomonas aeruginosa entraîne une morbidité importante chez les hôtes vulnérables. La bibliothèque de mutant d’insertion de transposon non redondante de la souche P. aeruginosa PA14, désignée comme la valeur de PA14NR, facilite l’analyse de la fonctionnalité des gènes dans de nombreux processus. Présenté ici est un protocole de générer des copies de haute qualité de la bibliothèque de mutant PA14NR défini.